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Bosch-Rexroth氣缸常見問題及原因分析
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2018-10-16 10:00 619閱讀次數
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德國Bosch-Rexroth氣缸的作用是將壓縮空氣的壓力能轉換為機械能,驅動機構作直線往復運動、擺動和旋轉運動。它的工作原理:根據工作所需力的大小來確定活塞桿上的推力和拉力。由此來選擇氣缸時應使氣缸的輸出力稍有余量。若缸徑選小了,輸出力不夠,氣缸不能正常工作;但缸徑過大,不僅使設備笨重、成本高,同時耗氣量增大,造成能源浪費。在夾具設計時,應盡量采用增力機構,以減少氣缸的尺寸。1.博士力士樂氣缸是鑄造而成的,汽缸出廠后都要經過時效處理,使汽缸在住鑄造過程中所產生的內應力完全消除。如果時效時間短,那么加工好的汽缸在以后的運行中還會變形。 2.汽缸在運行時受力的情況很復雜,除了受汽缸內外氣體的壓力差和裝在其中的各零部件的重量等靜載荷外,還要承受蒸汽流出靜葉時對靜止部分的反作用力,以及各種連接管道冷熱狀態下對汽缸的作用力,在這些力的相互作用下,汽缸易發生塑性變形造成泄漏。 3.Bosch-Rexroth氣缸的負荷增減過快,特別是快速的啟動、停機和工況變化時溫度變化大、暖缸的方式不正確、停機檢修時打開保溫層過早等,在汽缸中和法蘭上產生很大的熱應力和熱變形。 4.博士力士樂氣缸在機械加工的過程中或經過補焊后產生了應力,但沒有對汽缸進行回火處理加以消除,致使汽缸存在較大的殘余應力,在運行中產生的變形。 5.在安裝或檢修的過程中,由于檢修工藝和檢修技術的原因,使內缸、汽缸隔板、隔板套及汽封套的膨脹間隙不合適,或是掛耳壓板的膨脹間隙不合適,運行后產生巨大的膨脹力使汽缸變形。 6.使用的汽缸密封劑質量不好、雜質過多或是型號不對;汽缸密封劑內若有堅硬的雜質顆粒就會使密封面難以緊密的結合。 7.Bosch-Rexroth氣缸螺栓的緊力不足或是螺栓的材質不合格。汽缸結合面的嚴密性主要靠螺栓的緊力來實現的。機組的起停或是增減負荷時產生的熱應力和高溫會造成螺栓的應力松弛,如果應力不足,螺栓的預緊力就會逐漸減小。如果汽缸的螺栓材質不好,螺栓在長時間的運行當中,在熱應力和汽缸膨脹力的作用下被拉長,發生塑性變形或斷裂,緊力就會不足,使汽缸發生泄漏的現象。 8.博士力士樂氣缸螺栓緊固的順序不正確。一般的汽缸螺栓在緊固時是從中間向兩邊同時緊固,也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固,這樣就會把變形Zda的處的間隙向汽缸前后的自由端轉移,Z后間隙漸漸消失。如果是從兩邊向中間緊,間隙就會集中于中部,汽缸結合面形成弓型間隙,引起蒸汽泄漏。Bosch-Rexroth氣缸氣壓在傳動中將壓縮氣體的壓力能轉換為機械能的氣動執行元件。氣缸有做往復直線運動的和做往復擺動的兩類。做往復直線運動的氣缸又可分為單作用、雙作用、膜片式和沖擊氣缸4種。
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Bosch-Rexroth氣缸常見問題及原因分析
- 德國Bosch-Rexroth氣缸的作用是將壓縮空氣的壓力能轉換為機械能,驅動機構作直線往復運動、擺動和旋轉運動。它的工作原理:根據工作所需力的大小來確定活塞桿上的推力和拉力。由此來選擇氣缸時應使氣缸的輸出力稍有余量。若缸徑選小了,輸出力不夠,氣缸不能正常工作;但缸徑過大,不僅使設備笨重、成本高,同時耗氣量增大,造成能源浪費。在夾具設計時,應盡量采用增力機構,以減少氣缸的尺寸。1.博士力士樂氣缸是鑄造而成的,汽缸出廠后都要經過時效處理,使汽缸在住鑄造過程中所產生的內應力完全消除。如果時效時間短,那么加工好的汽缸在以后的運行中還會變形。 2.汽缸在運行時受力的情況很復雜,除了受汽缸內外氣體的壓力差和裝在其中的各零部件的重量等靜載荷外,還要承受蒸汽流出靜葉時對靜止部分的反作用力,以及各種連接管道冷熱狀態下對汽缸的作用力,在這些力的相互作用下,汽缸易發生塑性變形造成泄漏。 3.Bosch-Rexroth氣缸的負荷增減過快,特別是快速的啟動、停機和工況變化時溫度變化大、暖缸的方式不正確、停機檢修時打開保溫層過早等,在汽缸中和法蘭上產生很大的熱應力和熱變形。 4.博士力士樂氣缸在機械加工的過程中或經過補焊后產生了應力,但沒有對汽缸進行回火處理加以消除,致使汽缸存在較大的殘余應力,在運行中產生的變形。 5.在安裝或檢修的過程中,由于檢修工藝和檢修技術的原因,使內缸、汽缸隔板、隔板套及汽封套的膨脹間隙不合適,或是掛耳壓板的膨脹間隙不合適,運行后產生巨大的膨脹力使汽缸變形。 6.使用的汽缸密封劑質量不好、雜質過多或是型號不對;汽缸密封劑內若有堅硬的雜質顆粒就會使密封面難以緊密的結合。 7.Bosch-Rexroth氣缸螺栓的緊力不足或是螺栓的材質不合格。汽缸結合面的嚴密性主要靠螺栓的緊力來實現的。機組的起停或是增減負荷時產生的熱應力和高溫會造成螺栓的應力松弛,如果應力不足,螺栓的預緊力就會逐漸減小。如果汽缸的螺栓材質不好,螺栓在長時間的運行當中,在熱應力和汽缸膨脹力的作用下被拉長,發生塑性變形或斷裂,緊力就會不足,使汽缸發生泄漏的現象。 8.博士力士樂氣缸螺栓緊固的順序不正確。一般的汽缸螺栓在緊固時是從中間向兩邊同時緊固,也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固,這樣就會把變形Zda的處的間隙向汽缸前后的自由端轉移,Z后間隙漸漸消失。如果是從兩邊向中間緊,間隙就會集中于中部,汽缸結合面形成弓型間隙,引起蒸汽泄漏。Bosch-Rexroth氣缸氣壓在傳動中將壓縮氣體的壓力能轉換為機械能的氣動執行元件。氣缸有做往復直線運動的和做往復擺動的兩類。做往復直線運動的氣缸又可分為單作用、雙作用、膜片式和沖擊氣缸4種。[詳細]
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2018-10-16 10:00
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REXROTH氣缸常見問題及原因分析
- 力士樂是我公司的主推品牌,為了讓大家對力士樂氣缸有更多的了解。我今天來為大家介紹一下REXROTH氣缸常見故障和解決方案。這是我司的極速人員所總結出來的幾點,如果有需要的客戶可以直接來電咨詢我。REXROTH氣缸常見問題及原因分析。 ⒈REXROTH氣缸是鑄造而成的,氣缸出廠后都要經過時效處理,使氣缸在住鑄造過程中所產生的內應力完全消除。如果時效時間短,那么加工好的氣缸在以后的運行中還會變形。 ⒉REXROTH氣缸在運行時受力的情況很復雜,除了受氣缸內外氣體的壓力差和裝在其中的各零部件的重量等靜載荷外,還要承受蒸汽流出靜葉時對靜止部分的反作用力,以及各種連接管道冷熱狀態下對氣缸的作用力,在這些力的相互作用下,氣缸易發生塑性變形造成泄漏。 ⒊REXROTH氣缸的負荷增減過快,特別是快速的啟動、停機和工況變化時溫度變化大、暖缸的方式不正確、停機檢修時打開保溫層過早等,在氣缸中和法蘭上產生很大的熱應力和熱變形。 ⒋REXROTH氣缸在機械加工的過程中或經過補焊后產生了應力,但沒有對氣缸進行回火處理加以消除,致使氣缸存在較大的殘余應力,在運行中產生的變形。 ⒌在安裝或檢修的過程中,由于檢修工藝和檢修技術的原因,使內缸、氣缸隔板、隔板套及汽封套的膨脹間隙不合適,或是掛耳壓板的膨脹間隙不合適,運行后產生巨大的膨脹力使氣缸變形。 ⒍使用的氣缸密封劑質量不好、雜質過多或是型號不對;氣缸密封劑內若有堅硬的雜質顆粒就會使密封面難以緊密的結合。 ⒎REXROTH氣缸螺栓的緊力不足或是螺栓的材質不合格。氣缸結合面的嚴密性主要靠螺栓的緊力來實現的。機組的起停或是增減負荷時產生的熱應力和高溫會造成螺栓的應力松弛,如果應力不足,螺栓的預緊力就會逐漸減小。如果氣缸的螺栓材質不好,螺栓在長時間的運行當中,在熱應力和氣缸膨脹力的作用下被拉長,發生塑性變形或斷裂,緊力就會不足,使氣缸發生泄漏的現象。 ⒏REXROTH氣缸螺栓緊固的順序不正確。一般的氣缸螺栓在緊固時是從中間向兩邊同時緊固,也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固,這樣就會把變形Zda的處的間隙向氣缸前后的自由端轉移,Z后間隙漸漸消失。如果是從兩邊向中間緊,間隙就會集中于中部,氣缸結合面形成弓型間隙,引起蒸汽泄漏。 REXROTH氣缸出現內、外泄漏,一般是因活塞桿安裝偏心,潤滑油供應不足,密封圈和密封環磨損或損壞,REXROTH氣缸內有雜質及活塞桿有傷痕等造成的。所以,當REXROTH氣缸出現內、外泄漏時,應重新調整活塞桿的ZX,以保證活塞桿與缸筒的同軸度;須經常檢查油霧器工作是否可靠,以保證執行元件潤滑良好;當密封圈和密封環出現磨損或損環時,須及時更換;若REXROTH氣缸內存在雜質,應及時清除;活塞桿上有傷痕時,應換新。 REXROTH氣缸的輸出力不足和動作不平穩,一般是因活塞或活塞桿被卡住、潤滑不良、供氣量不足,或缸內有冷凝水和雜質等原因造成的。對此,應調整活塞桿的ZX;檢查油霧器的工作是否可靠;供氣管路是否被堵塞。當REXROTH氣缸內存有冷凝水和雜質時,應及時清除。 REXROTH氣缸的緩沖效果不良,一般是因緩沖密封圈磨損或調節螺釘損壞所致。此時,應更換密封圈和調節螺釘。 REXROTH氣缸的活塞桿和缸蓋損壞,一般是因活塞桿安裝偏心或緩沖機構不起作用而造成的。對此,應調整活塞桿的ZX位置;更換緩沖密封圈或調節螺釘。 解決方案 ⒈REXROTH氣缸變形較大或漏汽嚴重的結合面,采用研刮結合面的方法 如果上缸結合面變形在0.05mm范圍內,以上缸結合面為基準面,在下缸結合面涂紅丹或是壓印藍紙,根據痕跡研刮下缸。如果上缸的結合面變形量大,在上缸涂紅丹,用大平尺研出痕跡,把上缸研平。或是采取機械加工的方法把上缸結合面找平,再以上缸為基準研刮下缸結合面。REXROTH氣缸結合面的研刮一般有兩種方法: ⑴是不緊結合面的螺栓,用千斤頂微微推動上缸前后移動,根據下缸結合面紅丹的著色情況來研刮。這種方法適合結構剛性強的高壓缸。 ⑵是緊結合面的螺栓,根據塞尺的檢查結合面的嚴密性,測出數值及壓出的痕跡,修刮結合面,這種方法可以排除氣缸垂弧對間隙的影響。 ⒉采用適當的氣缸密封材料 因汽輪機REXROTH氣缸密封劑還沒有統一的國家標準和行業標準,制作原料和配方也各不相同,產品質量參差不齊;在選擇汽輪機氣缸密封劑時,就要選在行業內有口碑,產品質量有保證的正規生產廠家,以保證檢修處理后氣缸的嚴密性。 ⒊局部補焊的方法 由于REXROTH氣缸結合面被蒸汽沖刷或腐蝕出溝痕,選用適當的焊條把溝痕添平,用平板或平尺研出痕跡,研刮焊道和結合面在同一平面內。氣缸結合面變形較大或是漏汽嚴重時,在下缸的結合面補焊一條或兩條1020mm寬的密消除間隙封帶,然后用平尺或是扣上缸測量,并涂紅丹研刮,直到消除間隙。此操作的工藝也很簡單,焊前預熱氣缸至150℃,然后在室溫下進行分段退焊或跳焊。選用奧氏體焊條,如A407、A412,焊后用石棉布覆蓋保溫緩冷。待冷卻室溫后進行打磨修刮。 ⒋REXROTH氣缸結合面的涂鍍或噴涂 當REXROTH氣缸結合面大面積漏汽,間隙在0.50mm左右時,為了減少研刮的工作量,可用涂鍍的工藝。用氣缸做陽極,涂具做陰極,在氣缸的結合面上反復涂刷電解溶液,涂層的厚度要根據氣缸結合面間隙的大小而定,涂層的種類要根據氣缸的材料和修刮的工藝而定。噴涂就是用專用的高溫火焰噴槍把金屬粉末加熱至熔化或達到塑性狀態后噴射于處理過的氣缸表面,形成一層具有所需性能的涂層方法。其特點就是設備簡單,操作方便涂層牢固,噴涂后氣缸溫度僅為70℃80℃不會使氣缸產生變形,而且可獲得耐熱,耐磨,抗腐蝕的涂層。注意的是在涂渡和噴涂前都要對缸面進行打磨、除油、拉毛,在涂渡和噴涂后要對涂層進行研刮,保證結合面的嚴密。 ⒌結合面加墊的方法 如果結合面的局部間隙泄漏不是很大,可用80100目的銅網經熱處理使其硬度降低,然后剪成適當的形狀,鋪在結合面的漏汽處,再配以氣缸密封劑。如果結合面的間隙較大,泄漏嚴重,可在上下結合面開寬50mm深5mm的槽,中間鑲嵌IGr18Ni9Ti的齒形墊,齒形墊的厚度一般比槽的深度大0.050.08mm左右,并可用同等形狀的不銹鋼墊片做以調整。 ⒍控制螺栓應力的方法 如果氣缸結合面的變形較小,而且很均勻,可在有間隙處更換新的螺栓,或是適當的加大螺栓的預緊力。按從中間向兩邊同時緊固,也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固螺栓。理論上來說,控制螺栓的預緊力可用公式d/L≤A來計算,但由于此計算的數據與測量的手段還在研究當中,沒有達到推廣,多在螺栓的允許的Zda應力內根據經驗而定。 ⒎新時期采用的高分子材料方法 隨著技術的進一步發展,高分子復合材料逐漸在REXROTH氣缸維護中取得了成功的應用。相對于傳統手段相比,高分子復合材料具有較為優異的耐溫性能,良好的耐壓性能,以及更為出色的密封性能,且具有良好的塑變性,受熱不會固化,密封膜不會被破壞,從而保證了機件密封面的密封;加之易于清除,使用過的密封面可以用無水乙醇或丙酮輕易的擦去,而不會附著于密封面;由于其優異的性能,逐漸受到越來越多使用REXROTH氣缸企業的青睞。[詳細]
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2018-10-16 10:00
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意大利康茂盛氣缸常見問題及原因分析
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2018-09-02 10:00
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德國REXROTH力士樂氣缸的常見問題及解決方法
- 德國REXROTH力士樂氣缸的常見問題及解決方法 德國力士樂氣缸引導活塞在缸內進行直線往復運動的圓筒形金屬機件。工質在發動機氣缸中通過膨脹將熱能轉化為機械能;氣體在壓縮機氣缸中接受活塞壓縮而提高壓力。渦輪機、旋轉活塞式發動機等的殼體通常也稱"氣缸"。氣缸的應用領域:印刷(張力控制)、半導體(點焊機、芯片研磨)、自動化控制、機器人等等。 1.汽缸是鑄造而成的,汽缸出廠后都要經過時效處理,使汽缸在住鑄造過程中所產生的內應力完全消除。如果時效時間短,那么加工好的汽缸在以后的運行中還會變形。 2.汽缸在運行時受力的情況很復雜,除了受汽缸內外氣體的壓力差和裝在其中的各零部件的重量等靜載荷外,還要承受蒸汽流出靜葉時對靜止部分的反作用力,以及各種連接管道冷熱狀態下對汽缸的作用力,在這些力的相互作用下,汽缸易發生塑性變形造成泄漏。 3.汽缸的負荷增減過快,特別是快速的啟動、停機和工況變化時溫度變化大、暖缸的方式不正確、停機檢修時打開保溫層過早等,在汽缸中和法蘭上產生很大的熱應力和熱變形。 4.汽缸在機械加工的過程中或經過補焊后產生了應力,但沒有對汽缸進行回火處理加以消除,致使汽缸存在較大的殘余應力,在運行中產生的變形。 5.在安裝或檢修的過程中,由于檢修工藝和檢修技術的原因,使內缸、汽缸隔板、隔板套及汽封套的膨脹間隙不合適,或是掛耳壓板的膨脹間隙不合適,運行后產生巨大的膨脹力使汽缸變形。 6.使用的汽缸密封劑質量不好、雜質過多或是型號不對;汽缸密封劑內若有堅硬的雜質顆粒就會使密封面難以緊密的結合。 7.汽缸螺栓的緊力不足或是螺栓的材質不合格。汽缸結合面的嚴密性主要靠螺栓的緊力來實現的。機組的起停或是增減負荷時產生的熱應力和高溫會造成螺栓的應力松弛,如果應力不足,螺栓的預緊力就會逐漸減小。如果汽缸的螺栓材質不好,螺栓在長時間的運行當中,在熱應力和汽缸膨脹力的作用下被拉長,發生塑性變形或斷裂,緊力就會不足,使汽缸發生泄漏的現象。 8.汽缸螺栓緊固的順序不正確。一般的汽缸螺栓在緊固時是從中間向兩邊同時緊固,也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固,這樣就會把變形Zda的處的間隙向汽缸前后的自由端轉移,Z后間隙漸漸消失。如果是從兩邊向中間緊,間隙就會集中于中部,汽缸結合面形成弓型間隙,引起蒸汽泄漏。德國REXROTH力士樂氣缸的常見問題及解決方法 1.汽缸變形較大或漏汽嚴重的結合面,采用研刮結合面的方法 如果上缸結合面變形在0.05mm范圍內,以上缸結合面為基準面,在下缸結合面涂紅丹或是壓印藍紙,根據痕跡研刮下缸。如果上缸的結合面變形量大,在上缸涂紅丹,用大平尺研出痕跡,把上缸研平。或是采取機械加工的方法把上缸結合面找平,再以上缸為基準研刮下缸結合面。汽缸結合面的研刮一般有兩種方法: (1)是不緊結合面的螺栓,用千斤頂微微推動上缸前后移動,根據下缸結合面紅丹的著色情況來研刮。這種方法適合結構剛性強的高壓缸。 (2)是緊結合面的螺栓,根據塞尺的檢查結合面的嚴密性,測出數值及壓出的痕跡,修刮結合面,這種方法可以排除汽缸垂弧對間隙的影響。 2.采用適當的汽缸密封材料 因現在汽輪機汽缸密封劑還沒有統一的國家標準和行業標準,制作原料和配方也各不相同,產品質量參差不齊;在選擇汽輪機汽缸密封劑時,就要選在行業內有口碑,產品質量有保證的正規生產廠家,以保證檢修處理后汽缸的嚴密性。 3.局部補焊的方法 由于汽缸結合面被蒸汽沖刷或腐蝕出溝痕,選用適當的焊條把溝痕添平,用平板或平尺研出痕跡,研刮焊道和結合面在同一平面內。汽缸結合面變形較大或是漏汽嚴重時,在下缸的結合面補焊一條或兩條1020mm寬的密消除間隙封帶,然后用平尺或是扣上缸測量,并涂紅丹研刮,直到消除間隙。此操作的工藝也很簡單,焊前預熱汽缸至150℃,然后在室溫下進行分段退焊或跳焊。選用奧氏體焊條,如A407、A412,焊后用石棉布覆蓋保溫緩冷。待冷卻室溫后進行打磨修刮。 4.汽缸結合面的涂鍍或噴涂 當汽缸結合面大面積漏汽,間隙在0.50mm左右時,為了減少研刮的工作量,可用涂鍍的工藝。用汽缸做陽極,涂具做陰極,在汽缸的結合面上反復涂刷電解溶液,涂層的厚度要根據汽缸結合面間隙的大小而定,涂層的種類要根據汽缸的材料和修刮的工藝而定。噴涂就是用專用的高溫火焰噴槍把金屬粉末加熱至熔化或達到塑性狀態后噴射于處理過的汽缸表面,形成一層具有所需性能的涂層方法。其特點就是設備簡單,操作方便涂層牢固,噴涂后汽缸溫度僅為70℃80℃不會使汽缸產生變形,而且可獲得耐熱,耐磨,抗腐蝕的涂層。注意的是在涂渡和噴涂前都要對缸面進行打磨、除油、拉毛,在涂渡和噴涂后要對涂層進行研刮,保證結合面的嚴密。 5.結合面加墊的方法 如果結合面的局部間隙泄漏不是很大,可用80100目的銅網經熱處理使其硬度降低,然后剪成適當的形狀,鋪在結合面的漏汽處,再配以汽缸密封劑。如果結合面的間隙較大,泄漏嚴重,可在上下結合面開寬50mm深5mm的槽,中間鑲嵌IGr18Ni9Ti的齒形墊,齒形墊的厚度一般比槽的深度大0.050.08mm左右,并可用同等形狀的不銹鋼墊片做以調整。 6.控制螺栓應力的方法 如果汽缸結合面的變形較小,而且很均勻,可在有間隙處更換新的螺栓,或是適當的加大螺栓的預緊力。按從中間向兩邊同時緊固,也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固螺栓。理論上來說,控制螺栓的預緊力可用公式d/L≤A來計算,但由于此計算的數據與測量的手段還在研究當中,目前沒有達到推廣,多在螺栓的允許的Zda應力內根據經驗而定。 7.新時期采用的高分子材料方法 目前隨著技術的進一步發展,高分子復合材料逐漸在氣缸維護中取得了成功的應用。相對于傳統手段相比,高分子復合材料具有較為優異的耐溫性能,良好的耐壓性能,以及更為出色的密封性能,且具有良好的塑變性,受熱不會固化,密封膜不會被破壞,從而保證了機件密封面的密封;加之易于清除,使用過的密封面可以用無水乙醇或丙酮輕易的擦去,而不會附著于密封面;由于其優異的性能,逐漸受到越來越多氣缸企業的青睞。德國REXROTH力士樂氣缸的常見問題及解決方法我們公司代理以下優勢品牌:1.品牌:、德國力士樂REXROTH、德國費斯托FESTO、德國寶德BURKERT、德國賀德克HYDAC、德國倍加福P+F、德國圖爾克TURCK、德國施克SICK、德國易福門IFM、德國GSR、德國PILZ、德國巴魯夫BALLUFF、EPRO.,德國西門子。德國哈威HAWE等2.美國阿斯卡ASCO、美國派克PARKER、美國威格士VICKERS、、美國MAC、美國紐曼蒂克NUMATICS.3.意大利ATOS、意大利杰弗倫GEFRAN、英國海隆諾冠、法國高諾斯等.4.日本CKD\日本SMC、東京美我公司在德國及美國都有注冊公司,直接與國外廠家合作,價格和貨期都有非常好的優勢,產品保證原裝的,各新老客戶有需要隨時可聯系謝秋平小姐18002770694.[詳細]
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2018-10-16 10:00
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2013-07-03 00:00
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2016-09-13 00:00
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2014-05-20 00:00
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2015-08-25 00:00
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2018-09-14 10:00
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ELISA中常見問題及解決方法
- 下面分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:1.選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2.加樣可能原因:1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。更多資料請下載文件小鼠elisa試劑盒[詳細]
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2018-10-08 10:01
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免疫熒光技術常見問題及分析
- 免疫熒光技術(Immunofluorescencetechnique)又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展Z早的一種。主要是利用熒光標記的抗體與待測抗原間反應進行抗原或者半抗原物質定位的技術。本文總結了免疫熒光技術常見的問題及解析。1、問:近期要做免疫熒光雙標,不知哪位有免疫熒光雙標技術的詳細步驟及其注意事項?參考見解:我正在做冰凍組織切片的免疫熒光雙染。我的經驗是:(1)選取一抗時要來源于兩種不同的動物,我用的是來源于rabbit和rat的抗體,二抗則是不同熒光信號標記的,我用的是donkeyanti-rabbit-FITC(綠)和donkeyanti-rat-Tex-Red(紅)。(2)我的做法是兩種一抗同時孵育,然后兩種二抗同時孵育。抗體濃度、孵育時間要仔細摸索,我感覺一抗4度孵育過夜比較好,背景比較清晰。(3)我的陽性對照用的是陽性組織切片,陰性對照則分別是家兔和大鼠的IgG,熒光標記物對照是PBS+熒光標記物。(4)封閉血清與二抗來源動物一致,我用的是10%的正常donkey血清。(5)其余步驟同一般免疫熒光單標操作。2、問:用免疫熒光方法做組織切片和培養細胞內的蛋白,兩者操作過程有哪些不同?參考見解:只是固定方法不同。細胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一樣的。3、問:本人擬做Brdu標記神經干細胞免疫熒光,二抗為FITC標記,想請教各位大俠:(1)抗體分裝和熒光顯微鏡觀察時是否一定要在暗室中進行?(2)封片時是否用甘油緩沖液即可,還是用甘油和0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氫鹽緩沖液等量混合封片?(3)免疫酶染色中的3%過氧化氫及2N鹽酸是否還需要用?參考見解:(1)你的二抗是用FITC標記的,為避免熒光分解,分裝及熒光顯微鏡觀察時均要避光;(2)封片**用甘油加0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氫鹽緩沖液,后者能使玻片透明;(3)關于免疫酶染色,如果是用過氧化物酶做標記,就必須用3%H2O2以去除內源性過氧化物酶;2N鹽酸需要使用,目的是使DNA變性,讓Brdu抗體能夠充分地與已經摻入的Brdu結合。4、問:做間接法免疫熒光染色,如何設置對照?參考見解:**是同一視野在未用熒光激發下進行對照,看是否非特異性染色。(1)空白對照:如果你做的是石蠟切片免疫組化,這個對照必須有,目的是看自發熒光,脫蠟后直接在熒光顯微鏡下觀察。(2)陰性對照:標本直接滴加二抗,呈陰性反應。(3)抗原對照:標本加同種動物的未免疫血清,以PBS沖洗后,在加抗免疫球蛋白熒光抗體。因未免疫動物的血清中無特異性抗體,應呈陰性反應。5、問:我做乳腺組織的免疫熒光染色,結果用激光共聚焦顯微鏡看很好:有陽性信號,陰性對照組也沒有熒光,但是拿到熒光顯微鏡下看,我的陰性對照組一片綠,像非特異性染色,到底哪個結果才是真實的呢?參考見解:激光共聚焦顯微鏡的分辨率比普通熒光顯微鏡要高的多,出現上述現象首先要排除熒光顯微鏡的問題,如是不是紫外燈泡壽命到期了或者別的原因,熒光顯微鏡沒有問題,那就以共聚焦顯微鏡的結果為主。免疫標記法可分為以下幾類:熒光免疫法、放射免疫法、酶聯免疫法(ELISA)、偶聯生物素親和素系統的酶免法、時間分辨熒光免疫分析、解離增強鑭系元素熒光免疫分析。免疫熒光實驗的主要步驟包括細胞涂片的制備、細胞的固定及通透(或稱為透化)、細胞封閉、一抗和二抗抗體孵育及熒光檢測等。[詳細]
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2018-11-16 10:02
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ATOS油缸常見故障的原因分析及預防
- 一、故障診斷及處理1、誤動作或動作失靈原因和處理方法有以下幾種:(1)閥芯卡住或閥孔堵塞。當流量閥或方向閥閥芯卡住或閥孔堵塞時,液壓缸易發生誤動作或動作失靈。此時應檢查油液的污染情況;檢查臟物或膠質沉淀物是否卡住閥芯或堵塞閥孔;檢查閥體的磨損情況,清洗、更換系統過濾器,清洗油箱,更換液壓介質。(2)活塞桿與缸筒卡住或液壓缸堵塞。此時無論如何操縱,液壓缸都不動作或動作甚微。這時應檢查活塞及活塞桿密封是否太緊,是否進入臟物及膠質沉淀物:活塞桿與缸筒的軸心線是否對中,易損件和密封件是否失效,所帶負荷是否太大。(3)液壓系統控制壓力太低。控制管路中節流阻力可能過大,流量閥調節不當,控制壓力不合適,壓力源受到干擾。此時應檢查控制壓力源,保證壓力調節到系統的規定值。(4)液壓系統中進入空氣。主要是因為系統中有泄漏發生。此時應檢查液壓油箱的液位,液壓泵吸油側的密封件和管接頭,吸油粗濾器是否太臟。若如此,應補充液壓油,處理密封及管接頭,清洗或更換粗濾芯。(5)液壓缸初始動作緩慢。在溫度較低的情況下,液壓油黏度大,流動性差,導致液壓缸動作緩慢。改善方法是,更換黏溫性能較好的液壓油,在低溫下可借助加熱器或用機器自身加熱以提升啟動時的油溫,系統正常工作油溫應保持在40℃左右。2、工作時不能驅動負載主要表現為活塞桿停位不準、推力不足、速度下降、工作不穩定等,其原因是:(1)液壓缸內部泄漏。液壓缸內部泄漏包括液壓缸體密封、活塞桿與密封蓋密封及活塞密封均磨損過量等引起的泄漏。活塞桿與密封蓋密封泄漏的原因是,密封件折皺、擠壓、撕裂、磨損、老化、變質、變形等,此時應更換新的密封件。活塞密封過量磨損的主要原因是速度控制閥調節不當,造成過高的背壓以及密封件安裝不當或液壓油污染。其次是裝配時有異物進入及密封材料質量不好。其后果是動作緩慢、無力,嚴重時還會造成活塞及缸筒的損壞,出現“拉缸”現象。處理方法是調整速度控制閥,對照安裝說明應做必要的操作和改進。(2)液壓回路泄漏。包括閥及液壓管路的泄漏。檢修方法是通過操縱換向閥檢查并消除液壓連接管路的泄漏。(3)液壓油經溢流閥旁通回油箱。若溢流閥進入臟物卡住閥芯,使溢流閥常開,液壓油會經溢流閥旁通直接流回油箱,導致液壓缸沒油進入。若負載過大,溢流閥的調節壓力雖已達到Zda額定值,但液壓缸仍得不到連續動作所需的推力而不動作。若調節壓力較低,則因壓力不足達不到仍載所需的椎力,表現為推力不夠。此時應檢查并調整溢流閥。3、活塞滑移或爬行液壓缸活塞滑移或爬行將使液壓缸工作不穩定。主要原因如下:(1)液壓缸內部澀滯。液壓缸內部零件裝配不當、零件變形、磨損或形位公差超限,動作阻力過大,使液壓缸活塞速度隨著行程位置的不同而變化,出現滑移或爬行。原因大多是由于零件裝配質量差,表面有傷痕或燒結產生的鐵屑,使阻力增大,速度下降。例如:活塞與活塞桿不同心或活塞桿彎曲,液壓缸或活塞桿對導軌安裝位置偏移,密封環裝得過緊或過松等。解決方法是重新修理或調整,更換損傷的零件及清除鐵屑。(2)潤滑不良或液壓缸孔徑加工超差。因為活塞與缸筒、導軌與活塞桿等均有相對運動,如果潤滑不良或液壓缸孔徑超差,就會加劇磨損,使缸筒ZX線直線性降低。這樣,活塞在液壓缸內工作時,摩擦阻力會時大時小,產生滑移或爬行。排除辦法是先修磨液壓缸,再按配合要求配制活塞,修磨活塞桿,配置導向套。(3)液壓泵或液壓缸進入空氣。空氣壓縮或膨脹會造成活塞滑移或爬行。排除措施是檢查液壓泵,設置專門的排氣裝置,快速操作全行程往返數次排氣。(4)密封件質量與滑移或爬行有直接關系。O形密封圈在低壓下使用時,與U形密封圈比較,由于面壓較高、動靜摩擦阻力之差較大,容易產生滑移或爬行;U型密封圈的面壓隨著壓力的提高而增大,雖然密封效果也相應提高,但動靜摩擦阻力之差也變大,內壓增加,影響橡膠彈性,由于唇緣的接觸阻力增大,密封圈將會傾翻及唇緣伸長,也容易引起滑移或爬行,為防止其傾翻可采用支承環保持其穩定。[詳細]
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2018-12-06 10:00
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