本文由 上海遠慕生物科技有限公司 整理匯編

2015-08-25 00:00 305閱讀次數

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• ELISA試劑盒常見問題及對策

  ELISA試劑盒常見問題及對策[詳細]

  2015-08-25 00:00

  選購指南

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• ELISA中常見問題及解決方法

  下面分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：1.選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2.加樣可能原因：1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是室內溫度較高時）；3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。更多資料請下載文件小鼠elisa試劑盒[詳細]

  2018-10-08 10:01

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• ELISA實驗中常見問題及解決方法

  ELISA中常見問題及解決方法ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。我公司將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來一些啟發，提高試驗質量。下面分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法1選擇試劑選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因：a.血清或血漿標本分離不好即進行加樣；b.手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長（特別是室內溫度較高時）；c.加完標本再加酶試劑時酶液濺出孔外。解決辦法：a.標本為血清：**將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10T，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。b.加樣后及時放入孵箱。c.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。d.如果采用AT或其他全自動加樣，**選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。e.標本較多時，請分批操作。3孵育可能原因：a.孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗徹底；b.孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗徹底。解決辦法：a.貼封片或加蓋；b.按說明步驟嚴格控制操作時間。4洗板可能原因：a.采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。b.采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不徹底；洗板針堵塞，抽吸不完全；洗板不暢，導致洗板效果差。c.反應板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：a.保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后**在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；b.合理安排，或多用幾臺洗板機。5顯色可能原因：a.顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；b.加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：a.顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用；b.加樣時保持顯色劑不外流；c.A、B液應避免接觸金屬器械。6終止可能原因：如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。7讀板如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸;盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。在實際操作中，除了選擇優良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。[詳細]

  2018-09-02 10:00

  產品樣冊

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• ELISA常見問題

  ELISA常見問題[詳細]

  2024-09-16 04:16

  應用文章

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• HPLC常見問題和對策—對實驗人員十分有用

  HPLC常見問題和對策—對實驗人員十分有用[詳細]

  2009-03-09 00:00

  其它

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• ELISA實驗常見問題

  異常：白板結果描述：顯色步驟結束后酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。原因分析：試劑已過有效期，或不同試劑盒組分混用，檢查試劑的組分及批號，確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。對策：不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。整板的黃板現象可能是由于錯加其他試劑造成，如同時操作兩對半試劑時，測HbsAb板用于測HBsAg等；實驗前檢查試劑的組分及批號，確認所有組分均屬于對應的試劑盒。如盛標本的試管四周常有血痂，易脫落，應遠離酶標板。Elisa試劑盒超過有效期的產品可能會產生很弱的信號；試劑盒沒有按規定進行留存，受高溫影響；實驗前檢查試劑的組分及批號，確認試劑未過期。孵育溫度應控制在37-38℃，孵育時間嚴格按照說明書操作，保溫期內不宜多開門，以免影響保溫。花板，一般是由于臨床標本的收集、處理和留存方法不當造成，放置時間（自然放置1~2h）及離心轉（3000r/min）、離心時間（15min）應引起注意。試劑、樣品用前未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應置室溫平衡，20分鐘左右。錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴格按說明書的步驟操作，加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致，以減少漏加現象。實驗結束后，陰陽性對照正常，質控正常，但臨床標本感覺顯色較弱，待測標本中可能不含強陽性標本，故結果可能是正常的，如有懷疑，可復檢標本加入疊氮鈉作為防腐劑，酶免實驗中的標本禁用疊氮鈉作為防腐劑，可選用proclin、硫柳汞等其他防腐劑，陰陽性對照正常，但質控、參考品或個別弱陽性標本未能檢出。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用酶標對吸頭的污染以及對盛放顯色劑容器的污染都易造成黃板現象；避免試劑組分間的交叉污染，確保吸頭、容器的干凈，顯色劑在光照條件下放置過久，實驗前已變藍，顯色劑A、B未使用前避光留存，孵育溫度過高或孵育時間過長；孵育溫度應控制在37-38℃，孵育時間嚴格按照說明書操作。標本在一周內使用的，可存于2-8℃，如需長期留存，應置于-20℃以下留存。不要將ELISA試劑盒長時間置于常溫下，按使用規定儲藏。出現隨機性的花板、跳孔現象樣品離心不完全，反應孔內發生凝血或殘留細胞成分；充分離心，3000rpm6分鐘以上。儀器設定不正確，濾光片不匹配，重新設定酶標儀的參數，特別是檢查濾光片是否匹配，靈敏度過高、板底高、高背景終止后，整板結果顯現均一的黃色或淡黃色；或陰陽性對照、質控正常，標本陰性標本，OD值過高。特別是洗滌時每孔未注滿洗液，易造成花板黃板現象，嚴格按說明書要求洗板。洗板及加樣過程中，酶標受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力，確認盛酶標的容器不含酶YZ劑如疊氮鈉等，確認配制洗液的容器已洗干凈。加樣時交叉污染；加標本時盡量避免交叉污染。[詳細]

  2018-09-27 10:00

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• ELISA標準操作及技術服務的常見問題分析

  ELISA標準操作及技術服務的常見問題分析[詳細]

  2024-09-28 12:26

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• 凍干機維護及常見問題.

  凍干機維護及常見問題.[詳細]

  2013-07-03 00:00

  選購指南

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• 7290A 常見問題及回答

  7290A 常見問題及回答[詳細]

  2015-07-06 00:00

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• 細胞培養常見問題及解答

  細胞培養常見問題及解答[詳細]

  2016-09-13 00:00

  期刊論文

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• 水泵機械密封滲漏原因分析及對策

  水泵機械密封滲漏原因分析及對策[詳細]

  2014-05-20 00:00

  操作手冊

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• 粉碎機常見故障及處理對策分析

  在飼料廠制配飼料的過程中，粉碎機直接影響著生產效率，其作用不可代替。為了保證生產的正常進行，分析出現故障的原因并掌握相對應的解決方法就變得尤為重要。粉碎機系統由粉碎機和電動機組成，因此發生的故障也應分為機械故障和電氣故障兩種。機械故障通常包括振動、堵塞、軸承發熱、篩網破爛等;常見的電氣故障有電機升溫過高、電動機繞組以及控制回路的問題。[詳細]

  2018-09-07 17:39

  標準

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• 德國REXROTH齒輪油泵常見故障及對策

  德國REXROTH齒輪油泵常見故障及對策(1)德國REXROTH齒輪油泵故障現象：泵不能排料，故障原因：a、旋轉方向相反;b、吸入或排出閥關閉;c、入口無料或壓力過低;d、粘度過高，泵無法咬料對策：a、確認旋轉方向;b、確認閥門是否關閉;c、檢查閥門和壓力表;d、檢查液體粘度，以低速運轉時按轉速比例的流量是否出現，若有流量，則流入不足。(2)德國REXROTH齒輪油泵故障現象：聲音異常，故障原因：a、聯軸節偏心大或潤滑不良b、電動機故障;c、減速機異常;d、軸封處安裝不良;e、軸變形或磨損對策：a、找正或充填潤滑脂;b、檢查電動機;c、檢查軸承和齒輪;d、檢查軸封;e、停車解體檢查(3)故障現象：泵流量不足，故障原因：a、吸入或排出閥關閉;b、入口壓力低;c、出口管線堵塞;d、填料箱泄漏;e、轉速過低對策：a、確認閥門是否關閉;b、檢查閥門是否打開;c、確認排出量是否正常;d、緊固;大量泄露漏影響生產時，應停止運轉，拆卸檢查;e、檢查泵軸實際轉速當一對齒輪在泵體內做嚙合傳動時，嚙合區前邊空間的壓力降低而產生局部真空，油池內的油在大氣壓作用下進入高溫齒輪油泵低壓區內的進油口，隨著齒輪的傳動，齒槽中的油不斷沿箭頭方向被帶至后邊的出油口把油壓出，從而提高油的壓力，送至機器中需要潤滑的部位。主動齒輪通過軸端的皮帶輪與動力(如電動機)相連接，為了防止油沿主動齒輪軸外滲，用密封填料、填料壓蓋、螺釘組成一套密封裝置。高溫齒輪油泵泵內運轉零件均利用其輸送的介質潤滑由齒輪,軸,泵體泵蓋,軸端密封等零部件組成,液壓齒輪泵所有零件均選用合適的耐溫材料制造。KCG型泵配有安全閥,可防止超載對泵和電機造成損壞。結構特點：高溫齒輪油泵由齒輪,軸,泵體泵蓋,軸端密封等零部件組成,所有零件均選用合適的耐溫材料制造.泵內運轉零件均利用其輸送的介質潤滑。應用范圍：高溫齒輪油泵(液壓齒輪泵)適用于輸送不含固體顆粒和纖維,無腐蝕性的高溫液體,介質溫度可達250℃,粘度為5-1500cst。用途：高溫齒輪油泵用于塑料橡膠加工工業,紡織印染工業,涂料工業,木材加工工業,食品業,造紙印刷等液態熱載體加熱載體加熱傳輸等各種工業。提高高溫齒輪泵運行壽命的措施，因泵體在高溫下運轉,故冷態安裝時配管上應設鉸支座,以防升溫后配管位。提高德國REXROTH齒輪油泵運行壽命的措施：1、聯軸節必須在泵體升溫后熱找正，以避免運轉時造成附加力矩。2、因泵體在高溫下運轉，故冷態安裝時配管上應設鉸支座，以防升溫后配管位移。3、CQB-G高溫磁力泵出口壓力測點要設聯鎖停止報警，否則，液壓齒輪泵一旦排出管道受阻，易造成泵體損壞。4、泵起動時，在出口無壓力形成時，不可盲目提速，以防止軸或軸承過早損壞。5、泵體熱媒夾套的溫度可稍低于前后夾套管的熱媒溫度。因為熔體粘度與剪切率成遞減函數關系，齒輪的擠壓，軸承的剪切將使熔體溫度經過泵后上升3～5℃，降低熱媒溫度可防止熔體降解。資料表明，通過降低軸承區的溫度，可大大增加軸承的承載能力，不需要更換大容量的泵，僅僅通過增加轉速就可使用齒輪泵的輸出能力增加50%。6、清洗移液時，不要用泵輸送清洗液，應拆下內件，移液結束后再安裝，以免泵內混入異物我們公司代理以下優勢品牌：1.品牌：、德國力士樂REXROTH、德國費斯托FESTO、德國寶德BURKERT、德國賀德克HYDAC、德國倍加福P+F、德國圖爾克TURCK、德國施克SICK、德國易福門IFM、德國GSR、德國PILZ、德國巴魯夫BALLUFF、EPRO.，德國西門子。德國哈威HAWE等2.美國阿斯卡ASCO、美國派克PARKER、美國威格士VICKERS、、美國MAC、美國紐曼蒂克NUMATICS.3.意大利ATOS、意大利杰弗倫GEFRAN、英國海隆諾冠、法國高諾斯等.4.日本CKD\日本SMC、日本豐興、日本大金、日本不二越、日本黑田精工、日本太陽鐵工、東京美我公司在德國及美國都有注冊公司,直接與國外廠家合作,價格和貨期都有非常好的優勢,產品保證原裝的,歡迎新老客戶來電18002770694咨詢。德國REXROTH齒輪油泵常見故障及對策[詳細]

  2018-10-16 10:00

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• 小鼠ELISA試劑盒在實驗中常見問題匯總

  小鼠ELISA試劑盒在實驗中常見問題匯總點擊次數：21發布時間：2013-8-28檢測用所有試劑全部都為進口試劑，適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本，靈敏度極高。我們專業的ELISA技術服務，保證對所售任何產品一概負責到底，每一份實驗結果都真實可靠!　　小鼠ELISA試劑盒注意事項：　　1）在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。　　2）我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本，請將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條液體類標本：　　大鼠ELISA試劑盒包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。　　1）血清：　　室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。　　2）血漿：　　應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。　　3）尿液：　　用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。　　4）細胞培養上清：　　A、檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。　　B、檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。　　5）組織標本：　　小鼠ELISA試劑盒切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。[詳細]

  2018-09-19 10:00

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• 超聲波清洗機常見問題及解決辦法

  超聲波清洗機常見問題及解決辦法[詳細]

  2014-11-12 00:00

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• 雙層玻璃反應釜常見問題及解決方法

  雙層玻璃反應釜常見問題及解決方法[詳細]

  2014-08-28 00:00

  安裝說明

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• 真空干燥箱原理及常見問題

  真空干燥箱原理及常見問題[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• Bosch-Rexroth氣缸常見問題及原因分析

  德國Bosch-Rexroth氣缸的作用是將壓縮空氣的壓力能轉換為機械能，驅動機構作直線往復運動、擺動和旋轉運動。它的工作原理：根據工作所需力的大小來確定活塞桿上的推力和拉力。由此來選擇氣缸時應使氣缸的輸出力稍有余量。若缸徑選小了，輸出力不夠，氣缸不能正常工作；但缸徑過大，不僅使設備笨重、成本高，同時耗氣量增大，造成能源浪費。在夾具設計時，應盡量采用增力機構，以減少氣缸的尺寸。1．博士力士樂氣缸是鑄造而成的，汽缸出廠后都要經過時效處理，使汽缸在住鑄造過程中所產生的內應力完全消除。如果時效時間短，那么加工好的汽缸在以后的運行中還會變形。　　2．汽缸在運行時受力的情況很復雜，除了受汽缸內外氣體的壓力差和裝在其中的各零部件的重量等靜載荷外，還要承受蒸汽流出靜葉時對靜止部分的反作用力，以及各種連接管道冷熱狀態下對汽缸的作用力，在這些力的相互作用下，汽缸易發生塑性變形造成泄漏。　　3．Bosch-Rexroth氣缸的負荷增減過快，特別是快速的啟動、停機和工況變化時溫度變化大、暖缸的方式不正確、停機檢修時打開保溫層過早等，在汽缸中和法蘭上產生很大的熱應力和熱變形。　　4．博士力士樂氣缸在機械加工的過程中或經過補焊后產生了應力，但沒有對汽缸進行回火處理加以消除，致使汽缸存在較大的殘余應力，在運行中產生的變形。　　5．在安裝或檢修的過程中，由于檢修工藝和檢修技術的原因，使內缸、汽缸隔板、隔板套及汽封套的膨脹間隙不合適，或是掛耳壓板的膨脹間隙不合適，運行后產生巨大的膨脹力使汽缸變形。　　6．使用的汽缸密封劑質量不好、雜質過多或是型號不對；汽缸密封劑內若有堅硬的雜質顆粒就會使密封面難以緊密的結合。　　7．Bosch-Rexroth氣缸螺栓的緊力不足或是螺栓的材質不合格。汽缸結合面的嚴密性主要靠螺栓的緊力來實現的。機組的起停或是增減負荷時產生的熱應力和高溫會造成螺栓的應力松弛，如果應力不足，螺栓的預緊力就會逐漸減小。如果汽缸的螺栓材質不好，螺栓在長時間的運行當中，在熱應力和汽缸膨脹力的作用下被拉長，發生塑性變形或斷裂，緊力就會不足，使汽缸發生泄漏的現象。　　8．博士力士樂氣缸螺栓緊固的順序不正確。一般的汽缸螺栓在緊固時是從中間向兩邊同時緊固，也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固，這樣就會把變形Zda的處的間隙向汽缸前后的自由端轉移，Z后間隙漸漸消失。如果是從兩邊向中間緊，間隙就會集中于中部，汽缸結合面形成弓型間隙，引起蒸汽泄漏。Bosch-Rexroth氣缸氣壓在傳動中將壓縮氣體的壓力能轉換為機械能的氣動執行元件。氣缸有做往復直線運動的和做往復擺動的兩類。做往復直線運動的氣缸又可分為單作用、雙作用、膜片式和沖擊氣缸4種。[詳細]

  2018-10-16 10:00

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• REXROTH氣缸常見問題及原因分析

  力士樂是我公司的主推品牌，為了讓大家對力士樂氣缸有更多的了解。我今天來為大家介紹一下REXROTH氣缸常見故障和解決方案。這是我司的極速人員所總結出來的幾點，如果有需要的客戶可以直接來電咨詢我。REXROTH氣缸常見問題及原因分析。　　⒈REXROTH氣缸是鑄造而成的，氣缸出廠后都要經過時效處理，使氣缸在住鑄造過程中所產生的內應力完全消除。如果時效時間短，那么加工好的氣缸在以后的運行中還會變形。　　⒉REXROTH氣缸在運行時受力的情況很復雜，除了受氣缸內外氣體的壓力差和裝在其中的各零部件的重量等靜載荷外，還要承受蒸汽流出靜葉時對靜止部分的反作用力，以及各種連接管道冷熱狀態下對氣缸的作用力，在這些力的相互作用下，氣缸易發生塑性變形造成泄漏。　　⒊REXROTH氣缸的負荷增減過快，特別是快速的啟動、停機和工況變化時溫度變化大、暖缸的方式不正確、停機檢修時打開保溫層過早等，在氣缸中和法蘭上產生很大的熱應力和熱變形。　　⒋REXROTH氣缸在機械加工的過程中或經過補焊后產生了應力，但沒有對氣缸進行回火處理加以消除，致使氣缸存在較大的殘余應力，在運行中產生的變形。　　⒌在安裝或檢修的過程中，由于檢修工藝和檢修技術的原因，使內缸、氣缸隔板、隔板套及汽封套的膨脹間隙不合適，或是掛耳壓板的膨脹間隙不合適，運行后產生巨大的膨脹力使氣缸變形。　　⒍使用的氣缸密封劑質量不好、雜質過多或是型號不對；氣缸密封劑內若有堅硬的雜質顆粒就會使密封面難以緊密的結合。　　⒎REXROTH氣缸螺栓的緊力不足或是螺栓的材質不合格。氣缸結合面的嚴密性主要靠螺栓的緊力來實現的。機組的起停或是增減負荷時產生的熱應力和高溫會造成螺栓的應力松弛，如果應力不足，螺栓的預緊力就會逐漸減小。如果氣缸的螺栓材質不好，螺栓在長時間的運行當中，在熱應力和氣缸膨脹力的作用下被拉長，發生塑性變形或斷裂，緊力就會不足，使氣缸發生泄漏的現象。　　⒏REXROTH氣缸螺栓緊固的順序不正確。一般的氣缸螺栓在緊固時是從中間向兩邊同時緊固，也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固，這樣就會把變形Zda的處的間隙向氣缸前后的自由端轉移，Z后間隙漸漸消失。如果是從兩邊向中間緊，間隙就會集中于中部，氣缸結合面形成弓型間隙，引起蒸汽泄漏。　　REXROTH氣缸出現內、外泄漏，一般是因活塞桿安裝偏心，潤滑油供應不足，密封圈和密封環磨損或損壞，REXROTH氣缸內有雜質及活塞桿有傷痕等造成的。所以，當REXROTH氣缸出現內、外泄漏時，應重新調整活塞桿的ZX，以保證活塞桿與缸筒的同軸度；須經常檢查油霧器工作是否可靠，以保證執行元件潤滑良好；當密封圈和密封環出現磨損或損環時，須及時更換；若REXROTH氣缸內存在雜質，應及時清除；活塞桿上有傷痕時，應換新。　　REXROTH氣缸的輸出力不足和動作不平穩，一般是因活塞或活塞桿被卡住、潤滑不良、供氣量不足，或缸內有冷凝水和雜質等原因造成的。對此，應調整活塞桿的ZX；檢查油霧器的工作是否可靠；供氣管路是否被堵塞。當REXROTH氣缸內存有冷凝水和雜質時，應及時清除。　　REXROTH氣缸的緩沖效果不良，一般是因緩沖密封圈磨損或調節螺釘損壞所致。此時，應更換密封圈和調節螺釘。　　REXROTH氣缸的活塞桿和缸蓋損壞，一般是因活塞桿安裝偏心或緩沖機構不起作用而造成的。對此，應調整活塞桿的ZX位置；更換緩沖密封圈或調節螺釘。　　解決方案　　⒈REXROTH氣缸變形較大或漏汽嚴重的結合面，采用研刮結合面的方法　　如果上缸結合面變形在0.05mm范圍內，以上缸結合面為基準面，在下缸結合面涂紅丹或是壓印藍紙，根據痕跡研刮下缸。如果上缸的結合面變形量大，在上缸涂紅丹，用大平尺研出痕跡，把上缸研平。或是采取機械加工的方法把上缸結合面找平，再以上缸為基準研刮下缸結合面。REXROTH氣缸結合面的研刮一般有兩種方法：　　⑴是不緊結合面的螺栓，用千斤頂微微推動上缸前后移動，根據下缸結合面紅丹的著色情況來研刮。這種方法適合結構剛性強的高壓缸。　　⑵是緊結合面的螺栓，根據塞尺的檢查結合面的嚴密性，測出數值及壓出的痕跡，修刮結合面，這種方法可以排除氣缸垂弧對間隙的影響。　　⒉采用適當的氣缸密封材料　　因汽輪機REXROTH氣缸密封劑還沒有統一的國家標準和行業標準，制作原料和配方也各不相同，產品質量參差不齊；在選擇汽輪機氣缸密封劑時，就要選在行業內有口碑，產品質量有保證的正規生產廠家，以保證檢修處理后氣缸的嚴密性。　　⒊局部補焊的方法　　由于REXROTH氣缸結合面被蒸汽沖刷或腐蝕出溝痕，選用適當的焊條把溝痕添平，用平板或平尺研出痕跡，研刮焊道和結合面在同一平面內。氣缸結合面變形較大或是漏汽嚴重時，在下缸的結合面補焊一條或兩條1020mm寬的密消除間隙封帶，然后用平尺或是扣上缸測量，并涂紅丹研刮，直到消除間隙。此操作的工藝也很簡單，焊前預熱氣缸至150℃，然后在室溫下進行分段退焊或跳焊。選用奧氏體焊條，如A407、A412，焊后用石棉布覆蓋保溫緩冷。待冷卻室溫后進行打磨修刮。　　⒋REXROTH氣缸結合面的涂鍍或噴涂　　當REXROTH氣缸結合面大面積漏汽，間隙在0.50mm左右時，為了減少研刮的工作量，可用涂鍍的工藝。用氣缸做陽極，涂具做陰極，在氣缸的結合面上反復涂刷電解溶液，涂層的厚度要根據氣缸結合面間隙的大小而定，涂層的種類要根據氣缸的材料和修刮的工藝而定。噴涂就是用專用的高溫火焰噴槍把金屬粉末加熱至熔化或達到塑性狀態后噴射于處理過的氣缸表面，形成一層具有所需性能的涂層方法。其特點就是設備簡單，操作方便涂層牢固，噴涂后氣缸溫度僅為70℃80℃不會使氣缸產生變形，而且可獲得耐熱，耐磨，抗腐蝕的涂層。注意的是在涂渡和噴涂前都要對缸面進行打磨、除油、拉毛，在涂渡和噴涂后要對涂層進行研刮，保證結合面的嚴密。　　⒌結合面加墊的方法　　如果結合面的局部間隙泄漏不是很大，可用80100目的銅網經熱處理使其硬度降低，然后剪成適當的形狀，鋪在結合面的漏汽處，再配以氣缸密封劑。如果結合面的間隙較大，泄漏嚴重，可在上下結合面開寬50mm深5mm的槽，中間鑲嵌IGr18Ni9Ti的齒形墊，齒形墊的厚度一般比槽的深度大0.050.08mm左右，并可用同等形狀的不銹鋼墊片做以調整。　　⒍控制螺栓應力的方法　　如果氣缸結合面的變形較小，而且很均勻，可在有間隙處更換新的螺栓，或是適當的加大螺栓的預緊力。按從中間向兩邊同時緊固，也就是從垂弧Zda處或是受力變形Zda的地方緊固螺栓。理論上來說，控制螺栓的預緊力可用公式d/L≤A來計算，但由于此計算的數據與測量的手段還在研究當中，沒有達到推廣，多在螺栓的允許的Zda應力內根據經驗而定。　　⒎新時期采用的高分子材料方法　　隨著技術的進一步發展，高分子復合材料逐漸在REXROTH氣缸維護中取得了成功的應用。相對于傳統手段相比，高分子復合材料具有較為優異的耐溫性能，良好的耐壓性能，以及更為出色的密封性能，且具有良好的塑變性，受熱不會固化，密封膜不會被破壞，從而保證了機件密封面的密封；加之易于清除，使用過的密封面可以用無水乙醇或丙酮輕易的擦去，而不會附著于密封面；由于其優異的性能，逐漸受到越來越多使用REXROTH氣缸企業的青睞。[詳細]

  2018-10-16 10:00

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• 免疫熒光技術常見問題及分析

  免疫熒光技術（Immunofluorescencetechnique）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展Z早的一種。主要是利用熒光標記的抗體與待測抗原間反應進行抗原或者半抗原物質定位的技術。本文總結了免疫熒光技術常見的問題及解析。1、問：近期要做免疫熒光雙標，不知哪位有免疫熒光雙標技術的詳細步驟及其注意事項?參考見解：我正在做冰凍組織切片的免疫熒光雙染。我的經驗是：（1）選取一抗時要來源于兩種不同的動物，我用的是來源于rabbit和rat的抗體，二抗則是不同熒光信號標記的，我用的是donkeyanti-rabbit-FITC（綠）和donkeyanti-rat-Tex-Red（紅）。（2）我的做法是兩種一抗同時孵育，然后兩種二抗同時孵育。抗體濃度、孵育時間要仔細摸索，我感覺一抗4度孵育過夜比較好，背景比較清晰。（3）我的陽性對照用的是陽性組織切片，陰性對照則分別是家兔和大鼠的IgG，熒光標記物對照是PBS+熒光標記物。（4）封閉血清與二抗來源動物一致，我用的是10%的正常donkey血清。（5）其余步驟同一般免疫熒光單標操作。2、問：用免疫熒光方法做組織切片和培養細胞內的蛋白，兩者操作過程有哪些不同?參考見解：只是固定方法不同。細胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一樣的。3、問：本人擬做Brdu標記神經干細胞免疫熒光，二抗為FITC標記，想請教各位大俠：（1）抗體分裝和熒光顯微鏡觀察時是否一定要在暗室中進行?（2）封片時是否用甘油緩沖液即可，還是用甘油和0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氫鹽緩沖液等量混合封片?（3）免疫酶染色中的3%過氧化氫及2N鹽酸是否還需要用?參考見解：（1）你的二抗是用FITC標記的，為避免熒光分解，分裝及熒光顯微鏡觀察時均要避光;（2）封片**用甘油加0.5mmol/LpH9.0-9.5的碳酸氫鹽緩沖液，后者能使玻片透明;（3）關于免疫酶染色，如果是用過氧化物酶做標記，就必須用3%H2O2以去除內源性過氧化物酶;2N鹽酸需要使用，目的是使DNA變性，讓Brdu抗體能夠充分地與已經摻入的Brdu結合。4、問：做間接法免疫熒光染色，如何設置對照?參考見解：**是同一視野在未用熒光激發下進行對照，看是否非特異性染色。（1）空白對照：如果你做的是石蠟切片免疫組化，這個對照必須有，目的是看自發熒光，脫蠟后直接在熒光顯微鏡下觀察。（2）陰性對照：標本直接滴加二抗，呈陰性反應。（3）抗原對照：標本加同種動物的未免疫血清，以PBS沖洗后，在加抗免疫球蛋白熒光抗體。因未免疫動物的血清中無特異性抗體，應呈陰性反應。5、問：我做乳腺組織的免疫熒光染色，結果用激光共聚焦顯微鏡看很好：有陽性信號，陰性對照組也沒有熒光，但是拿到熒光顯微鏡下看，我的陰性對照組一片綠，像非特異性染色，到底哪個結果才是真實的呢?參考見解：激光共聚焦顯微鏡的分辨率比普通熒光顯微鏡要高的多，出現上述現象首先要排除熒光顯微鏡的問題，如是不是紫外燈泡壽命到期了或者別的原因，熒光顯微鏡沒有問題，那就以共聚焦顯微鏡的結果為主。免疫標記法可分為以下幾類：熒光免疫法、放射免疫法、酶聯免疫法（ELISA）、偶聯生物素親和素系統的酶免法、時間分辨熒光免疫分析、解離增強鑭系元素熒光免疫分析。免疫熒光實驗的主要步驟包括細胞涂片的制備、細胞的固定及通透（或稱為透化）、細胞封閉、一抗和二抗抗體孵育及熒光檢測等。[詳細]

  2018-11-16 10:02

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