蛋白質分析和鑒定方法最常用的就是ELISA和Western Blot（以下簡稱WB），那到底該選哪種呢？

ELISA簡單，還是WB簡單？

是不是二選一就可以了？

靈敏度高、應用領域廣泛，檢測樣本濃度可低至pg/ml，操作相對簡單，用于確定樣品中是否存在蛋白質的高效方法，亦可精確定量蛋白質的濃度。

ELISA 具有包被、封閉、檢測、 結果讀取4個常規操作步驟，有直接、間接、夾心及競爭檢測4種主要類型。

ELISA標準曲線示例

優點：適合體液(血清、尿液等)、細胞上清樣本；靈敏度高，操作簡單、高效、快速（1-2h），需樣品量較少，可以同時進行多個樣本分析。另外，也可靈活地DIY 檢測試劑盒，即可降低成本，又解決了實驗需求；同時ELISA可搭配實驗室高通量或自動化設備，實現自動化操作。

缺點：實驗操作過程中，由于操作問題、樣品污染、使用低質量試劑等原因，其特異性方面經常受到影響，可能會產生假陽性或假陰性結果；此外試劑盒中的抗體組分須低溫運輸、儲存；ELISA無法提供有關目標蛋白的質量和豐度等其他信息。

優點：適用于組織或細胞裂解液樣本；檢測結果簡單易懂；特異性高，能夠從多種蛋白質中識別目標蛋白；可提供目標蛋白的分子量、表達豐度等信息；熒光Western Blot，可以在一個實驗中進行多重檢測，檢測多種蛋白質。

缺點：傳統操作步驟繁瑣、耗時（1到2天），體系如果沒有優化，容易出現信號衰減快、高背景等情況，導致不理想的檢測結果；同時檢測靶蛋白的數量受限于一抗和二抗的組合；通常被用作驗證方法。

使用iBright 成像系統捕獲的熒光Western Blot圖像示例

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