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用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞膜蛋白的表達(dá)情況的操作步驟

漫天飛a 2018-12-15 16:37:12 379  瀏覽
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我想用流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率,轉(zhuǎn)染細(xì)胞會(huì)發(fā)綠色熒光, 問(wèn)題一、 步驟是不是這樣的: 1.收集細(xì)胞:用胰酶(0.25%)消化轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,加PBS,將細(xì)胞吹打形成單個(gè)細(xì)胞,離心800r,5分鐘 .棄上清。再用PBS重新清洗1次。 2.調(diào)整細(xì)胞密度為1X10*6/ml,上機(jī)檢測(cè)。... 我想用流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞的效率,轉(zhuǎn)染細(xì)胞會(huì)發(fā)綠色熒光, 問(wèn)題一、 步驟是不是這樣的: 1.收集細(xì)胞:用胰酶(0.25%)消化轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,加PBS,將細(xì)胞吹打形成單個(gè)細(xì)胞,離心800r,5分鐘 .棄上清。再用PBS重新清洗1次。 2.調(diào)整細(xì)胞密度為1X10*6/ml,上機(jī)檢測(cè)。以未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞作為陰性對(duì)照。 問(wèn)題二、 是否需要用預(yù)冷的1%多聚甲醛固定? 展開(kāi)
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