高速逆流色譜影響因素
高速逆流色譜,HSCCC為其簡稱。其為美國國立衛生院Ito博士在1982年所研制開發的一種新型的、連續高效的液液分配色譜技術。
高速逆流色譜影響因素
因為高速逆流色譜未不需要任何固態載體支撐的液-液色譜。對于高速逆流色譜的分離過程而言,至關重要的是其中作為固定相的液體在色譜柱中的保留程度。
shou先,對于固定相保留率,如兩相密度差、粘度、界面張力等所選擇的溶劑體系的影響十分大。對于固定相保留率而言,兩相的密度差具有zui大的影響。固定相保留率和密度差大體上呈線性關系。
其次,固定相保留率還會受到如高速逆流色譜的轉速、流速、以及柱溫等一些人為能夠操控的條件的影響。其中兩相的混合程度取決于螺旋管柱的轉速以及它產生的離心力場。所以對于界面張力較高的溶劑系統,較高的轉速應當被使用,可以劇烈的混合兩相,從而使分配得以促進以及使質點傳遞的阻力得以減少。對于界面張力較低的溶劑系統,較低的轉速應當被使用,來防止過分混合導致乳化作用和流失固定相。
固定相保留率在流動相流速方面與流速平方根之間存在著線性關系。流動相流速較快對于固定相的保留非常不利,并且出峰時間太快會造成峰與峰間具有較差的分離度,并且低流速盡管能夠使固相保留率的要求的提高得到滿足。然而分離時洗脫時間太長,并且峰形變寬,大量的流動相會被耗費,所以對于整個分離體系至關重要的是對于合適的流速的選擇。
對于固定相的保留而言,儀器的柱溫所起到的作用同樣不可忽視。對于親水性強的正丁醇溶劑體系的固定相保留率來說,其溫度具有較大的影響。與此同時升高溫度可以使溶劑的粘度得以改變,進而使兩相的分層時間受到影響。
在將溶劑體系選定了以后,有時需要對轉速, 流動相流速, 進樣體積三個儀器運行參數進行正交試驗, 來對zui佳分離條件進行確定。分離為一種比較復雜的動態高速分配過程,其分離效率除了關系溶劑系統,分離溫度、螺旋管轉速、流動相流速、梯度洗脫模式及進樣量、進樣方式等因素也會受到其影響。
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