高速逆流色譜影響因素
高速逆流色譜,英文名為High-speed Countercurrent Chromatography,HSCCC為其簡(jiǎn)稱。其為美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院Ito博士在1982年所研制開(kāi)發(fā)的一種新型的、連續(xù)高效的液液分配色譜技術(shù)。
高速逆流色譜影響因素
1.流速
兩相的分布會(huì)受到流動(dòng)相流速的影響。通常情況下,固定相流失隨著流動(dòng)相流速的增大而加重。然而流速過(guò)慢會(huì)造成過(guò)長(zhǎng)的分離時(shí)間,從而導(dǎo)致浪費(fèi)溶劑。
2.溫度
溶劑的黏度會(huì)受到溫度的提高的影響非常大,通常將溫度提高會(huì)使高的保留值獲得,反之,將溫度降低就會(huì)使低的保留值獲得,然而溫度提高不會(huì)太多,因?yàn)樗玫木鶠橛袡C(jī)溶劑,具有較低的沸點(diǎn)。
3.轉(zhuǎn)速
兩相溶劑在流體動(dòng)力學(xué)平衡時(shí)的體積比,也就是對(duì)固定相的保留值受到螺旋管的旋轉(zhuǎn)速度的影響相當(dāng)大,從而對(duì)分離效果產(chǎn)生了影響。當(dāng)然也不是轉(zhuǎn)速越快越好,一般對(duì)于分配不算好的溶劑體系,比如兩相體系帶有氯仿的,還要固定相分層比較慢的兩相體系,一般情況下越快的轉(zhuǎn)速,乳化現(xiàn)象越嚴(yán)重。
4.固定相的保留值
在逆流色譜中,對(duì)溶質(zhì)峰分離度產(chǎn)生關(guān)鍵影響的一個(gè)因素即為留在管中固定相的量。高保留量將會(huì)使得峰分離度得到大大地改進(jìn)。
(1)溶劑體系物理因素對(duì)保留值的影響
固定相的保留受到如溶劑的黏度等溶劑體系的物理因素的影響非常大,溶劑體系的黏度較低,能夠得到的固定相保留就會(huì)很高,溶劑在臨界點(diǎn)附近的分層時(shí)間受到界面張力和兩相間的密度差的影響也比較大,通常為了使合適的固定相保留值得到保障,溶劑體系的分層時(shí)間就需要低于半分鐘。
(2)儀器對(duì)保留值的影響
對(duì)兩相互不混溶溶劑在旋轉(zhuǎn)螺旋管內(nèi)保留產(chǎn)生影響的關(guān)鍵因素之一為螺旋管支持件的自轉(zhuǎn)半徑與公轉(zhuǎn)半徑之比值。使用小直徑的支持件減小值,可以使疏水性溶劑體系的單向性流體運(yùn)動(dòng)方向反向。相反,用大直徑的支持件進(jìn)一步提高值,可以造成親水性溶劑體系的單向性流體動(dòng)力學(xué)分布反向。而介于疏水性和親水性溶劑之間的中間極性溶劑,離心力條件會(huì)對(duì)其兩相分布狀況產(chǎn)生影響。
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