資料庫
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
-
本文由 上海滬震實業有限公司 整理匯編
2024-09-10 20:48 312閱讀次數
文檔僅可預覽首頁內容,請下載后查看全文信息!
-
立即下載
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
更多資料
-
裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-10 20:48
產品樣冊
-
大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-10 00:00
選購指南
-
小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒
- 小鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-30 12:53
操作手冊
-
裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒
- 裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-30 12:16
安裝說明
-
裸鼠環加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒
- 裸鼠環加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-18 18:06
實驗操作
-
裸鼠乙酰膽堿酯酶(AChE) ELISA試劑盒操作方法
- 裸鼠乙酰膽堿酯酶(AChE) ELISA試劑盒操作方法[詳細]
-
2015-06-10 00:00
產品樣冊
-
裸鼠乙酰膽堿酯酶(AChE) ELISA試劑盒操作方法
- 裸鼠乙酰膽堿酯酶(AChE) ELISA試劑盒操作方法[詳細]
-
2015-04-20 00:00
選購指南
-
裸鼠乙酰膽堿酯酶(AChE) ELISA試劑盒操作方法
- 裸鼠乙酰膽堿酯酶(AChE) ELISA試劑盒操作方法[詳細]
-
2015-03-23 00:00
操作手冊
-
裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒說明書
- 裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒說明書本試劑盒僅供研究使用。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)水平。用純化的裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加白細胞介素1β(IL-1β),再與HRP標記的白細胞介素1β(IL-1β)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素1β(IL-1β)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)濃度。裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(64ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。32ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液16ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液8ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液4ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液2.0ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照裸鼠白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
-
2019-01-02 10:00
產品樣冊
-
裸鼠花生四烯酸(AA)試劑盒使用方法
- 裸鼠花生四烯酸(AA)試劑盒使用方法本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T0.2pmol/L-8pmol/L使用目的:本試劑盒用于測定裸鼠血清、血漿及相關液體樣本中花生四烯酸(AA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中裸鼠花生四烯酸(AA)水平。用純化的裸鼠花生四烯酸(AA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入花生四烯酸(AA),再與HRP標記的花生四烯酸(AA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的花生四烯酸(AA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中裸鼠花生四烯酸(AA)濃度。[詳細]
-
2018-12-30 10:00
產品樣冊
-
裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒操作說明
- 裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒操作說明[詳細]
-
2024-09-18 18:10
應用文章
-
人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒
- 人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-06 00:00
實驗操作
-
小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒
- 小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-08 00:00
選購指南
-
兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒說明書
- 兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于檢測兔血清,血漿及相關液體樣本中兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)水平。實驗原理:本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫法(ELISA)測定標本中兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)。用純化的兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)相結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)的存在與否。試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存陰性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存陽性對照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟:編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。結果判定:試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00;陰性對照平均值≤0.10臨界值(CUTOFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15陰性判定:樣品OD值<臨界值(CUTOFF)者為兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)陰性陽性判定:樣品OD值≥臨界值(CUTOFF)者為兔蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)陽性注意事項1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。2.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物請避光保存。6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
-
2018-11-07 14:16
產品樣冊
-
現貨供應人蛋白酪氨酸磷酸酶ELISA 檢測試劑盒
- 人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:PTP試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知PTP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將PTP和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中PTP的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:40ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空轉移趨化生長因子β1對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗PTP抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1.標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:40ng/ml(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。20ng/ml(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液10ng/ml(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0ng/ml(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5ng/ml(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液1.25ng/ml(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0ng/ml(空轉移趨化生長因子β1對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空轉移趨化生長因子β1孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。人(Human)蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)ELISA檢測試劑盒建議使用的實驗方案標準品濃度(ng/ml)A4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F1.251.25樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的PTP標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的PTP含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-40ng/ml4、敏感度:0.1ng/ml人β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒humanβ-tubulin,TUBBELISA試劑盒人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA試劑盒人總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA試劑盒Humantotalprostatespecificantigen,tPSAELISA試劑盒人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒Humananti-immunodeficiencyvirusantibody,HIVELISA試劑盒人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒HumanUreaplasmaurealyticumantibody,UU-AbELISA試劑盒人復合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒Humancomplexedprostatespecificantigen,cPSAELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirusⅡantibody,HSVⅡ-AbELISA試劑盒人雌激素誘導蛋白PS2ELISA試劑盒HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人細菌性陰道病(BV)ELISA試劑盒Humanbacterialvaginosis,BVELISA試劑盒人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠAb)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirusⅠantibody,HSVⅠAbELISA試劑盒人雌激素誘導蛋白PS2ELISA試劑盒HumanEstrogen-inducedproteinpS2ELISA試劑盒人乳頭狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISA試劑盒人乳頭狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISA試劑盒人單純皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)ELISA試劑盒HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISA試劑盒人游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒HumanFreeProstateSpecificAntigen,fPSAELISA試劑盒人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒Humanprostatespecificantigen,PSAELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-28 07:02
產品樣冊
-
大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒
- 大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒[詳細]
-
2024-09-28 00:47
選購指南
-
裸鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
- 檢測范圍:96T1.5ng/L-40ng/L使用目的:本試劑盒用于測定裸鼠血清、血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中裸鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平。用純化的裸鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α(TNF-α),再與HRP標記的腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子α(TNF-α)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中裸鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(80ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。40ng/L5號標準品150l的原倍標準品加入150l標準品稀釋液20ng/L4號標準品150l的5號標準品加入150l標準品稀釋液10ng/L3號標準品150l的4號標準品加入150l標準品稀釋液5.0ng/L2號標準品150l的3號標準品加入150l標準品稀釋液2.5ng/L1號標準品150l的2號標準品加入150l標準品稀釋液2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
-
2018-10-03 10:00
產品樣冊
-
蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒說明書
- 蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。蛋白酪氨酸磷酸酶受體R(PTPRR)ELISA試劑盒結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlBcl-2小鼠B細胞淋巴瘤因子2規格:48T/96TBid小鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白規格:48T/96TAP12小鼠apelin12規格:48T/96T8-iso-PG小鼠8異前列腺素規格:48T/96T8-OHdG小鼠8羥基脫氧鳥苷規格:48T/96T6-keto-PGF1a小鼠6酮前列腺素F1a規格:48T/96T6-K-PG小鼠6酮前列腺素規格:48T/96T5-HT小鼠5羥色胺規格:48T/96T5-NT小鼠5核苷酸酶規格:48T/96TColⅣ小鼠Ⅳ型膠原規格:48T/96TPⅢNP小鼠Ⅲ型前膠原肽規格:48T/96TPⅢNT小鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽規格:48T/96TColⅢ小鼠Ⅲ型膠原規格:48T/96TColⅡ小鼠Ⅱ型膠原規格:48T/96TOH小鼠25羥基維生素D3規格:48T/96TPⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽規格:48T/96TCⅠCP小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽規格:48T/96X小鼠Ⅰ型膠原N末端肽規格:48T/96TColⅠ小鼠Ⅰ型膠原規格:48T/96T[詳細]
-
2018-10-09 10:00
產品樣冊
-
裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
- 裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T3μg/ml-80μg/ml使用目的:本試劑盒用于測定裸鼠血清、血漿及相關液體樣本中免疫球蛋白E(IgE)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中裸鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中裸鼠免疫球蛋白E(IgE)濃度。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫分析試劑盒組成標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。操作程序總結:計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。裸鼠免疫球蛋白E(IgE)酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
-
2018-09-14 10:00
產品樣冊
-
人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒
- 人胃蛋白酶(PP)ELISA試劑盒[詳細]
-
2013-12-06 00:00
產品樣冊
Copyright 2004-2025 yiqi.com All Rights Reserved , 未經書面授權 , 頁面內容不得以任何形式進行復制
主站蜘蛛池模板:
cao人人_国产69精品久久久久孕妇黑_成人免费观看www的片_www.youjizz.com日本_亚洲AV成人一区二区三区天堂_办公室撕开奶罩揉吮奶头H文_欧美综合一区二区_欧美黄在线观看
|
亚洲热在线免费观看一二三区_av在线片_亚洲一区二区精品_a级片日本_久久中文字幕av_免费网站看V片在线18禁无码_久久九九有精品国产_欧美视频完全免费看
|
香蕉97超级碰碰碰视频_一级片精品_国产精品免费自拍_一级欧美一级日韩_亚洲黄色免费av_粗大的内捧猛烈进出在线视频_国产91在线播放_亚洲综合精品一区
|
超碰二区_精品剧情V国产在线观看_色屁屁WWW免费看欧美激情_国产美女裸体丝袜喷水视频_免费又黄又爽又猛大片午夜_在线黄色av网站_国产91白丝在线播放_高潮喷水的网站
|
日韩激情综合网_久久精品一日日躁夜夜躁_女十八毛片aaaaaaa片_成人无码黄动漫在线播放_国产午夜福利内射青草_xxxxxx亚洲_不卡视频一区二区三区_亚洲精品v欧洲精品v日韩精品
|
nc5wz在线播放_国产成人精品午夜2022_高清欧美性猛交xxxx_欧美重口另类在线播放二区_日本啊v在线_97婷婷狠狠成为人免费视频_亚洲天堂中文_国产特级精品毛片视频
|
久久精品国内_亚洲欧美国产国产综合一区_亚洲精品mv在线观看_亚洲高清自拍_国产激情二区_亚洲VA在线VA天堂VA欧美VA_色久综合一二码_日韩aaaaaaa
|
国产精品成人VA在线播放_国产aⅴ精品一区二区三理论片_黄色片哪里可以看_国产农村女人一级毛片了_饕餮记在线观看_别揉我奶头~嗯~啊~视频在线观看_伊人色爱_国产91aaa
|
黄色成年网站_亚洲午夜无码AV毛片久久_sss海量视频在线观看_日韩精品卡1卡二卡3卡四卡_se亚洲_日本添下边无码视频全过程_性爱在线免费视频_亚洲熟妇无码AV不卡在线
|
久久91成人_好爽快点深一点好大_国产aⅴ精品_亚洲91av_狠狠躁夜夜躁人人爽超碰97香蕉_ww国产内射精品后入国产_www一起操_国产精品第二页
|
精品自拍视频_性videos欧美熟妇hdx_国产精品美女久久久浪潮软件_欧美情侣性视频_午夜播放器在线观看_黄色一级片免费_欧美色精品vr_91久久久精品国产一区二区蜜臀
|
久久久精品人妻一区二区三区蜜桃_久久久久精彩视频_大地资源网视频在线观看新浪_久久精品婷婷_www.九色.com_一区二区三_成人AV片无码免费网站_国产精品亚洲人成在99www
|
中文字幕亚洲综合久久菠萝蜜_人操人人爽_国产美女极度色诱视频WWW_国产jizz18高清视频_91精品专区_av在线播放资源_www.97.超碰.zyz.com_黄色录像一级大片
|
男人天堂亚洲_av片免费_脱了内裤猛烈进入A片费_中文字幕亚洲视频_男操女视频免费_欧美日韩一区二区三区自拍_精品无码一区二区三区在线_黄色毛片免费观看
|
果冻传媒2021精品一区_国产精品免费久久久久软件_亚洲国产精品毛片AV不卡在线_欧美二区精品_色吧久久_久久99青青精品免费观看_三人一起玩弄娇妻高潮_国产精品va视频
|
色综合首页_亚洲综合一区无码精品_黄色A级国产免费大片_在线观看a视频_色视频综合_精品国产不卡一区二区_日韩免费成人_亚洲欧洲无码一区二区三区
|
神马久久免费_日韩亚洲在线观看_亚洲欧美韩国_蘑菇视频黄色_天天干夜夜艹_911色_911色sss主站色播_免费观看做爰视频ⅹxx午夜_国产精品久国产精品
|
在线播放成人_亚洲国产一区二区三区亚瑟_欧美日产国产新一区_欧美亚洲婷婷_久一精品视频_亚洲成a∧人片在线播放无码_亚洲∧V久久久无码精品_黄色录像一级片子
|
国产欧美一区二区久久性色99_精品国产1区二区_特黄A又粗又大又黄又爽A片软件_国产精品亲子乱子伦xxxx裸_a国产一区二区免费入口_黑人巨茎大战欧美白妇免费_999在线观看视频_亚洲成人一区在线
|
国产精自产拍久久久久久蜜_黑人狂躁日本妞hd_理论片一级片_欧美一性一交一A片费看_99在线免费播放_97香蕉久久国产超碰青草软件_国产精品三级在线_久久看精品
|
日日色av_欧美成年_voyeur精品偷窥_丝袜美腿一区二区三区_兔子先生高清在线观看_精品国产伦一区二区三区_无码精品AV久久久免费_精品久久人妻AV中文字幕
|
久久99影院_香港a毛片免费全部播放_影音先锋女人AV鲁色资源网久久_欧美综合一区_日本簧片在线观看_免费网站www在线观看_www.天天干.com_午夜福利片国产精品
|
国产欧美在线视频_激情丁香_亚洲丝袜视频_欧美性猛交xxxx乱大交喷浆_久草在线视频在线_久久综合给合综合久久_久草一区二区_直接观看黄网站免费视频
|
曰曰摸天天添天天湿_欧美日韩国产限制_av中文字幕一区_国产传媒av在线_亚洲一区二区三区四区av_国产精品露脸国语对白_久久无码中文字幕东京热_欧美野战
|
操操操爱爱爱_久色88_国产99视频精品免费观看6_av中文字幕二区_国产尤物av尤物在线观看_特级太黄A片免费播放一_精品护士一区二区三区_久久爱99
|
国产露脸ⅹxxxⅹ高清hd_成人爽视频_a级毛片免费观看在线_亚洲AV无码午夜国产精品色软件_99久久精_亚洲一区二区三区免费看_大白肥妇BBVBBW高潮_亚洲国产精品久久久久久久
|
一级毛片区_911久久香蕉国产线看观看_午夜影院在线观看_人人爱97_国产精品av一区二区三区_亚洲欧洲无码在线观看_日本高清视频免费观看_亚洲性精品
|
亚洲AV成人午夜福利在线观看_成人国产在线视频_久久在现_黄色一级毛片儿_色中色登陆器_99久久无色码中文字幕人妻蜜柚_91日韩精品一区二区三区_久久精品欧美视频
|
亚洲国产一区精品_成人福利网址_久久艹在线观看_激情宗合网_xxxx69国产_天天综合色_亚洲人成激情在线播放国_久久婷婷人人澡人人爽人人喊
|
jizzyou日本_国产色精品VR一区二区_亚洲av图片_久久久WWW成人免费毛片_成人午夜精品无码区久久_狠狠操她_国产一级片中文字幕_JAPANESEHD无码中文字幕
|
国模沟沟一区二区三区_成人综合一区_欧美日韩不卡合集视频_国产日产欧产美韩毛毛片_97久久久久_国产欧美久久高清_aⅴ久久欧美丝袜综合_男女人xx视频
|
国产在线观看黄色_久久99精品久久久久久久久久_成a人v在线观看视频_AV无码专区亚洲AVL在线观看_激情视频中文字幕_狠狠丁香_肉嘟嘟WWW视频在线观看高清_亚洲综合色久
|
国产成人影院一区二区三区_日本1区_伊人色播_久久久精品视频免费看_亚洲第一综合_久久久噜噜噜久久熟女_手机看片被窝午夜婷婷国产_超碰在线免费97
|
看片免费黄在线观看入口_成年男人的天堂_国产熟妇的荡欲午夜视频_www.av小次郎_五月色丁香综缴合_年轻母亲4在线_懂色av色吟av夜夜嗨_国产伦理久久精品久久久久
|
在线综合色_不付费看污软件片_日韩国产成人无码AV毛片_国产xxxxx视频_国产无吗一区二区三区在线欢_亚洲国产欧美中文手机在线_日本乳首の奶水在线观看视频_最近中文字幕mv免费视频
|
国产精品成人av_777亚洲熟妇自拍无码区_精品成人一区二区_成年片黄色日本大片网站视频_国产精品一区二区在线_亚洲青涩网_国产无遮挡裸露视频免费_中国毛片一级片
|
一区二区三区无码视频免费福利_中文字幕不卡在线播放_2015成人永久免费视频_国产欧美一区二区精品婷婷_日韩第一页在线_国产高清第一页_欧美人与动牲交欧美精品_特级bbbbbbbbb视频
|
国产欧洲精品色在线_2018天天干夜夜操_亚洲色无色A片一区二区_女性裸体无遮挡无遮掩视频蜜芽_最近免费中文字幕在线mv视频8_欧美国产日本高清不卡_日本一卡二卡3卡四卡网站精品_99久e精品热线免费
|
天天做爰天天爽_一二三区高清_久久精品国产一区二区三区不卡_免费无人区男男码卡二卡_年轻富婆私密推油到高潮_视频一区二区不卡_国产欧美呀洲一区二区_在线观看av永久免费
|
国产亚洲成人网_国产三级在线观看_人成在线免费网站_亚洲国产成av人天堂无码_97在线视频免费看_久久久69_亚洲激情成人网_国色天香乱码区
|
亚洲av一级毛片_成人黄网在线观看_久久久中日AB精品综合_日本国产欧美大码a视频_精品一区影院_成人国产精品免费网站_说英雄谁是英雄免费观看_亚洲欧美国产成人综合不卡
|
參與評論
登錄后參與評論