“醉駕”、“酒駕”是當前道路交通事故的主要肇事原因之一。血液中酒精含量與駕駛人反應時間和判斷力密切相關，也是公安司法機關認定犯罪嫌疑人是否酒駕的依據。快速準確分析出司機血液酒精的含量，是極為重要的任務。

本方案參考國家標準GB/T 42430-2023《乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、異丙醇和正丁醇檢驗》，采用頂空-內標氣相色譜法檢驗生物樣本血液、尿液中乙醇甲醇、正丙醇丙,異丙醇和正丁醇的含量，其他體液和非生物樣品可參照使用。

1、方法原理

本方法根據乙醇等6種化合物易揮發的特性，以叔丁醇為內標，用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器進行檢測；依據兩種不同性質色譜柱的保留時間進行定性，以保留時間或相對保留時間定性，用內標法以目標組分對內標物的峰面積比進行定量分析。

2、主要儀器配置

a. GC128氣相色譜儀，配雙毛細柱進樣口，雙FID檢測器；

b. 全自動頂空進樣器

c. 毛細管色譜柱

色譜柱 1：KB-BAC1，30m×0.32mm×1.8μm

色譜柱 2：KB-BAC2，30m×0.32mm×1.2μm

d. 萬分之一分析天平

e. 乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、異丙醇、正丁醇、叔丁醇，色譜純

f. 乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、異丙醇和正丁醇混合標準儲備液：分別精密稱取標準物質乙醇（甲醇、正丙醇、丙酮、異丙醇、正丁醇）約0.25g于25mL容量瓶中，用水定容至刻度，配制成混合標準物質儲備溶液，0~4℃保存有效期3個月。

實驗中所用其他濃度的標準工作液均由混合標準儲備溶液用水逐級稀釋得到。

g. 叔丁醇內標標準儲備溶液：精密稱取叔丁醇標準品0.1g于25mL容量瓶中，用水定容至刻度，配成叔丁醇標準儲備溶液，密封，冷藏保存，使用期3個月，叔丁醇標準儲備液質量濃度為4mg/mL。

h. 叔丁醇標準工作液：精密吸取叔丁醇標準儲備液1mL于100mL容量配置紅，用水定容至刻度，0~4℃保存有效期3個月，叔丁醇標準工作液質量濃度為0.04mg/mL。

3、實驗方法

3.1實驗條件

3.1.1氣相色譜參考條件

進樣口溫度：150℃；

柱流量：4ml/min；

進樣模式：分流進樣；分流比：15:1；

柱箱：40℃恒溫

檢測器條件：溫度250℃；

3.1.2頂空參考條件

溫度：爐溫65℃，定量管溫度105℃，傳輸線溫度105℃；

頂空瓶加壓壓力70kpa；

反吹流量：100mL/min；

時間：樣品平衡時間10min，加壓時間0.2min，取樣時間0.2min，定量環平衡時間0.1min，進樣時間0.2min。

3.2樣品處理方法

取檢材樣品血液或尿液100 μL及叔丁工作溶液500μL，置于頂空進樣瓶內，蓋上硅橡膠墊，密封鉗加封，混勻。置于頂空自動器，65℃恒溫加熱10min后進樣。

3.3標準曲線繪制

配置系列濃度的乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、異丙醇和正丁醇標準工作溶液。各組分質量濃度見下表1。

取系列濃度的各標準工作溶液100 μL及叔丁醇內標工作溶液500μL，分別加入樣品瓶內，頂空分析。以目標化合物和內標物叔丁醇的峰面積比為縱坐標，目標化合物質量濃度（mg/mL）為橫坐標進行線性回歸。

4、實驗結果

4.1 標準氣相色譜圖（標準系列工作液STD4）

4.2 目標化合物系列濃度標準曲線

各目標化合物標準曲線如下所示，各組分標準曲線方程及相關系數見表2、3。

4.3重復性測試

用系列標準濃度中的STD1、STD3及STD6三個濃度點（目標化合物詳細質量濃度見表5）進行重復性實驗，各濃度分別配置6個平行樣，計算平行測試結果的RSD值。

4.4回收率測定

根據要求，使用質量濃度接近 0.1 mg/mL的待測目標物標準溶液作為添加樣品，進行回收率測試，結果如下表6.7所示：

5、結論

采用上海儀器有限公司GC128氣相色譜儀，配合全自動頂空自動進樣器分析生物樣品血液中醇類物質，方法操作簡單，在 0.1~3 mg/mL濃度范圍內，目標化合物標準曲線線性良好，相關系數均大于 0.9995，分析時間小于8min。該方法儀器安裝配置簡單、操作方便、重現性好、回收率高，適合血液中醇類含量的快速準確檢測。