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980下轉換熒光光譜儀應用之生物醫療檢測

來源:上海如海光電科技有限公司      分類:應用方案 2025-05-16 18:30:15 18閱讀次數
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在納米科技日新月異的今天,980 下轉換熒光技術憑借其獨特的優勢,成為科研領域的焦點,尤其在生物醫學領域,展現出巨大的應用潛力。在生物醫學光學領域,近紅外二區(NIR-II, 1000-2100nm)熒光檢測技術正憑借其卓越的組織穿透能力和低背景干擾特性,成為精準診斷與治療的核心發展方向,為相關領域研究提供技術支持。

01

測量原理


980 下轉換熒光是一種先進的激光誘導熒光光譜技術。其基本原理是利用 980nm 波長的激光作為激發光源,當樣品受到這種特定波長的激光照射時,樣品中的特定分子或納米顆粒會吸收光子能量,其內部電子會躍遷到高能態。然而,這種高能態并不穩定,電子會迅速通過非輻射躍遷回到低能態,同時釋放出熒光光子,這些光子的波長主要集中在 1500-2100nm 的近紅外區域。

圖 1 熒光的基本原理示意圖

下轉換熒光(Downconversion Fluorescence)是一種光致發光現象,其核心在于材料吸收高能光子后,通過多級能量傳遞或量子剪裁(Quantum Cutting)釋放低能光子。當 980 nm 近紅外光(NIR-I)激發特定材料時,其內部電子經歷以下過程:

能量吸收:材料吸收 980 nm 光子,電子從基態(S? )躍遷至高能激發態(如 S? 或 T? )。

無輻射弛豫:激發態電子通過晶格振動或分子內能量轉移,以非輻射形式衰減至中間能級(如 S? 或 T? )。

熒光發射:電子從中間能級返回基態,釋放波長更長的光子(如1500-2100 nm,即近紅外二區 NIR-II)。

02

技術優勢

熒光光譜儀作為一種精密的分析儀器,在 980 下轉換熒光技術中發揮著關鍵作用。它具備多種顯著的優勢,使其在眾多分析技術中脫穎而出:

(1)高靈敏度探測能力:熒光光譜儀配備了高靈敏度的探測器,能夠檢測到極其微弱的熒光信號。這使得它能夠在低濃度下精準地檢測到樣品中的目標物質。

(2)高分辨率光譜分析:熒光光譜儀可實現高光譜分辨率,能夠清晰地區分樣品不同波長下的熒光發射峰。研究人員可以利用它深入探究樣品的光學特性,精確分析不同物質的能級躍遷過程。在材料科學領域,通過高分辨率的熒光光譜,研究人員可以深入研究不同材料的電子結構和光學行為,從而推動新型材料的研發。

(3)良好的生物相容性與組織穿透能力:近紅外波段的熒光信號在生物組織中具有較低的吸收和散射特性。這使得熒光光譜儀能夠實現較深的組織穿透深度,同時減少對生物樣品的光損傷。

(4)動態分析能力:熒光光譜儀具備出色的動態分析能力,能夠實時監測樣品在不同時間點的熒光變化。這使得研究人員可以捕捉到生物分子或納米顆粒在動態過程中的行為變化。這種動態分析能力為研究生物體系的動態行為提供了強大的工具。

(5)高精度激發光源與穩定控制:熒光光譜儀配備了高精度的激發光源,能夠提供穩定且精確的光激發。激發光源的波長和功率可以精確調節,確保樣品在最佳條件下被激發。這種高精度的激發光源與穩定控制能力不僅提高了熒光信號的穩定性和可重復性,還使得實驗結果更加可靠。

(6)智能化數據采集與分析:現代熒光光譜儀集成了先進的數據采集和分析系統,能夠實現智能化的數據處理。通過軟件,儀器可以實時采集熒光光譜數據,并進行快速分析和處理。內置的分析工具可以進行光譜處理、峰值檢測和定量分析等操作,大大提高了實驗效率。

03

應用領域


深層組織分子影像學

腫瘤靶向成像:通過抗體/核酸適配體修飾下轉換材料(如 Tm3?摻雜納米顆粒、cyanine 類染料),實現腫瘤標志物(如 HER2、PSMA)的 NIR-II 熒光示蹤。臨床前研究顯示,該技術可檢測直徑 0.5mm 的早期腫瘤結節(CT 分辨率約 5mm),并在術中實時勾畫腫瘤邊界(定位精度±0.2mm),降低殘余病灶風險;

神經活動監測:利用 Ca2?敏感型下轉換探針(如 YC-NIR2),在 980nm 激發下監測神經元鈣信號變化,穿透 5mm 厚小鼠腦皮層,實現海馬區神經元集群放電的無創成像,為癲癇病灶定位及阿爾茨海默病早期突觸丟失評估提供新手段。


藥物遞送系統優化與動力學研究

載藥系統釋放監測:將化療藥物(如 DOX)或基因載體包裹于下轉換材料中,通過 pH / 酶響應型外殼實現靶向釋放。熒光光譜儀實時追蹤樣品熒光強度變化,指導載體材料優化(如 PEG 鏈長、殼層厚度)。

體內分布定量分析:通過器官熒光光譜強度,量化探針在腫瘤、肝臟、腎臟等組織的富集效率,優化靶向配體(如 RGD 多肽)偶聯密度,降低非特異性攝取。


再生醫學與干細胞追蹤

干細胞移植示蹤:利用下轉換熒光標記間充質干細胞(MSCs),在 NIR-II 區監測其體內遷移路徑。實驗顯示,標記細胞在心肌梗死模型中的歸巢效率可通過 1650nm 處熒光強度動態評估,較傳統生物發光法(穿透深度<0.5cm)提升檢測深度;

組織工程支架評估:通過檢測支架材料(如膠原/羥基磷灰石復合支架)負載的下轉換微球熒光分布,量化細胞黏附與增殖情況,為骨組織修復材料的生物相容性評價提供可視化依據。

04

解決方案

01

測量系統組成

激光器:激光器是關鍵組成部分,具有方向性好、單色性佳、參數可精確控制、相干性強、強度大等特性。這些特性使得激光誘導熒光檢測器的信噪比大大增強,能夠提供高強度的激發光,以確保足夠的分子被激發產生熒光信號,同時其良好的單色性有助于減少雜散光干擾,提高檢測的選擇性和靈敏度。

光譜儀:光譜儀是整個系統的核心部分,用于接收熒光信號并進行光電信號化。

熒光探頭:用于傳輸激光信號只樣品,用于激發樣品熒光信號,再收集樣品發出的熒光信號,并傳輸至光譜儀。

定制采樣附件:用于固定光纖探頭,滿足不同樣品的測量需求。

02

系統搭建示意

使用激光誘導熒光光譜儀測試樣品的熒光光譜,需要將熒光探頭的尾端光纖分別與拉曼光譜儀主機的光譜儀接口和激光器接口相連,在再將探頭放入可調節支架上,根據所測光譜數據調節探頭與樣品間的距離,選擇最佳距離固定后測試樣品的熒光光譜,詳細搭建示意圖如下。

圖 2 熒光測量搭建示意圖

表 1 推薦配置


05

應用案例:

稀土納米顆粒測試


5.1 研究背景

隨著稀土納米材料在生物醫學領域應用的不斷拓展,對稀土納米顆粒的熒光特性進行深入研究具有重要意義。了解稀土納米顆粒的熒光特性對于優化其在生物醫學成像和治療中的應用至關重要。通過調整稀土離子的摻雜含量,可以實現對熒光信號強度的調控,從而提高成像質量和治療效果。使用由提供的 PL980 下轉換熒光光譜儀,探究摻雜不同含量 Tm 的稀土納米顆粒在 1500-2000nm 范圍內的熒光特性。


5.2 實驗樣品及測試場景

圖 3 實驗樣品

圖 4 測試場景圖


5.3 測試方法

采用上海科技有限公司生產的 PL980下轉換熒光光譜儀進行測試。該光譜儀具有 1000-2100nm 的熒光光譜范圍,激發波長為 976±0.5 nm,線寬≤0.08nm,輸出功率 0-500mW 可調。測試過程中,980nm 的激光激發稀土納米顆粒,使其產生熒光發射,通過光譜儀收集和分析熒光光譜數據。


5.4 實驗數據

在實驗中,設置了 500mW 的激發功率、500ms 的積分時間和 20次硬件平均。通過調整焦距,采集了樣品的熒光信號。測試數據顯示,摻雜不同含量Tm的稀土納米顆粒樣品在 1500-2000nm 范圍內均能檢測到發射峰,且隨著 Tm 含量的降低,發射峰強度逐漸降低。

圖 5 摻雜不同含量 Tm 的稀土納米顆粒

熒光光譜圖


5.5 實驗結論

實驗結果表明,摻雜不同含量 Tm 的稀土納米顆粒樣品在1500-2000nm 范圍內均可檢測到發射峰。這為稀土納米顆粒在生物醫學領域的應用提供了重要的實驗依據。通過精確控制稀土離子的摻雜含量,可以實現對熒光信號的調控,從而滿足不同應用場景的需求。

06

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