血清分離方法和離心機的操作步驟
我們把醫院或者血站用來分離血液的離心機稱之為血液離心機, 血液分離是醫學和生物工程實驗中經常要做的事情,而血液分離方法很多,所用到的設備和操作過程有所差異。較為常見的是血庫通過血庫離心機進行血液分離。
大部分化驗項目檢查的并不是全血,而是血漿或血清。血漿是指去掉血細胞的血液,而血清則是去掉纖維蛋白原的血漿。
血液凝固的本質是血漿內的可溶性纖維蛋白原轉變為不溶解的纖維蛋白,纖維蛋白呈細絲狀,互相交織成網、網羅大量血細胞,形成凝膠狀的血塊。血凝后30分鐘~1小時,血凝塊中的血小板收縮蛋白收縮,使血塊回縮變硬,擠出清澈的液體,稱為血清。血清與血漿的區別,在于血清缺乏纖維蛋白原和參與血凝的凝血因子,但又增添了凝血過程中由血小板釋放的少量物質。
血漿或血清這兩種成分無法直接從血液中分離,需要通過血液離心機進行離心分離獲得。對血清中抗原和抗體的檢查,是診斷乙肝、瘧疾、艾滋病等感染的關鍵步驟。離心類似洗衣機的甩干功能,血液各成分比重不同,因而會被離心力分層,得到分離開的血漿或血清。
檢驗科離心機
血液的成分:血液由有形成分和血漿所組成。其中有形成分(血細胞)占血液的45%,共有三類。血液離心機分離血液后得到以下成分:
1.紅細胞:是血液有形成分中數量Z多的一種,其體積小,圓而扁平,邊緣厚,中間凹入,無核,其主要成分是血紅蛋白。
2.白細胞:白細胞是無色、有核的圓形細胞,比紅細胞略大。白細胞種類多,如有顆粒細胞、淋巴細胞等,它們在血液中各占有一定比例,當患病時,會發生變化,可作為診斷疾病的參考數據。
3.血小板:血小板是很小的無核小體,其主要功能是促進血液凝固。
血液中除有形成分外,其他部分即為血漿。血漿是血液中的液體成分。血漿中含許多重要物質,有蛋白質、無機鹽(鉀、鈉、鈣等)、抗體、激素等。其中水分占91%---92%。
如何分離血清樣本:
要根據分離目標體和分離精度要求結合你的分離設備來確定的,一般分離血清常見的就是小型的醫用離心機(檢驗科離心機)分離血清樣本。
分離方法:
一般情況下,室溫(37度)靜置半小時以上,打開離心機,3500-4000rpm離心5-10分鐘。分離得到血清。如果測酶等易降解的指標,按需要放4度靜置半小時以上,離心。(放置37度一段時間的目的是讓血液凝固,析出血清,因為血液凝固后,纖維蛋白收縮,血清就能析出。)
血液離心機
血液離心機操作步驟:
1、使用各種離心機時,必須事先在天平上精密地平衡離心管和其內容物,平衡時重量之差不得超過各個離心機說明書上所規定的范圍,每個離心機不同的轉頭有各自的允許差值,轉頭中不能裝載單數的管子,當轉頭只是部分裝載時,管子必須互相對稱地放在轉頭中,以便使負載均勻地分布在轉頭的周圍。
2、若要在低于室溫的溫度下離心時,轉頭在使用前應放置在冰箱或置于離心機的轉頭室內預冷。
3、離心過程中不得隨意離開,應隨時觀察離心機上的儀表是否正常工作,如有異常的聲音應立即停機檢查,及時排除故障。
4、每個轉頭各有其Z高允許轉速和使用累積限時,使用轉頭時要查閱說明書,不得過速使用。每一轉頭都要有一份使用檔案,記錄累積的使用時間,若超過了該轉頭的Z高使用時限,則須更換轉頭。
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