- 2025-01-21 09:29:54蛋白質二硫鍵
- 蛋白質二硫鍵是指連接兩個半胱氨酸殘基的共價鍵，由兩個硫原子通過氧化反應形成。它是蛋白質中的一種重要化學鍵，參與蛋白質的折疊和穩定結構的形成。在蛋白質合成和加工過程中，二硫鍵的形成有助于維持蛋白質的三維構象，從而影響其生物活性和功能。蛋白質二硫鍵的存在對于許多生物過程，如酶催化、信號傳導等，都具有關鍵作用。
資源：2428個 瀏覽：37次展開
蛋白質二硫鍵相關內容
蛋白質二硫鍵文章
蛋白質二硫鍵產品
產品名稱
所在地
價格
供應商
咨詢
- 蛋白質二硫鍵異構酶抗體|PDIA2 Rabbit pAb|Bioss/博奧森|100ul
- 國內 北京
- 面議
-
上海來鉑生物集團有限公司
售全國
- 我要詢價 聯系方式
- 蛋白質二硫鍵異構酶封閉多肽|Bioss/博奧森|500ug
- 國內 北京
- 面議
-
上海來鉑生物集團有限公司
售全國
- 我要詢價 聯系方式
蛋白質二硫鍵問答
- 2025-04-14 18:30:13反相液相色譜蛋白質原理是什么？
- 反相液相色譜（Reverse Phase Liquid Chromatography, RPLC）是一種基于疏水相互作用的高效分離技術，廣泛應用于蛋白質及多肽的分離、純化與分析。其核心原理在于固定相與流動相的極性差異，以及樣品分子與固定相之間的疏水分配效應。以下將從分離機制、蛋白質特異性行為、固定相與流動相選擇、應用場景等角度展開說明。 反相色譜的固定相通常由疏水性材料（如C18、C8或C4鍵合硅膠）構成，而流動相為極性溶劑（如水、甲醇或乙腈）。分離過程中，蛋白質的疏水區域與固定相發生非共價結合，極性較強的分子優先被流動相洗脫，疏水性更強的分子則因保留時間延長而實現分離。梯度洗脫是優化分離效果的關鍵手段，通過逐步增加有機溶劑比例削弱疏水作用，從而按疏水性差異依次洗脫目標分子。 蛋白質在反相色譜中的行為具有特殊性。由于流動相中常添加三氟乙酸（TFA）等離子對試劑，蛋白質可能發生部分去折疊，暴露出內部疏水殘基，增強與固定相的相互作用。此外，低濃度TFA可誘導蛋白質形成伸展構象，導致其在死時間前洗脫；而高濃度TFA通過形成離子對使蛋白質構象緊湊（如“熔融球體”），延長保留時間。這種構象敏感性使反相色譜不僅能分離蛋白質，還可用于研究其構象穩定性與表面疏水性。 固定相的選擇需綜合考慮蛋白質大小與疏水性。C18和C8適用于小分子肽段，而C4因較短的烷基鏈更適合大分子蛋白質，避免過度保留。流動相中，乙腈因低黏度和高洗脫能力成為首選有機溶劑，TFA則通過抑制硅醇基電離減少峰拖尾。梯度優化需平衡分辨率與時間成本，例如降低最大有機溶劑濃度可改善峰分離，但可能延長分析周期。 在應用層面，反相色譜憑借高分辨率與質譜兼容性，成為蛋白質組學研究的重要工具。其典型場景包括：多肽藥物的純度分析、酶解產物的肽圖繪制、翻譯后修飾（如磷酸化、糖基化）的檢測，以及蛋白質構象變化的動態監測。例如，與質譜聯用時，反相色譜可分離復雜肽段混合物，通過質譜鑒定實現蛋白質序列的高通量解析。此外，其在治療性抗體表征中的應用也日益增多，尤其在檢測聚集體與降解產物方面表現卓越。 操作參數的設置直接影響分離效能。流速需根據色譜柱內徑與填料粒徑調整，通常內徑4.6mm的C18柱推薦流速為1mL/min。壓力上限需控制在柱耐受范圍內（通?！?000psi），以避免固定相塌陷。檢測方法方面，紫外檢測（280nm）依賴蛋白質中芳香族氨基酸的吸收，而質譜聯用可提供分子量及結構信息，靈敏度更高。 總之，反相液相色譜通過疏水相互作用與動態梯度洗脫，實現了蛋白質的高效分離與分析。其獨特的構象敏感性、靈活的固定相選擇及與質譜的兼容性，使其在生物醫藥與基礎研究中不可或缺。未來，隨著新型固定相（如表面多孔顆粒）與微流控技術的發展，反相色譜在蛋白質分析中的分辨率與通量將進一步提升。
66人看過
- 2025-01-15 12:15:14蛋白質純化系統連接方法有哪些？
- 蛋白質純化是生物科學研究和藥物開發中的關鍵步驟，而蛋白質純化系統的連接方法對于保證純化過程的效率與穩定性至關重要。本文將詳細探討蛋白質純化系統的連接方法，包括不同設備的選擇、連接方式以及優化方案，幫助研究人員在實驗過程中提高工作效率，確保實驗結果的可靠性和 reproducibility。通過深入了解每種連接方法的特點與適用場景，您將能夠根據具體的實驗需求，選擇合適的方案，大限度地提高蛋白質純化的質量和產量。 1. 蛋白質純化系統的構成與連接需求 蛋白質純化過程通常需要多個系統和設備的配合，包括但不限于色譜柱、流動相系統、樣品注射系統和檢測儀器。為了確保每一環節的高效運行，各個系統的連接方式必須得到精確設計。合理的連接方法不僅能提高系統的穩定性，還能降低操作中的誤差，提高純化效率。 通常，蛋白質純化系統的連接方法涉及流體通路的設計，包括管道、泵、閥門和分配器的連接。每個系統之間的連接方式應確保流體流動的順暢性和穩定性，并能夠應對不同壓力和流量要求。需要特別注意的是，連接點的密封性、管道的內徑與材質、以及操作過程中的溫度控制，這些都會直接影響純化過程的質量。 2. 常見的蛋白質純化系統連接方式 (1) 軟管與接頭連接 軟管與接頭的連接是常見的一種連接方式，尤其適用于低壓力系統。軟管的柔性設計使得它能夠在有限的空間內靈活布置，并能適應不同規格的連接接頭。對于流動相較為復雜或者需要快速更換系統的實驗，這種連接方式具有很大的便利性。 使用軟管時，接頭的密封性和材質的選擇至關重要。通常，建議選用不含金屬雜質的高質量材料，避免在蛋白質純化過程中引入不必要的污染物。根據實際需求，可以選擇硅膠、聚氨酯或氟塑料等不同材質的軟管。 (2) 硬管與快速連接系統 對于高壓、需要精確控制流量的實驗，硬管與快速連接系統的組合則顯得更加重要。這種連接方式通常應用于需要較高流量和壓力控制的色譜系統。硬管材質通常為不銹鋼或高耐壓塑料，能夠在高壓條件下保持穩定性。 快速連接系統則通過快捷的卡扣設計，可以快速拆卸、組裝，減少設備更換時間。在自動化實驗和大規模蛋白質純化系統中，這種連接方式的高效性尤為突出。 (3) 聯鎖閥門與自動化系統的結合 自動化蛋白質純化系統中，聯鎖閥門和智能控制系統的結合使用可以實現更的實驗操作。這些系統通過電子傳感器監控流體的狀態，并根據反饋自動調節流量、壓力等參數。閥門之間的聯鎖設計則避免了人為操作錯誤，確保了實驗過程的穩定性。 3. 連接方法的優化建議 在選擇合適的連接方式時，研究人員應根據實驗的具體要求，綜合考慮以下幾個因素： 流量與壓力要求：系統是否需要大流量和高壓處理，這將直接影響管道和連接件的選擇。 清潔與消毒要求：高純度蛋白質的提純過程要求系統設備必須能夠高效清洗，連接點應易于拆卸清洗，防止交叉污染。 操作與維護的便利性：在多次使用的實驗環境中，連接系統的拆卸與維護便利性至關重要，過于復雜的連接會增加操作難度。 自動化程度與智能控制：根據實驗規模，選用適合的自動化系統，能夠提高實驗效率，減少人為操作帶來的誤差。 4. 結語 蛋白質純化系統的連接方法是影響純化效果和實驗效率的關鍵因素。合理的連接方案不僅能優化流體通路，提升純化效果，還能確保系統的長期穩定運行。通過合理選擇軟管與接頭、硬管與快速連接系統，或是聯鎖閥門與自動化系統的組合，能夠使整個實驗過程更加高效與精確。專業的連接方案在蛋白質純化的各個環節中發揮著至關重要的作用，保障研究工作的成功開展。
54人看過
- 2025-01-15 12:15:14蛋白質純化系統維修報價在哪個范圍？
- 蛋白質純化系統是實驗室和生物技術公司中廣泛使用的設備，常用于分離、純化和分析各種蛋白質。由于其在科研和工業應用中的重要性，系統的穩定性和高效運行至關重要。像任何復雜的機械設備一樣，蛋白質純化系統也可能出現故障，導致工作效率下降或實驗結果不準確。因此，了解蛋白質純化系統的維修服務及其相關報價，對于相關機構和科研人員而言尤為重要。本文將詳細探討蛋白質純化系統的維修報價，包括維修服務內容、價格因素以及如何選擇合適的維修公司。 蛋白質純化系統維修服務的內容 蛋白質純化系統的維修服務通常包括定期檢查、故障排除、零部件更換及系統校準等內容。定期維護可以確保設備長期處于佳工作狀態，減少故障發生的概率。例如，檢查系統的泵、閥門、檢測器及管道是否正常工作，清潔系統中的濾芯和管道，檢測所有傳感器的精度等。對于出現故障的設備，維修工程師會進行故障診斷，查找問題的根源并進行修復。若系統內的某些部件損壞或磨損，可能需要更換零件，例如泵、管道或者電路板等。 影響維修報價的因素 蛋白質純化系統的維修報價受到多個因素的影響。維修的復雜性是一個關鍵因素。如果故障較為簡單，維修時間較短，費用自然較低；而若故障較為復雜，需要更換多個部件或者進行深度系統排查，維修成本則會增加。維修所需的零部件也直接影響報價。如果零部件較為昂貴，維修費用也會隨之上升。再者，維修公司所提供的服務質量和技術水平也是決定報價的因素之一。具備更高技術能力和豐富經驗的維修公司，可能收費較高，但其提供的維修質量和服務可能更加可靠，保證設備的長期穩定性。 選擇蛋白質純化系統維修服務提供商的考慮因素 在選擇蛋白質純化系統維修服務提供商時，除了價格因素外，服務的專業性和公司的信譽度也應是考慮的因素。選擇一家有經驗的維修公司能夠確保故障得到及時有效的解決，減少設備停機時間，提高工作效率。服務商是否提供售后支持也是選擇時需要考慮的因素。一些公司會提供維修后的技術支持，如設備調試和使用培訓，確保設備能夠盡快恢復正常運行。 蛋白質純化系統維修報價的市場現狀 蛋白質純化系統的維修市場報價差異較大，主要受地域、維修公司規模及系統品牌等因素的影響。一般來說，設備較為先進或者需要特殊技能進行維護的系統，其維修費用較高。不同地區的維修公司定價也存在差異，一線城市的維修報價通常高于二三線城市。此時，建議實驗室和公司在選擇維修服務時，不僅考慮價格，還應評估服務質量、響應速度及技術能力等方面，做到性價比的大化。 結語 蛋白質純化系統的維修報價由多個因素共同決定，選擇合適的維修服務公司對于設備的長期運行和實驗效果至關重要。通過定期維護和及時維修，能夠大大延長設備的使用壽命，確?？蒲泄ぷ鞯捻樌M行。在選擇維修公司時，不僅要關注報價，更要關注其技術實力和服務質量，這將直接影響到設備的維修效果和未來的穩定運行。
61人看過
- 2024-11-11 15:49:41快速蛋白質液相色譜有哪些特點？方法是什么？
- 快速蛋白質液相色譜（Fast Protein Liquid Chromatography，簡稱FPLC）是一種常用于生物化學、分子生物學和蛋白質研究的高效分離技術。與傳統的液相色譜相比，FPLC能夠在更短的時間內實現高效的蛋白質分離，且具有較高的分辨率和重現性。本文將深入探討快速蛋白質液相色譜的主要特點、應用優勢以及發展前景。高效分離與快速分析FPLC技術顯著的特點之一是其的分離效率和分析速度。通過利用專門設計的高效柱子和優化的流動相，FPLC能夠快速完成蛋白質的分離過程。與傳統液相色譜技術相比，FPLC的運行時間顯著縮短，可以在幾分鐘內完成蛋白質的分離和純化。這使得FPLC在需要快速篩選或分析樣本的實驗中具有獨特的優勢。高分辨率和靈敏度FPLC能夠提供高分辨率的分離效果，確保不同蛋白質分子在復雜混合物中的精確分離。通過精確控制流速和流動相成分，FPLC能夠區分蛋白質分子之間的細微差異，從而實現高靈敏度的檢測。FPLC系統通常配備有在線檢測器，可以實時監控分離過程，確保分離效果的穩定性和重復性。這對于蛋白質組學分析、抗體純化以及生物制藥過程中蛋白質的質量控制尤為重要。自動化與高通量現代FPLC系統的自動化程度較高，許多系統配備了自動樣品進樣、程序化梯度洗脫和數據分析功能。用戶可以預設程序，系統則自動完成分離、純化及分析任務。這種自動化不僅提高了工作效率，還降低了人為操作失誤的可能性，適合大規模、高通量的蛋白質分析與純化。可調節的分離條件FPLC系統具有較強的靈活性，可以根據具體的實驗需求調節分離條件，包括流速、洗脫梯度和流動相的組成。通過這種方式，研究人員可以針對不同蛋白質的理化性質（如親水性、疏水性、電荷等）選擇適合的分離模式。低成本與高效性相較于其他高級分離技術（如凝膠電泳、離心等），FPLC在成本效益上具有一定的優勢。盡管初期設備投入較高，但其高效的分離能力、較短的操作時間以及較低的試劑消耗，使得長期使用下的成本得到控制。應用領域廣泛FPLC技術在生物學和化學研究中的應用非常廣泛。它不僅在基礎科學研究中用于蛋白質純化、蛋白質結構解析、酶活性研究等方面發揮重要作用，還在制藥行業、食品行業以及環保領域等具有重要應用。在生物制藥領域，FPLC用于大規模生產高純度的蛋白質藥物，如單克隆抗體、重組蛋白等。
55人看過
- 2023-12-15 17:17:08蛋白質濃度測定的各種方法及原理有哪些？
- 蛋白質濃度測定的各種方法及原理是生物化學和分子生物學實驗中的重要環節。蛋白質濃度的準確測定對于研究生物分子相互作用、蛋白質功能和動力學、以及生物樣品的分析和鑒定等方面都具有重要的意義。本文將介紹幾種常用的蛋白質濃度測定方法及其原理，包括紫外吸收法、微量凱氏定氮法、雙縮尿法、Lowry 法和考馬斯亮藍法等。通過對這些方法的比較和分析，可以更好地了解它們的優缺點，以便根據實際實驗需求選擇合適的方法來測定蛋白質濃度。 ①紫外吸收法 檢測原理： 蛋白質分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基的苯環含有共扼雙鍵，使蛋白質具有吸收紫外光的性質。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值）與蛋白質含量成正比。此外，蛋白質溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下，蛋白質溶液的光吸收值與蛋白質濃度的正比關系，進行蛋白質含量的測定。 方法特點： 優點：簡便、靈敏、快速，不消耗樣品，測定后仍能回收使用。 缺點：測定蛋白質含量的準確度較差，干擾物質多。 干擾物：含有嘌呤、嘧啶、核酸等吸收紫外光的物質。 檢出限：50~100ug蛋白含量。 適用范圍：適于用測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的蛋白質。 ②微量凱氏定氮法 凱氏定氮法被國內外視為蛋白質含量的標準檢驗方法，可作為衡量其他蛋白質含量檢測方法準確性的標準。 實驗原理： 樣品與濃硫酸共熱，含氮有機物即分解產生氨（消化），氨又與硫酸作用，變成硫酸氨。經強堿堿化使之分解放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。 方法特點： 優點：通用性強，測定費用低，易實現，儀器簡單且測定結果的重復性和重現性好。 缺點：實驗耗時長、靈敏度低。 檢出限：0.2~1mg蛋白含量。 適用范圍：凱氏定氮法測的是總蛋白的量，一些非蛋白氮無法檢測出。 ③雙縮尿法 實驗原理： 雙縮尿（NH3CONHCONH3）是兩個分子經180℃左右加熱，放出一個分子氨后得到的產物。在強堿溶液中，雙縮尿與CuSO4形成紫色絡合物，稱為雙縮尿反應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鏈，或能過一個中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮尿反應。紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比，與蛋白質分子量及氨基酸成分無關。 方法特點： 優點：適合檢測總蛋白質的含量，操作簡單、測量速度快。 缺點：標準物質必須使用代表性很強的樣品，需使用其他參考方法測出標準物質中的蛋白質總含量，故測定工作費力費時。不宜測定樣品種類多、彼此差異大的樣品。 檢出限：測定蛋白質含量測定范圍為1-20mg蛋白質。 干擾物：硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸等。 適用范圍：常用于需要快速，但并不需要十分精確的蛋白質測定。 ④Lowry 法 Lowry 法是雙縮脲法的發展，結合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質的反應，是最靈敏的蛋白質測定方法之一，在生物化學領域得到廣泛的應用，目前分為基本法和改良簡易法，改良簡易法可獲得與基本法相近的結果。 基本法實驗原理： 顯色原理與雙縮尿法相同，但加入了Folin-酚酞試劑，以增加顯色量，從而提高檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是：①在堿性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。②Folin一酚試劑中的磷鉬酸鹽一磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原，產生深蘭色（鉬蘭和鎢蘭的混合物）。在一定的條件下，蘭色深度與蛋白的量成正比。 特點： 優點：靈敏度高。 缺點：耗費時間長，操作時間需精-準控制，標準曲線繪制麻煩，專一性較差，干擾物質比較多。 檢出限：可檢測的最-低蛋白質量達5ug。通常測定范圍是20~250ug。 干擾物：酚類、檸檬酸、硫酸銨、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等。 適用范圍：除蛋白含量測定，也可用于酪氨酸和色氨酸的定量測定。 ⑤考馬斯亮藍法 實驗原理： 考馬斯亮藍G-250染料，在酸性溶液中與蛋白質結合，使染料的最-大吸收峰的位置（max），由465mm變為595nm，溶液的顏色也由棕黑色變為藍色。經研究認為，染料主要是與蛋白質中的堿性氨基酸（特別是精氨酸）和芳香族氨基酸殘基相結合。在595mm下測定的吸光度值A595，與蛋白質濃度成正比。 方法特點： 優點：靈敏度比Lowry高約4倍，高效率、檢測過程簡便、只需要一種試劑，抗干擾能力強。 缺點：測定誤差大，不適用于不同蛋白的檢測。 檢出限：其最-低蛋白質檢測量可達1ug。 干擾物：干擾物質少，但去污劑、TritonX-100、十二烷基硫酸鈉、0.1N的NaOH會干擾實驗測定。 蛋白質含量測定方法選擇 蛋白質含量測定時，考慮以下因素后選定適用的檢測方法。 ①實驗對測定所要求的靈敏度和精確度； ②蛋白質的性質； ③溶液中存在的干擾物質； ④測定所要花費的時間。 義翹神州提供多種類型的蛋白資源，不僅有重組蛋白服務還有各種大咖講座，詳情可以關注https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review
228人看過
滬公網安備 31011502008050號