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2025-01-10 10:53:54圓二色光譜基本原理
圓二色光譜基本原理是基于物質對左旋和右旋圓偏振光吸收差異的一種光譜分析技術。當圓偏振光通過具有手性結構的物質時,由于物質對兩種圓偏振光的吸收不同,會產生圓二色性。這種差異與物質的手性結構密切相關,因此圓二色光譜可用于研究生物大分子如蛋白質、核酸的空間構型,以及藥物分子的手性純度等。該技術具有高靈敏度與選擇性,是化學、生物學及藥學等領域中重要的分析手段。

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2024-12-05 16:18:59圓二色光譜儀校準規程,圓二色光譜圖怎么分析
圓二色光譜儀(CD光譜儀)是分析分子結構和手性物質的關鍵儀器之一,廣泛應用于生物制藥、化學、材料科學等領域。為了確保光譜儀輸出的測量數據準確且具有可信度,進行定期的校準是非常必要的。本篇文章將詳細介紹圓二色光譜儀的校準規程,包括校準步驟、注意事項以及如何確保儀器的長期穩定性。通過科學、規范的校準過程,能夠有效提升實驗數據的質量。校準的重要性圓二色光譜儀主要用于測量樣品在紫外至可見光區域對圓偏振光的吸收差異,從而分析其分子結構及其構象變化。由于此類光譜儀的測量精度受到多種因素的影響,如儀器老化、環境變化等。校準步驟準備標準樣品 校準過程中需要使用標準樣品,這些樣品應當具有已知的光譜特性和穩定的物理化學性質。通常,校準用的標準樣品包括水、乙醇或其他高純度物質,具備標準吸收曲線。校準環境設置 環境因素對光譜儀的性能有著直接的影響。在進行校準前,需確保溫度、濕度和空氣流通等環境條件穩定。光譜儀準備 在進行校準之前,首先需要檢查儀器的基本功能,如光源的穩定性、探測器的靈敏度等。通過儀器自檢系統檢查并確保設備無故障,之后可以進行具體的校準步驟。零點校準 零點校準是確保測量基準正確的首要步驟。通過對標準空白溶液的光譜掃描,確認設備在無樣品的情況下的背景信號,以此作為后續測量的參考。波長校準 波長校準是確保光譜儀的波長準確性。使用已知吸收特征的標準樣品,掃描其光譜,并與文獻值進行比對。強度校準 強度校準是確保測量結果中吸收強度的準確性。通過在多個不同波長下使用標準樣品,確保儀器在所有測試范圍內都能夠準確反映出樣品的吸收強度。系統穩定性檢查 校準過程中還需要對儀器的穩定性進行檢查,確保儀器在連續測量時不會發生信號漂移。注意事項定期校準 為了保證光譜儀始終處于佳工作狀態,校準應定期進行,尤其是在儀器搬遷、長時間不使用或更換關鍵組件后,必須進行全面校準。使用高質量的標準樣品 校準時使用的標準樣品應選擇純度高、物理化學性質穩定的物質。劣質或變質的標準樣品可能導致誤差,影響校準效果。操作人員的專業性 圓二色光譜儀的校準是一個細致且要求高度專業性的過程。操作人員應具備扎實的理論基礎和實際操作經驗,能夠根據具體情況調整校準方案,確保校準的準確性。數據記錄與分析 校準完成后,所有的數據應詳細記錄,并與歷史數據進行對比分析。通過數據分析,可以發現儀器潛在的偏差或故障,及時進行調整。
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2024-10-28 15:39:48便攜式色譜儀有哪些基本原理和技術?
一、便攜式色譜儀的基本構造與原理便攜式色譜儀是一種集成化高、結構緊湊的分析儀器,能夠快速檢測樣品中的化合物。它通常由進樣系統、色譜柱、檢測器和數據處理系統等部分組成。設備通過氣體或液體將樣品帶入色譜柱中二、便攜式色譜儀的應用領域環境監測在環境保護方面,便攜式色譜儀被廣泛用于檢測空氣、水體和土壤中的污染物。其快速的檢測速度和便攜的特性,使得工作人員可以在污染源頭直接獲取數據,及時發現問題,避免污染物進一步擴散。食品安全檢測在食品安全領域,便攜式色譜儀主要用于檢測食品中的農藥殘留、添加劑以及其他有害物質。設備不僅可以在現場檢測,提高檢測效率,減少運輸樣品帶來的時間延遲,同時保證樣品的原始狀態,提升檢測結果的準確性。醫藥行業應用 醫藥行業對化學成分的精確分析需求很高,便攜式色譜儀能夠在現場快速分析藥品中的有效成分和雜質含量,提高藥品研發、生產及質量檢測的效率。便攜式色譜儀在臨床診斷中也得到了應用,幫助醫生進行即時的藥物代謝分析,為臨床決策提供數據支持。圖片中展示了儀器在醫藥實驗室和醫療現場的應用場景,直觀展現了便攜式色譜儀的多樣化用途?;ば袠I的質量控制化工企業中,便攜式色譜儀能夠實時監測生產流程中的化學成分,保證產品質量的一致性。便攜式色譜儀的快速響應能力,使得企業可以在短時間內完成質量檢查三、便攜式色譜儀在使用中的優勢便攜式色譜儀與傳統的臺式色譜儀相比,具有無可替代的優勢。其便攜性使得設備可以用于多種現場分析需求,如緊急事故、流動檢測等。由于其集成化設計,便攜式色譜儀的操作更為簡單,通常只需經過短時間培訓即可上手。便攜式色譜儀還具備快速檢測的能力,有助于減少傳統實驗室檢測所需的等待時間,極大提升了效率。其小型化的結構不需要復雜的電源支持,通常由電池驅動,適合長時間戶外使用。四、便攜式色譜儀選購與使用建議對于用戶來說,選擇合適的便攜式色譜儀至關重要。要根據具體需求選擇合適的色譜柱和檢測器,確保設備能夠高效分離和檢測目標化合物。應關注設備的檢測精度、響應時間和電池續航能力,保證儀器在不同環境下的可靠性。
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2023-07-11 11:08:17超臨界萃取的基本原理
1、萃取劑超臨界萃取所用的萃取劑為超臨界流體。超臨界流體是介于氣液之間的一種既非氣態又非液態的物態,這種物質只能在其溫度和壓力超過臨界點時才能存在。超臨界流體的密度較大,與液體相仿,而它的粘度又較接近于氣體。因此超臨界流體是一種十分理想的萃取劑。2、超臨界流體的溶劑強度取決于萃取的溫度和壓力利用這種特性,只需改變萃取劑流體的壓力和溫度,就可以把樣品中的不同組分按在流體中溶解度的大小,先后萃取出來。(1)在低壓下弱極性的物質先萃取,隨著壓力的增加,極性較大和大分子量的物質與基本性質,所以在程序升壓下進行超臨界萃取不同萃取組分,同時還可以起到分離的作用。(2)溫度變化體現在影響萃取劑的密度與溶質的蒸汽壓兩個因素,在低溫區(仍在臨界溫度以上),溫度升高降低流體密度,而溶質蒸汽壓增加不多,因此,萃取劑的溶解能力時的升溫可以使溶質從流體萃取劑中析出,溫度進一步升高到高溫區時,雖然萃取劑的密度進一步降低,但溶質蒸汽壓增加,揮發度提高,萃取率不但不會減少反而有增大的趨勢。(3)除壓力與溫度外,在超臨界流體中加入少量其他溶劑也可改變它對溶質的溶解能力。其作用機理至今尚未完全清楚。通常加入量不超過10%,且以極性溶劑甲醇、異丙醇等居多。加入少量的極性溶劑,可以使超臨界萃取技術的適用范圍進一步擴大到極性較大化合物。二、超臨界萃取的實驗裝置與萃取方式1、超臨界萃取的實驗裝置多功能超臨界多元流體分步萃取、重組萃取、有毒物成份萃取囘收、超低微量成份萃取回收、精餾、萃取精餾、逆溛萃取、液液萃取、萃取冷凍結晶、多元溶媒的全封閉循環系統以及保健食品的膨化、脫色、脫硫、脫腥異味、著色、加香等的精制加工工業試驗裝置。單純超臨界CO2萃取成套設備2、超臨界流體萃取的流程如附圖所示,它包括:(1)超臨界流體發生源,由萃取劑儲瓶、高壓泵及其他附屬裝置組成,其功能是將萃取劑由常溫壓態轉化為超臨界流體。(2)超臨界流體萃取部分,由樣品萃取管及附屬裝置組成,處于超臨界態的萃取劑在這里將被萃取的溶質從樣品基質中溶解出來,隨著流體的流動,使含被萃取溶質的流體與樣品基體分開。(3)溶質減壓吸附分離部分,由噴口及吸收管組成,萃取出來的溶質及流體,必須由超臨界態經噴口減壓降溫轉化學常溫常壓態,此時流體揮發逸出,而溶質在吸收管內多孔填料表面,用合適溶劑洗吸收管,就可把溶質洗脫收集備用。高壓泵--萃取管--吸收管--收集器--超臨界流體鋼瓶--溶劑洗脫泵2、超臨界萃取的方式超臨界流體萃取的方式可分為:a、動態法:簡單、方便、快速,特別適合于萃取在超臨界流體萃取劑中溶解度很大的物質,而且樣品基體又很容易被超臨界流體滲透的場合。b、靜態法:適合于萃取與樣品基體較難分離或在萃取劑流體內溶解度下大的物質,也適合于樣品基體較為致密、超臨界流體不易滲透的場合,但萃取速度較慢。三、超臨界流體及萃取條件的選擇1、超臨界流體的選擇基本原理為:CO2的臨界溫度(Tc)和臨界壓力(Pc)分別為31.05℃和7.38MPa,當處于這個臨界點以上時,此時的CO2同時具有氣體和液體雙重特性。它既近似于氣體,粘度與氣體相近;又近似于液體,密度與液體相近,但其擴散系數卻比液體大得多。是一個優良的溶劑,能通過分子間的相互作用和擴散作用將許多物質溶解。同時,在稍高于臨界點的區域內,壓力稍有變化,即引起其密度的很大變化,從而引起溶解度的較大變化。因此,超臨界CO2可以從基體中將物質溶解出來,形成超臨界CO2負載相,然后降低載氣的壓力或升高溫度,超臨界CO2的溶解度降低,這些物質就沉淀出來(解析)與CO2分離,從而達到提取分離的目的。不同的物質由于在CO2中的溶解度不同或同一物質在不同的壓力和溫度下溶解狀況不同,使這種提取分離過程具有較高的選擇性。CO2是目前用得最 多的超臨界流體,它不但是很強的溶劑,可以萃取食品加工中范圍很廣的化合物,而且相對來說,性質穩定,價格便宜,無毒,不燃燒,可循環使用。因此特別適用于萃取揮發和熱敏性物質。與傳統溶劑正己烷、二氯甲烷相比,具有顯著的優越性。從溶劑強度考慮,超臨界氨氣是最 佳選擇,但氨很易與其他物質反應,對設備腐蝕嚴重,而且日常使用太危險。超臨界甲醇也是很好的溶劑,但由于它的臨界溫度很高,在室溫條件下是液體,提取后還需要復雜的濃縮步驟而無法采用,低烴類物質因可燃易爆,也不如CO2那樣使用廣泛。2、萃取條件的選擇萃取條件的選擇有幾種情況:(1)是用同一種流體選擇不同的壓力來改變提取條件,從而提取出不同類型的化合物;(2)是根據提取物在不同條件下,在超臨界流體中的溶解性來選擇合適的提取條件;(3)是將分析物沉積在吸附劑上,用超臨界流體洗脫,以達到分類選擇提取的目的;(4)是對極性較大的組分,可直接將甲醇加入樣品中,用超臨界CO2提取,或者用另一個泵按一定比例泵入甲醇與超臨界CO2,來達到增加萃取劑強度的目的。影響萃取效率的因素除了萃取劑流體的壓力、組成、萃取溫度外,萃取過程的時間及吸收管的溫度出會影響到萃取及收集的效率,萃取時間取決于兩個因素:(1)是被萃取物在流體中的溶解度,溶解度越大,萃取效率越高,速度也越快;(2)是被萃取物質在基體中的傳質速率越大,萃取越完全,效率也越高。收集器或吸收管的溫度也會影響到回收率,降低溫度有利于提高回收率。超臨界流體減壓后,用于收集提取物的方法主要有兩類:(1)離線SFE:操作簡單,只需要了解提取步驟,樣品提取物可用其他合適的方法分析。(2)在線SFE或聯機SFE:不僅需要了解SFE,還要了解色譜條件,而且樣品提取物不適用于其他方法分析,其優點主要是消除了提取和色譜分析之間的樣品處理過程,并且由于是直接將提取物轉移到色譜柱中而有可能達到最 大的靈敏度。三、超臨界流體萃取在食品工業的應用實例超臨界流體萃取在食品中的應用,主要是近20年的事情。在食品加工中,幾乎都采用CO2作為萃取劑。1、植物油的萃?。ù蠖?、向日葵、可可、咖啡、棕櫚等的種子)2、動物油的萃?。~油、肝油等)3、從茶、咖啡中脫除咖啡 因,啤酒花的萃?。上r藥的污染)茶葉中富含咖啡 因,約占干物量的2%~5%,咖 啡因是一種生物堿,對人體新陳代謝有著廣泛的影響,有些是有益的,有些就是不很合乎需要,過量消費咖 啡因會影響健康,有些人吃進很少的咖 啡因也受不了。早在50年代就出現了脫咖啡 因紅茶,起初都是使用有機溶劑法,該方法會改變茶葉的色、香、味、形,尤其是不可避免地存在有機溶劑殘留。隨著超臨界流體萃取技術研究應用的深入,人們轉而使用超臨界CO2萃取技術來生產脫咖啡 因紅茶。4、食品的脫脂(無脂淀粉、油炸食品等)5、香料的萃取6、植物色素的萃取及各種物質的脫色、脫臭超臨界CO2的性質與正己烷的極性相似,因此特別適于萃取脂溶性成分。如β-胡蘿卜素、辣椒紅素、煙脂樹橙、葉黃素等。此外,通過使用不同的夾帶劑,可以改變CO2的極性,從而使萃取范圍擴大。利用超臨界CO2萃取海藻中的胡蘿卜素。用丙酮作夾帶劑,可提高萃取率。
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2023-04-26 16:38:54掃描電子顯微鏡的基本原理(一)
自1965年第 一臺商品掃描電鏡問世以來,經過50多年的不斷改進,掃描電鏡的分辨率已經大大提高,而且大多數掃描電鏡都能與X射線能譜儀等附件或探測器組合,成為一種多功能的電子顯微儀器。在材料領域中,掃描電鏡發揮著極其重要的作用,可廣泛應用于各種材料的形態結構、界面狀況、損傷機制及材料性能預測等方面的研究,如圖1所示的納克微束FE-1050系列場發射掃描電鏡。圖1 納克微束FE-1050系列場發射掃描電鏡場發射掃描電鏡組成結構可分為鏡體和電源電路系統兩部分,鏡體部分由電子光學系統、信號收集和顯示系統以及真空系統組成,電源電路系統為單一結構組成。1.1 電子光學系統由電子槍、電磁透鏡、掃描線圈和樣品室等部件組成。其作用是用來獲得掃描電子束,作為信號的激發源。為了獲得較高的信號強度和圖像分辨率,掃描電子束應具有較高的亮度和盡可能小的束斑直徑。1.2 信號收集檢測樣品在入射電子作用下產生的物理信號,然后經視頻放大作為顯像系統的調制信號。1.3 真空系統真空系統的作用是為保證電子光學系統正常工作,防止樣品污染,一般情況下要求保持10-4~10-5Torr的真空度。1.4 電源電路系統電源系統由穩壓,穩流及相應的安全保護電路所組成,其作用是提供掃描電鏡各部分所需的電源。圖3為掃描電鏡工作原理示意圖,具體如下:由電子槍發出的電子束在加速電壓(通常200V~30kV)的作用下,經過兩三個電磁透鏡組成的電子光學系統,電子束被聚成納米尺度的束斑聚焦到試樣表面。與顯示器掃描同步的電子光學鏡筒中的掃描線圈控制電子束,在試樣表面的微小區域內進行逐點逐行掃描。由于高能電子束與試樣相互作用,從試樣中發射出各種信號(如二次電子、背散射電子、X射線、俄歇電子、陰極熒光、吸收電子等)。圖3 掃描電鏡的工作原理示意圖這些信號被相應的探測器接收,經過放大器、調制解調器處理后,在顯示器相應位置顯示不同的亮度,形成符合人類觀察習慣的二維形貌圖像或者其他可以理解的反差機制圖像。由于圖像顯示器的像素尺寸遠大于電子束斑尺寸,且顯示器的像素尺寸小于等于人類肉眼通常的分辨率,顯示器上的圖像相當于把試樣上相應的微小區域進行了放大,而顯示圖像有效放大倍數的限度取決于掃描電鏡分辨率的水平。早期輸出模擬圖像主要采用高分辨照相管,用單反相機直接逐點記錄在膠片上,然后沖洗相片。隨著電子技術和計算機技術的發展,如今掃描電鏡的成像實現了數字化圖像,模擬圖像電鏡已經被數字電鏡取代。掃描電鏡是科技領域應用最多的微觀組織和表面形貌觀察設備,了解掃描電鏡的工作原理及其應用方法,有助于在科學研究中利用好掃描電鏡這個工具,對樣品進行全面細致的研究。轉載文章均出于非盈利性的教育和科研目的,如稿件涉及版權等問題,請立即聯系我們,我們會予以更改或刪除相關文章,保證您的權益。
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2024-11-11 15:36:15快速蛋白液相色譜的基本原理和關鍵步驟主要有哪些?
一、快速蛋白液相色譜的基本原理快速蛋白液相色譜的原理基于蛋白質在液相和固定相中的分布差異。FPLC通常采用中等壓力液相色譜系統,不同于高效液相色譜(HPLC)的高壓,FPLC系統的壓力通??刂圃诘椭林械确秶m合蛋白質等大分子分離。它的流動相為液體,通過控制溶劑流速、壓力、pH等參數,確保樣品在不同流動相條件下,隨著色譜柱中填料的物理、化學特性進行分離。通常使用的固定相包括離子交換、疏水相互作用、分子篩和親和色譜等類型,幫助科學家在不同條件下獲得分離效率。二、FPLC的關鍵技術步驟1. 樣品制備與上樣在進行FPLC操作前,蛋白質樣品需經過初步處理,如緩沖液平衡、濃度調整和去除雜質等。制備后的樣品通過自動進樣器加載到色譜柱上,開始流動相的控制流程。通過精確控制上樣量和流速,保證在不影響分離效果的前提下實現高通量。2. 色譜分離過程在分離過程中,FPLC通過控制流動相的組成和流速,使蛋白質在流動相和固定相之間交替分布。常見的色譜分離方式包括:離子交換色譜(IEC):利用蛋白質分子表面的電荷差異進行分離。在特定的pH條件下,蛋白質分子帶電的差異會導致它們在色譜柱內的滯留時間不同,從而實現分離。分子篩色譜(SEC):依靠分子大小差異進行分離。分子篩色譜柱填料具有不同孔徑的微孔結構,大分子優先流出,而小分子則被填料中的孔隙阻礙,滯留時間更長。疏水相互作用色譜(HIC):利用蛋白質分子疏水側鏈與固定相填料之間的疏水作用,在疏水性環境中實現分離。親和色譜(AC):通過固定相與蛋白質分子特異性結合進行分離,例如使用金屬螯合親和色譜來捕獲含有特定標簽的蛋白質。3. 洗脫與收集在完成分離后,利用溶劑梯度或特定條件改變流動相性質,實現蛋白質的洗脫。通過調節溶液中的pH值、鹽濃度等,逐步將吸附在色譜柱填料上的蛋白質洗脫下來。在收集步驟中,可以根據吸光值(如280 nm處的紫外吸收)監測蛋白質的濃度,確保收集到高純度的目標蛋白質。
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