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儀器網/ 應用方案/ 大腸桿菌質粒DNA的提取

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以下介紹一種Z常用的方法： 堿裂解法：此方法適用于小量質粒DNA的提取，提取的質粒DNA可直接用于酶切PCR擴增銀染序列分析方法如下： 1接1%含質粒的大腸桿菌細胞于2ml LB培養基 237振蕩培養過夜 3取1.5ml菌體于Ep管，以4000rpm離心3min，棄上清液 4加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/L EDTA pH8.0，25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合 5加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH，1％ SDS)，輕輕翻轉混勻，置于冰浴5 min 6加入0.15m1預冷溶液III(5 mol/L KAc，pH4.8)，輕輕翻轉混勻，置于冰浴5 min 7以10，000rpm離心20min，取上清液于另一新Ep管 湘儀H2050R臺式高速冷凍離心機

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