一、深圳艾瑞斯生產(chǎn)的金霉素快速檢測試劑盒概要金霉素是以四并苯為母核的一族抗生素，其中四環(huán)素、土霉素、金霉素及多西環(huán)素以其優(yōu)良的抗性、穩(wěn)定的藥性及低廉的價格，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中廣泛用于疾病的和預(yù)防及促進(jìn)生長。但該類藥物過量使用會導(dǎo)致畜產(chǎn)品中高濃度藥物殘留，直接影響消費者身體健康。高效液相色譜法目前是分析四環(huán)素類藥物殘留量的主要方法，但需要一系列繁瑣的提取和凈化處理步驟，而且存在回收率低，雜質(zhì)干擾大等問題。本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品，能減少操作誤差和工作強(qiáng)度。

二、金霉素快速檢測試劑盒原理

金霉素檢測試劑采用間接競爭ELISA方法檢測組織、蜂蜜、雞蛋等樣本中的金霉素類藥物，試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的金霉素類藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗金霉素類藥物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含金霉素藥物含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中金霉素類藥物的殘留量。

三、適用范圍

金霉素檢測試劑盒可定量、定性檢測組織、蜂蜜等樣本中金霉素的藥殘留量。

四、技術(shù)指標(biāo)

1 試劑盒靈敏度：0.05ppb(ng/ml)

2 反應(yīng)模式：37℃，30min～30min～15min。

3 檢測下限：

組織樣本（雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚、雞蛋）：0.3ppb  蜂蜜樣本：2ppb

4 交叉反應(yīng)率：

金霉素：100%

5 樣本回收率：

組織（雞、鴨、豬肉/肝、蝦、魚）:85±20% 蜂     蜜：75±20%

五、試劑盒組成

酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)液（6個）、高標(biāo)準(zhǔn)液、酶標(biāo)記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復(fù)溶液

六、貯藏條件及保存期

儲藏條件：試劑盒于2-8℃保存，不要冷凍。

保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒。

?酶聯(lián)免疫試驗步驟

將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

實驗開始前需配制標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液；低濃度的標(biāo)準(zhǔn)品不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用。

在0ppb的瓶中加復(fù)溶液3ml，0.2ppb、0.6ppb、1.8ppb、5.4ppb的瓶中分別加復(fù)溶液2ml，16.2ppb的瓶中加復(fù)溶液3ml。

標(biāo)準(zhǔn)液6：取1.0ppm高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液48.6ul加入裝有3ml 復(fù)溶液16.2ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為16.2ppb。

標(biāo)準(zhǔn)液5：取1ml標(biāo)準(zhǔn)液6加入裝有2ml 復(fù)溶液5.4ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為5.4ppb。

標(biāo)準(zhǔn)液4：取1ml標(biāo)準(zhǔn)液5加入裝有2ml 復(fù)溶液1.8ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為1.8ppb。

標(biāo)準(zhǔn)液3：取1ml標(biāo)準(zhǔn)液4加入裝有2ml 復(fù)溶液0.6ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為0.6ppb。

標(biāo)準(zhǔn)液2：取1ml標(biāo)準(zhǔn)液3加入裝有2ml 復(fù)溶液0.2ppb的瓶中，蓋緊，混勻，濃度即為0.2ppb。

標(biāo)準(zhǔn)液1：直接使用復(fù)溶液，濃度即為0ppb。

1 編    號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。

2 加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加抗體工作液50μl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光反應(yīng)30min。

3 洗    滌：小心揭開蓋板膜，甩去孔內(nèi)液體，每孔加350ul工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，一次拍干。（用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。

4 加酶反應(yīng)：加酶標(biāo)記物100μl/孔，37℃避光反應(yīng)30min。

5 洗    滌：同上

6 顯    色：加底物液A 50μl/孔，再加底物液B 50μl/孔，輕輕振蕩5秒混勻，37℃避光顯色15min（若藍(lán)色過淺，可適當(dāng)延長反應(yīng)時間）。

7 終    止：加終止液50μl/孔，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。

8 測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10min內(nèi)完成。