一、禽流感H9病毒抗體檢測試劑盒

通用名：禽流感H9亞型病毒抗體檢測試劑盒

英文名：Diagnostic Kit for Antibodies to Avian Influenza Virus (Blocking ELISA )

二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒

三、預期用途

禽流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟，是由A型禽流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）引起的禽類的一種急性、高度致死性傳染病，以急性敗血性死亡到無癥狀帶毒為特征。

用于檢測雞、鴨、鵝等禽類血清、血漿或蛋黃中禽流感H9亞型病毒抗體，可用于免疫效果評價、輔助診斷等。

四、禽流感H9病毒抗體檢測試劑盒原理

禽流感H9亞型病毒抗體試劑盒系由預包被禽流感H9亞型病毒抗原的酶標板、抗體工作液、酶標記物及其他配套試劑組成，應用競爭酶聯免疫法原理檢測禽類血清、血漿或蛋黃中A型禽流感病毒抗體。實驗時在酶標板中加入稀釋的待檢樣本和抗體工作液，若樣品中含有禽流感病毒抗體則將阻斷抗體工作液與酶標板上抗原結合，從而使后續反應不出現顯色；反之則出現顯色；顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負相關；加入終止液終止反應后，產物變為黃色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有禽流感H9亞型病毒抗體。

五、禽流感H9亞型病毒抗體檢測試劑盒組成

酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照

六、儲存及有效期

于2～8℃避光保存，有效期為12個月。

包被板開封后請于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限為2個月。

【樣品準備】

1.血清/血漿：取動物全血按常規方法制備血清或血漿，要求血清/血漿清亮，無溶血、無污染。樣品1周內可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。

蛋黃：取2ml新鮮蛋黃加2ml生理鹽水震蕩混勻，3000轉/分鐘離心15分鐘，取上清作為樣本。

2.待檢血清、血漿或已處理蛋黃樣本恢復室溫、混勻待用。陰、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。

【檢驗方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。

2.取所需用量酶標板條，設陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。

3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl；樣品孔每孔先加入40μl工作洗滌液,再加入10μl待檢樣本。

4.每孔加抗體工作液50μl，混勻，蓋好蓋板膜，置37℃（推薦水?。┍芄夥磻?0分鐘。

5.甩去孔內液體，每孔加350μl工作洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，一次拍干。

6.每孔加酶標記物100μl，蓋好蓋板膜，置37℃避光反應30分鐘。

7.洗滌，同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻蓋好蓋板膜，置37℃避光反應15分鐘。

9.每孔加終止液50μl，混勻，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。

【參考值】 實驗正常的情況下，陰性對照吸光值≥1.0，陽性對照吸光值≤陰性對照吸光值×50%。