Pirfenidone D5 (AMR69 D5, AMR69D5, PirfenidoneD5) 是 Pirfenidone的氘代物，具有廣譜抗纖維化和抗炎作用，能降低神經膠質瘤細胞密度，能抑制血清刺激的DNA合成和細胞增殖的增加。

產品性質

運輸和保存方法

冰袋運輸。粉末直接保存于-20℃，有效期2年。溶于DMSO。建議分裝后-20℃避光保存，避免反復凍融。

注意事項

1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2. 粉末溶解前請先短暫離心，以保證產品全在管底。

3. 請勿吸入、吞咽或者直接接觸皮膚和眼睛。

4. 本產品僅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用濃度

【具體使用濃度請參考相關文獻，并根據自身實驗條件（如實驗目的，細胞種類，培養特性等）進行摸索和優化。】

使用方法（數據來自于公開發表的文獻，僅供參考）

（一）細胞實驗（體外實驗）

在LN-18、T98G、LNT-229和LN-308細胞系中，Pirfenidone (< 10 mM) 以濃度依賴性方式降低神經膠質瘤細胞密度。在CCL-64細胞中，Pirfenidone (< 5 mM) 通過影響TGF-β2 mRNA表達和pro-TGF-β的加工而降低TGF-β生物活性。在LN-308細胞中，Pirfenidone (< 8.3 mM) 抑制重組弗林蛋白酶的活性，并以劑量依賴性方式下調MMP-11的表達。^[1]

在培養的子宮肌層和平滑肌平滑肌細胞中，Pirfenidone以劑量依賴性的方式抑制血清刺激的DNA合成和細胞增殖的增加。^[2]

將CCL-64細胞在不存在或存在Pirfenidone D5 (1, 2.5, 5 mM) 的情況下產生的熱活化LN-308條件培養基中培養72 h。當以濃度依賴性方式暴露于Pirfenidone D5處理的細胞的LN-308上清液時，歸一化CCL-64細胞密度引起的吸光度增加，結果表明用Pirfenidone D5處理48 h的LN-308細胞的上清液所含的生物活性TGF-β低于控制。用Pirfenidone D5 (1, 2.5, 5 mM) 處理的LN-308細胞中TGF-β2 mRNA水平的RT-PCR分析顯示，轉錄水平上TGF-β2呈濃度依賴性降低。^[3]

（二）動物實驗（體內實驗）

吡非尼酮（300 mg/kg/天）給藥4周。吡非尼酮顯著降低博萊霉素（BLM）治療小鼠的評分（P<0.0001）。此外，定量測定肺中膠原蛋白的含量以評價吡非尼酮的抗纖維化作用。與生理鹽水或吡非尼酮處理的小鼠相比，BLM處理的小鼠肺中的膠原含量顯著增加，并且在BLM處理后第28天施用吡非尼酮顯著減弱了這種增加（P=0.0012）。^[4]

在腹膜內注射50 μg/kg脂多糖和250 mg/kg d-半乳糖胺之前，雌性C57BL/6小鼠用500mg/kg吡非尼酮預處理10分鐘。 在脂多糖后1.5 h分離出TNF-a，白介素-6和白細胞介素10，在脂多糖后4.5 h分離出干擾素-g，用于細胞因子mRNA表達的RT-PCR分析，結果顯示：吡非尼酮不會抑制脂多糖注射小鼠脾臟中的TNF-α，干擾素-g和白細胞介素6 mRNA表達，但會增強白細胞介素10 mRNA表達。^[5]

參考文獻

[1]. Burghardt I, et al. Pirfenidone inhibits TGF-β expression in malignant glioma cells[J]. Biochemical and biophysical research communications, 2007, 354(2): 542-547.

[2]. Lee B S, et al. Pirfenidone: a novel pharmacological agent that inhibits leiomyoma cell proliferation and collagen production[J]. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 1998, 83(1): 219-223.

[3]. Isabel Burghardt, et al. Pirfenidone inhibits TGF-β expression in malignant glioma cells., 354(2), 0–547.

[4] Inomata M, et al. Pirfenidone inhibits fibrocyte accumulation in the lungs in bleomycin-induced murine pulmonary fibrosis. Respir Res. 2014 Feb 8;15: 16.

[5]. Hitoshi Nakazato; Hisashi Oku; Shoji Yamane; Yuji Tsuruta; Ryuji Suzuki (2002). A novel anti-fibrotic agent pirfenidone suppresses tumor necrosis factor-α at the translational level., 446(1-3), 177–185.

HB221111