大腸桿菌的一般的培養方法
大腸桿菌（Escherichia coli，E.coli） 革蘭氏陰性短桿菌，大小0.5×1～3微米。周生鞭毛，能運動，無芽孢。能發酵多種糖類產酸、產氣，是人和動物腸道中的正常棲居菌，嬰兒出生后即隨哺乳進入腸道，與人終身相伴，幾乎占糞便干重的1/3。下面讓小編為你介紹一下大腸桿菌的一般培養方法。
培養基準備：
使用牛肉膏蛋白胨培養基，組成成分：瓊脂15～20g,Nacl5g,牛肉膏3g,蛋白胨10g,水1000mL,PH值7.4～7.6。
配置步驟：
1.稱藥品
計算實際用量，根據配方稱取各種藥品然后將它們放入大燒杯中，可以將牛肉膏放在小燒杯或表面皿中進行稱量，用熱水溶解后往大燒杯里倒入。也可以將牛肉膏放在稱量紙上稱量，之后放入熱水中，使得牛肉膏與稱量紙分離，然后立即將紙片取出，蛋白胨非常容易吸潮，所以稱量時動作要快。
2.加熱溶解
將低于所需要的水量加入到燒杯中，然后將在石棉網上放上燒杯，用小火加熱，并且用玻棒攪拌,等到藥品完全溶解后，再往燒杯內加水到所需要的水量。如果配制固體培養基,那么向已經溶解的藥品中加入稱好的瓊脂，再加熱融化,這個過程，需要持續攪拌，避免防瓊脂糊底或溢出，Z后補充失掉的水分。
3.調pH
對培養基的pH進行檢測，如果pH偏酸,那么可以滴加NaOHlmol/L，一邊滴加一邊攪拌,并且隨時用pH試紙對的pH進行檢測，一直到pH在所需pH范圍為止。如果pH偏堿，那么就用1mol/LHCl進行調節，一般在加瓊脂之前進行pH的調節，需要注意pH值不要調過頭,避免因為回調而對培養基內各離子的濃度產生影響。
4.過濾
可以使用濾紙過濾液體培養，可以用4層紗布對固體培養基進行趁熱過濾，對于觀察培養有好處。然而如果是供一般使用的培養基,那么可以省略這一步。
5.分裝
根據實驗要求，能夠通過試管或三角瓶內對配制的培養基進行分裝，為了防止培養基沾在管口或瓶口上而導致污染，分裝時可以使用漏斗。分裝量：固體培養基大約是試管高度的l/5,在滅菌后制成斜面，往三角瓶內進行分裝，容積不超過其的一半Z為恰當。半固體培養基占試管高度的1/3比較適合。滅菌后垂直待凝。
6.加棉塞
用普通棉花(非脫脂棉)制作的棉塞塞在試管口和三角瓶口上，要選擇形狀,大小和松緊度均合適的棉塞，為了起到避免雜菌侵入和有利通氣的作用，棉塞四周要緊貼管壁,不留縫隙。棉塞總長約3/5要3/5塞入試管口或瓶口內,防止棉塞脫落。一些微生物需要更好的通氣，那么需要使用8層紗布制成通氣塞，有時候也能用試管帽或塑料塞代替棉塞。
7.包扎
為了避免滅菌時冷凝水沾濕棉塞，需要在加塞后用一層牛皮紙或雙層報紙將三角瓶的棉塞外表面包住。如果養基分裝于試管中，那么應該將5支或7支放在一起，再用牛皮紙將棉塞外包住，用繩扎好，然后將培養基名稱,組別,日期用記號筆注明。
8.滅菌
在121.3℃濕熱滅菌上述培養基20min，如果由于特殊情況不能及時滅菌，那么應該暫時存放在冰箱里。
9.無菌檢查
在37℃溫箱中培養24～48h滅菌的培養基，無菌生長立刻就能夠使用，或者將其在冰箱或清潔的櫥內貯存備用。
大腸桿菌的培養：
在37攝氏度條件下進行48到72小時的恒溫培，由于不同的接種和具體培養條件不同，所以明顯的菌落通常均是在2天以后才會長出。乳白色，圓形，菌落邊緣整齊，表面光滑，表面和背面顏色一致是菌落的特征。
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