微生物鑒定系統(tǒng)的工作原理
微生物鑒定系統(tǒng)近年來(lái)得到了快速發(fā)展，可快速準(zhǔn)確地對(duì)臨床數(shù)百種常見(jiàn)分離菌進(jìn)行自動(dòng)分析鑒定和藥敏試驗(yàn)。目前微生物鑒定系統(tǒng)已在世界范圍內(nèi)臨床實(shí)驗(yàn)室中廣泛應(yīng)用。
微生物鑒定系統(tǒng)的工作原理
目前微生物鑒定系統(tǒng)從原理上包括以下幾種：
1、基于表型的鑒定方法：如Microstation和Omnilog自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)，基于95種碳源或化學(xué)敏感物質(zhì)的利用為原理，可鑒定細(xì)菌、酵母和霉菌超過(guò)2650種;另外還有基于脂肪酸鑒定的方法，采用氣相色譜分析微生物細(xì)胞壁的脂肪酸構(gòu)成;在臨床領(lǐng)域，梅里埃、BD、熱電和西門(mén)子都有相應(yīng)的自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)，其數(shù)據(jù)庫(kù)主要以鑒定致病菌為主，通常是200-600種數(shù)據(jù)庫(kù)，可做藥敏測(cè)試;
2、基于基因型的鑒定方法：如基因測(cè)序法及基因條帶圖譜法。
3、基于蛋白的鑒定方法：以布魯克和梅里埃為代表，基于蛋白質(zhì)飛行質(zhì)譜平臺(tái)，分析不同高度保守的微生物核糖體蛋白電解離后的電子飛行時(shí)間進(jìn)行鑒定。
三類(lèi)方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，理論上不沖突，應(yīng)該互為補(bǔ)充，應(yīng)根據(jù)需要進(jìn)行選擇。
微生物鑒定和藥敏試驗(yàn)分析系統(tǒng)
微生物鑒定和藥敏試驗(yàn)分析系統(tǒng)在臨床微生物實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用，為微生物檢驗(yàn)工作者對(duì)病原菌的快速診斷和藥敏試驗(yàn)提供了有力工具。
微生物鑒定系統(tǒng)的工作原理因不同的儀器和系統(tǒng)而異。不同的細(xì)菌對(duì)底物的反應(yīng)不同是生化反應(yīng)鑒定細(xì)菌的基礎(chǔ)，而試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確度取決于鑒定系統(tǒng)配套培養(yǎng)基的制備方法、培養(yǎng)物濃度、孵育條件和結(jié)果判定等。大多微生物鑒定系統(tǒng)采用細(xì)菌分解底物后反應(yīng)液中pH的變化，色原性或熒光原性底物的酶解，測(cè)定揮發(fā)或不揮發(fā)酸，或識(shí)別是否生長(zhǎng)等方法來(lái)分析鑒定細(xì)菌。
藥敏試驗(yàn)分析系統(tǒng)的基本原理是將抗生素微量稀釋在條孔或條板中，加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育，通過(guò)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度，或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解，觀(guān)察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。在含有抗生素的培養(yǎng)基中，濁度的增加提示細(xì)菌生長(zhǎng)，根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)解釋敏感或耐藥。
常見(jiàn)的微生物鑒定系統(tǒng)
1、VITEK-ATB半自動(dòng)細(xì)菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)
VITEK-ATB是生物-梅里埃公司產(chǎn)品，由計(jì)算機(jī)和讀數(shù)器兩部分組成，計(jì)算機(jī)程序包括ATB和API的鑒定數(shù)據(jù)庫(kù)、ATB的藥敏數(shù)據(jù)庫(kù)、數(shù)據(jù)儲(chǔ)存和分析系統(tǒng)及藥敏專(zhuān)家系統(tǒng)。微生物鑒定和藥敏反應(yīng)板在機(jī)外孵育后，一次性上機(jī)讀取結(jié)果，由計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析和處理，并報(bào)告細(xì)菌鑒定和藥敏結(jié)果。
2、AutoScan-4半自動(dòng)細(xì)菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)
AutoScan-4由計(jì)算機(jī)和讀數(shù)器兩部分組成。微生物鑒定和藥敏反應(yīng)板在機(jī)外孵育后，一次性上機(jī)，自動(dòng)判讀鑒定和藥敏試驗(yàn)結(jié)果;亦可人工進(jìn)行判讀，將編碼輸入計(jì)算機(jī)，由計(jì)算機(jī)軟件評(píng)定結(jié)果。有微生物鑒定及鑒定藥敏復(fù)合板兩種測(cè)試卡。
3、BBLTM CrystalTM半自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)
BBLTM CrystalTM半自動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)是BD公司產(chǎn)品，將傳統(tǒng)的酶、底物生化呈色反應(yīng)與先進(jìn)的熒光增強(qiáng)顯色技術(shù)結(jié)合以設(shè)計(jì)鑒定反應(yīng)Z佳組合。反應(yīng)板在機(jī)外孵育后，上機(jī)自動(dòng)判讀鑒定結(jié)果。配套提供獨(dú)立分裝的鑒定用肉湯試管，確保無(wú)菌狀態(tài)，使用方便。配套比濁儀可快速調(diào)配所需濁度的菌液。
4、AutoReader半自動(dòng)細(xì)菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)
AutoReader半自動(dòng)細(xì)菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)和讀數(shù)儀等組成。采用熒光測(cè)定法，反應(yīng)板在機(jī)外作定時(shí)孵育后，上機(jī)讀數(shù)，由SAMS軟件評(píng)定測(cè)定結(jié)果，也可通過(guò)SAMS系統(tǒng)人工確認(rèn)法輸入計(jì)算，或完全由人工輸入作評(píng)定。所用鑒定板和藥敏板與全自動(dòng)機(jī)型中的反應(yīng)板是一樣的。
5、YJ圈直徑測(cè)量?jī)x
YJ圈直徑測(cè)量?jī)x已在臨床應(yīng)用。經(jīng)孵育后的藥敏平板，被儀器的圖象分析系統(tǒng)識(shí)別并計(jì)算YJ圈直徑。根據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告藥敏試驗(yàn)結(jié)果。這些儀器可減少人工測(cè)量YJ圈直徑大小差異及主觀(guān)判斷錯(cuò)誤。
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