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微流式細胞儀的基本結構

類型: 2019-04-16 14:59:43 1141閱讀次數

微流式細胞儀:以微毛細管技術為基礎的新一代高性能流式細胞儀。自1998年微毛細管技術用于流式細胞檢測的技術在美國獲得專li以來,微流式技術以微樣本量、微操作量、微學習量、微負擔以及微體積,為腫瘤學、免疫學、慢性疾病研究以及新藥研發和轉化醫學等領域提供檢測方案。

組成

微流式細胞分析儀主要由四部分組成:以微毛細管專li技術為基礎的液流系統;激光和光學系統;光電檢測器件;以及軟件系統。


微流式特色的液流系統

微毛細管技術:樣品上樣時,由微毛細管與樣品液體接觸的橫截面ZX形成的負壓區,形成單細胞流上行。注射泵提供穩定精確的上樣流與上樣體積。由微毛細管和注射泵協同作用形成的單細胞流更加精確與穩定。運行8小時只產生不到50ml的廢液;允許檢測樣本Z小上樣量僅為1000個細胞;同時無鞘液系統的液流系統成固定狀態,儀器操作簡單,縮短學習時間,從而提高研究效率。

激光和光學系統

微流式通過激光照射對細胞上不同的特性進行檢測。激光器的選擇對細胞分析檢測尤為重要。全固態激光器(DPL)具有體積小、重量輕、效率高、性能穩定、可靠性好、壽命長、光束質量高等優點。由于其單位輸出的熱負荷降低,可獲取更高的功率,更長的系統壽命和可靠性。除了激光器材料的選擇外,還可根據激發波長對激光器進行選擇。488nm是Z通用的激光器波長,可以激發包括FITC, PE, PE-Cy5.5, PE-Cy7,PI, CFSC等多種熒光素。640nm激光器是紅色激光器,通用熒光素包括了APC, AlexaFluor647, APC-Cy7等熒光素,多用于免疫檢測。

光學系統中的多種濾片的組合設計為提高熒光信號的信噪比提供了保障。帶通濾片(band-Pass filter)是一個允許特定頻段的波通過,同時屏蔽其他頻段的濾光光片,如: 690/50表示只有665-715nm范圍內的光才能通過,任何小于665nm或大于715nm的光不被透過。因此,確保了對特異性熒光的檢測,并提高信噪比。

光電檢測器件


經激光激發的特異性熒光信號,必須通過光電轉換器才能將光信號轉換為電子信號,并被計算機處理。光電倍增管(PMT)是被廣泛應用于熒光信號檢測器件。PMT可將微弱熒光信號通過光電效應轉變成電信號并利用二次發射電極轉為電子培增的電真空器件。

由PMT檢測器輸出的脈沖信號經快速模數轉換器(FAST ADC)處理后輸入到計算機內。Fast ADC比傳統A/D處理處理速度更快,反應更靈敏。

軟件系統

軟件系統是用戶直接接觸的界面。軟件系統通常控制了儀器的啟動、維護、樣本的采集和數據分析功能。軟件系統的智能化程度決定了儀器的可操作程度。目前被普遍接受的軟件系統通常包括了模塊化的維護程序、智能化應用模塊以及用戶可調的開放模塊。智能化應用模塊越齊全,用戶的學習周期則越短,越能盡早上手操作系統。如多色熒光檢測時的多色熒光補償通常限制了入門級用戶操作儀器的難點。Zxin的軟件系統支持自動熒光補償,以準確、標準的設置提高儀器的可操作度,擺脫對經驗的依賴并確保數據的準確性。

由此可見,軟件系統的數據分析力是判斷儀器總體表現重要環節。提供數據分析策略的軟件,往往能提供更直觀的分析結果,整合縱向數據進行比較,結合Z先進的統計模塊,并為實現自動熒光補償提供策略。


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最近更新:2023-09-14 11:51:19
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