高速逆流色譜儀的技術特點
1982年,美國國立衛生院Ito博士研制開發了一種新型的、連續GX的液液分配色譜技術--高速逆流色譜法,這種技術不同于其它色譜技術,任何固態載體其均不需要,所以可以使固相載體表面與樣品發生反應而造成的樣品污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響得以避免,同時其具備較高的回收率,低廉的價格,較大的進樣量,較為廣泛的適用范圍以及快速等優點。所以其廣泛應用于生物、醫藥、食品、材料、化妝品和環保等領域,其在天然產物活性成分的分離純化領域特別受到重視。
技術特點
1、有較高的重現性
若樣品的表面活性作用不是很強,酸堿性也很弱,就算進樣多次,其也會保持非常穩定的分離過程,并且會有十分好的重現性。
2、較高的分離量以及較高的分離效率
因為有別于通常的色譜分離方式,梯度洗脫和反相洗脫可以得到實現,重復進樣也能夠進行,讓其對于制備性分離尤其適用,產品具備較高的純度和數量。
3、分配系數
溶劑系統的選擇為同時對色譜分離過程的兩相進行選擇,樣品成功分離的關鍵也取決于此,這種溶劑系統合適與否取決于樣品中各組分的分配系數,所以選擇溶劑系統的重要環節是分配系數的測定。目前為止,分析型HSCCC法,生物活性分配比率法,HPLC法,毛細管電泳法以及薄層色譜法均是測定分配系數的常用方法。
4、較為廣泛的應用范圍與良好的適應性
因為能夠為無限多的溶劑系統的組成及配比,所以,就理論而言,對于分離任何極性范圍內樣品均適用,在對于天然化合物的分離上尤為獨到。因為聚四氟乙烯管中的固定相是液體,固相載體沒有必要用到,所以能夠使因為使用固相載體而帶來的吸附損失得以消除,尤其對于極性物質的分離非常適用。
5、簡便、易掌握的操作
儀器能夠相對簡便地進行操作,樣品的預處理有著很低的要求。
6、有較高的回收率
固相載體不需要,使因為樣品在固相載體上的不可逆吸附和降解導致的損失得以消除,從理論上而言樣品的回收率能夠達到很高的水平。在實驗過程中,僅需將分離條件調整好,回收率通常就會很高。
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