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小鼠環加氧酶2(COX-2)試劑盒使用方法
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本文由 上海科興商貿有限公司 整理匯編
2018-10-03 10:00 112閱讀次數
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檢測范圍:96T2ng/L-80ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中環加氧酶2(COX-2)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠環加氧酶2(COX-2)水平。用純化的小鼠環加氧酶2(COX-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入環加氧酶2(COX-2),再與HRP標記的環加氧酶2(COX-2)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環加氧酶2(COX-2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠環加氧酶2(COX-2)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(160ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個
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猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒說明書
- 猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒試驗原理:COX-2試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知COX-2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將COX-2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中COX-2的濃度呈比例關系。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒內容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品:800IU/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進行稀稀空白對照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標準品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標記的抗COX-2抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:800IU/L(6號標準品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400IU/L(5號標準品)100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液200IU/L(4號標準品)100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液100IU/L(3號標準品)100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液50IU/L(2號標準品)100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液25IU/L(1號標準品)100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0IU/L(空白對照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒建議使用的實驗方案標準品濃度(IU/L)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。猴環氧化酶-2(COX-2)ELISA檢測試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的COX-2標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的COX-2含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800IU/L4、敏感度:1.0IU/L[詳細]
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2019-01-02 10:00
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小鼠CD44試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T1μg/L-32μg/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中CD44含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠CD44水平。用純化的小鼠CD44抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入CD44,再與HRP標記的CD44抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CD44呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠CD44濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(64μg/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
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小鼠c-fos試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中c-fos含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠c-fos水平。用純化的小鼠c-fos抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入c-fos,再與HRP標記的c-fos抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的c-fos呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠c-fos濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-10-03 10:00
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小鼠白細胞介素試劑盒使用方法
- 小鼠白細胞介素試劑盒使用方法[詳細]
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2024-09-29 01:25
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小鼠黑色素(MC)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T1ng/L-32ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中黑色素(MC)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠黑色素(MC)水平。用純化的小鼠黑色素(MC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入黑色素(MC),再與HRP標記的黑色素(MC)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黑色素(MC)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠黑色素(MC)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(64ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。32ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液16ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液8ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液4ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液2ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。[詳細]
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2018-09-19 10:01
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小鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T30ng/L-800ng/L使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中γ干擾素(IFN-γ)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠γ干擾素(IFN-γ)水平。用純化的小鼠γ干擾素(IFN-γ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入γ干擾素(IFN-γ),再與HRP標記的γ干擾素(IFN-γ)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的γ干擾素(IFN-γ)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠γ干擾素(IFN-γ)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(1600ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
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小鼠環孢素A(CsA)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T4ng/mL-120ng/mL使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中環孢素A(CsA)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠環孢素A(CsA)水平。用純化的小鼠環孢素A(CsA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入環孢素A(CsA),再與HRP標記的環孢素A(CsA)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環孢素A(CsA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠環孢素A(CsA)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(240ng/mL)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
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小鼠膠原酶Ielisa試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T3ng/ml-85ng/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中膠原酶I(CollagenaseI)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠膠原酶I(CollagenaseI)水平。用純化的小鼠膠原酶I(CollagenaseI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入膠原酶I(CollagenaseI),再與HRP標記的小鼠膠原酶I(CollagenaseI)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的膠原酶I(CollagenaseI)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠膠原酶I(CollagenaseI)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(160ng/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
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小鼠胃動素(MTL)試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T20pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中胃動素(MTL)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胃動素(MTL)水平。用純化的小鼠胃動素(MTL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胃動素(MTL),再與HRP標記的胃動素(MTL)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胃動素(MTL)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠胃動素(MTL)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(960pg/ml)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個[詳細]
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2018-09-19 10:01
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