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• 小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒

  小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-29 11:01

  課件

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• 人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒

  人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  課件

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• 大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒

  大鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-28 23:58

  應用文章

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• 大鼠內(nèi)毒素（ET）ELISA試劑盒使用說明書

  南京森貝伽現(xiàn)貨供應，質量保證，價格優(yōu)惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清，血漿及相關液體樣本中大鼠內(nèi)毒素（ET）的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠內(nèi)毒素（ET）水平。用純化的大鼠內(nèi)毒素（ET）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)毒素（ET）再與HRP標記的羊抗鼠抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠內(nèi)毒素（ET）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠內(nèi)毒素（ET）濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：0.9Eu/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為0.6Eu/L，0.4Eu/L，0.2Eu/L，0.1Eu/L，0.05Eu/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。注意事項：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：0.02Eu/L-0.8Eu/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

  產(chǎn)品樣冊

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• 人內(nèi)毒素(ET)檢測試劑盒

  人內(nèi)毒素(ET)檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-29 02:02

  課件

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• 人內(nèi)毒素(ET)檢測試劑盒

  人內(nèi)毒素(ET)檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-30 14:18

  應用文章

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• 小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒

  小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-30 14:04

  實驗操作

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• 人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒

  人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-28 21:21

  專利

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• 兔內(nèi)毒素ELISA檢測試劑盒

  兔內(nèi)毒素ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿試驗原理：Endotoxins試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Endotoxins濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Endotoxins和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Endotoxins的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：80pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗Endotoxins抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。兔內(nèi)毒素ELISA檢測試劑盒試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：80pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液20pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液10pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。兔內(nèi)毒素ELISA檢測試劑盒樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的Endotoxins標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的Endotoxins含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-80pg/ml4、敏感度：0.1pg/ml[詳細]

  2018-11-04 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒

  大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-11 00:00

  應用文章

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• 大腸桿菌內(nèi)毒素elisa試劑盒使用說明書

  大腸桿菌內(nèi)毒素elisa試劑盒使用說明書[詳細]

  2015-05-14 00:00

  標準

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• 人內(nèi)皮素（ET）試劑盒

  人內(nèi)皮素（ET）試劑盒本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T3μg/L-120μg/L使用目的：人內(nèi)皮素（ET）試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中內(nèi)皮素（ET）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠內(nèi)皮素（ET）水平。用純化的大鼠內(nèi)皮素（ET）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素（ET），再與HRP標記的內(nèi)皮素（ET）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素（ET）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠內(nèi)皮素（ET）濃度。人內(nèi)皮素（ET）試劑盒標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。120μg/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液60μg/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液30μg/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液15μg/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液7.5μg/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。人內(nèi)皮素（ET）試劑盒注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效：6個月[詳細]

  2018-09-28 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒技術標準品

  人大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒技術標準品[詳細]

  2016-03-22 00:00

  標準

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• 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒

  人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-06 00:00

  實驗操作

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• 大鼠內(nèi)毒素（Endotoxin）ELISA 檢測試劑盒現(xiàn)貨

  大鼠（Rat）內(nèi)毒素（Endotoxin）ELISA檢測試劑盒用途：大鼠EndotoxinELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的Endotoxin。本試劑盒可以檢測天然和重組的Endotoxin。本試劑盒專用于科研、而非用于臨床診斷。試驗原理：大鼠Endotoxin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Endotoxin濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Endotoxin和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Endotoxin的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：80pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標記的抗Endotoxin抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（60ml）1瓶（30ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型大鼠（Rat）內(nèi)毒素（Endotoxin）ELISA檢測試劑盒自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500u、1000lul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：80pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液20pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液10pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液5.0pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液2.5pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（20×）的稀釋：蒸餾水20倍稀釋。大鼠（Rat）內(nèi)毒素（Endotoxin）ELISA檢測試劑盒操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品結果分析以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的Endotoxin標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的Endotoxin含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。大鼠（Rat）內(nèi)毒素（Endotoxin）ELISA檢測試劑盒局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1．靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。2．特異性：不與人其它細胞因子反應。3．重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。[詳細]

  2018-09-19 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒

  雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-28 00:42

  實驗操作

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• 豬內(nèi)皮素（ET）試劑盒使用方法

  豬內(nèi)皮素(ET)試劑盒使用方法本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T5.0μg/L-130μg/L使用目的：本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中內(nèi)皮素(ET)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬內(nèi)皮素(ET)水平。用純化的豬內(nèi)皮素(ET)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素(ET)，再與HRP標記的內(nèi)皮素(ET)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素(ET)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中豬內(nèi)皮素(ET)濃度。[詳細]

  2018-09-19 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 內(nèi)毒素檢測試劑盒說明

  顯色基質鱟試劑盒使用說明書（終點顯色法，含偶氮化試劑）【用途】顯色基質鱟試劑（ChromogenicEnd-pointTachypleusAmebocyteLysate,CETAL）用于體外細菌內(nèi)毒素的定量檢測，禁止以任何途徑進入機體。【原理】鱟試劑為鱟科動物東方鱟的血液變形細胞溶解物的冷凍干燥品,鱟試劑中含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在適宜的條件下（溫度，pH值及無干擾物質），細菌內(nèi)毒素激活C因子，引起一系列酶促反應，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的顯色基質，使其分解為多肽和黃色的對硝基苯胺（pNA，λmax=405nm）。在一定時間內(nèi)，pNA的生成量與細菌內(nèi)毒素濃度成正相關，據(jù)此，可以定量供試品的內(nèi)毒素濃度。同時，對硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化試劑染成玫瑰紅色（λmax=545nm），避免了供試品本身的顏色對405nm處吸收峰的干擾。【檢測限】按反應時間不同可檢測0.1EU/ml-1EU/ml和0.01EU/ml-0.1EU/ml兩個區(qū)間（反應時間T1和T2見出廠檢驗報告）。【試劑盒組成】細菌內(nèi)毒素工作品，2支鱟試劑，1.7ml/支，2支顯色基質，1.7ml/支，2支偶氮化試劑1，10ml/支，2支偶氮化試劑2，10ml/支，2支偶氮化試劑3，10ml/支，2支HCl（反應終止劑），50ml/瓶，1瓶細菌內(nèi)毒素檢查用水，50ml/瓶，2瓶【貯存】陰涼處,**2-8℃,避光貯存。【用法】1.材料和設備1.1試劑鱟試劑、細菌內(nèi)毒素工作品、顯色基質、偶氮化試劑1、偶氮化試劑2、偶氮化試劑3、HCl（反應終止劑）、細菌內(nèi)毒素檢查用水。1.2器材旋渦混合儀、移液器、多道移液器、封口膜、試管架。恒溫水浴箱（37±1℃）、分光光度計。注意：接觸試劑及供試品的所有器皿必須是無熱原的（我公司提供無熱原耗材）。玻璃器皿可經(jīng)250℃干烤至少60分鐘去除熱原。2.供試品的貯存與預處理備注：若供試品為血液類，請參照配套血液相關處理試劑使用說明書。2.1供試品的pH值應在6-8之間，若超出此范圍，需用無熱原緩沖液、0.1N氫氧化鈉或0.1N鹽酸調(diào)節(jié)。2.2若供試品中可能存在鱟實驗的干擾物質，處理參見【供試品的干擾試驗】。2.3若供試品中可能含有β－葡聚糖（β－葡聚糖會產(chǎn)生G因子旁路反應，干擾內(nèi)毒素檢測），需選用特異性鱟試劑（我公司提供）。2.4若供試品為一些KJ素如頭孢類KJ素和磺胺制劑會對偶氮染色劑產(chǎn)生偶聯(lián)反應而干擾偶氮化顯色，需要選用不含偶氮化試劑的試劑盒（我公司提供）。2.5若供試品的本底吸光度值大于0.5,必須對供試品進行稀釋后再檢測。2.6若供試品顏色較深（例如溶血），或在酸性條件下顏色加深（例如一些組織培養(yǎng)介質）,必須設置供試品空白管以扣除供試品自身的顏色本底。供試品空白管不加入鱟試劑，以等體積鱟試劑的溶劑（該處為細菌內(nèi)毒素檢查用水）代替。其余操作同供試品管。3.實驗操作3.1細菌內(nèi)毒素標準溶液配制標準曲線所采用的內(nèi)毒素濃度可以為0.01,0.025,0.05,0.1EU/ml或0.1,0.25,0.5,1.0EU/ml。稀釋方法如下（以0.1,0.25,0.5,1.0EU/ml為例）：取細菌內(nèi)毒素工作品1支，按細菌內(nèi)毒素工作品使用說明書稀釋為10EU/ml的內(nèi)毒素溶液，再稀釋為1.0EU/ml的內(nèi)毒素溶液，以1.0EU/ml的內(nèi)毒素溶液為母液按下表稀釋成0.1,0.25,0.5,1.0EU/ml的濃度梯度。配制好的內(nèi)毒素標準溶液應在4小時內(nèi)用完。表1內(nèi)毒素標準溶液配制內(nèi)毒素濃度（EU/ml）10.50.250.1加細菌內(nèi)毒素檢查用水（ml）00.50.750.9加1EU/ml內(nèi)毒素溶液（ml）10.50.250.1鱟試劑：按標示量加細菌內(nèi)毒素檢查用水于鱟試劑中，輕輕振搖使鱟試劑完全溶解,注意不要用旋渦混勻儀激烈振搖。溶解的鱟試劑應在10分鐘內(nèi)用完。顯色基質：按標示量加細菌內(nèi)毒素檢查用水于顯色基質中，輕輕振搖使顯色基質完全溶解。顯色基質溶液可在無污染的條件下于4C貯存8小時以內(nèi)。偶氮化試劑1：按標示量加反應終止劑鹽酸于偶氮化試劑1中，偶氮化試劑2：按標示量加細菌內(nèi)毒素檢查用水于偶氮化試劑2中，偶氮化試劑3：按標示量加細菌內(nèi)毒素檢查用水于偶氮化試劑3中，偶氮化試劑溶液可于4C貯存1周。3.4實驗操作取無熱原試管，加入100ml細菌內(nèi)毒素檢查用水、內(nèi)毒素標準溶液，或供試品。再加入100ml鱟試劑溶液，混勻，37C溫育T1分鐘。溫育結束，加入100ml顯色基質溶液，混勻，37C溫育T2分鐘。溫育結束，加入500ml偶氮化試劑1溶液，混勻，加入500ml偶氮化試劑2溶液，混勻加入500ml偶氮化試劑3溶液，混勻，靜置5分鐘，于545nm波長處讀取吸光度值。（見表２）表2實驗操作陰性對照內(nèi)毒素標準供試品加細菌內(nèi)毒素檢查用水（ml）100加內(nèi)毒素標準溶液（ml）100加供試品（ml）100加鱟試劑（ml）100100100混勻，37C溫育T1分鐘加顯色基質溶液（ml）100100100混勻，37C溫育T2分鐘加偶氮化試劑1溶液（ml）5005005004.數(shù)據(jù)處理建立標準曲線：Y=bX+a，其中Y為545nm處吸光度值，X為內(nèi)毒素的濃度，b為直線斜率，a為Y軸截距。當實驗數(shù)據(jù)同時滿足如下三個條件時實驗才有效：1.標準曲線的相關系數(shù)r≥0.980，2.標準曲線Zdi點的Y值大于陰性對照的Y值，3.供試品平行管的平均值在標準曲線的區(qū)間內(nèi)。【供試品的干擾試驗】供試品的干擾試驗詳見《中華人民共和國藥典》2005版中《細菌內(nèi)毒素檢查法》的“光度測定法干擾試驗”。當鱟試劑、供試品的來源、配方、生產(chǎn)工藝改變或試驗環(huán)境中發(fā)生了任何有可能影響試驗結果的變化時，須進行干擾試驗,步驟如下:1選擇標準曲線中點或一個靠近中點的內(nèi)毒素濃度（設為λm），作為供試品干擾試驗中添加的內(nèi)毒素濃度，配制含λm內(nèi)毒素的供試品陽性對照，測量出該溶液的內(nèi)毒素濃度,稱為Cs；2測量出未添加外源內(nèi)毒素的供試品溶液內(nèi)毒素濃度,稱為Ct；3計算該試驗條件下的回收率R＝（CsCt）/λm×1**%4當R在50%～200%之間，則認為在此試驗條件下供試品溶液不存在干擾作用。5當R在50%～200%之外，需對供試品進行系列稀釋（稀釋倍數(shù)不得超過Zda有效稀釋倍數(shù)MVD）或進行其它處理消除干擾,每一稀釋溶液都重復步驟1-3,直到內(nèi)毒素的回收率R在50%～200%之間。選擇回收率RZ接近1**%的稀釋倍數(shù)進行內(nèi)毒素檢測。[詳細]

  2018-09-18 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒

  小鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-09 00:00

  期刊論文

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• 小鼠Slit2 ELISA試劑盒

  小鼠Slit2 ELISA試劑盒[詳細]

  2013-12-08 00:00

  應用文章

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