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博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書

本文由 上海撫生實業有限公司 整理匯編

2018-10-09 10:00 294閱讀次數

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博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本:體液博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書試驗原理:BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書操作注意事項1.試劑應按標簽儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。9.在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應。3.重復性:板內、板間變異系數均小于10%。博來霉素水解酶(BLMH)ELISA試劑盒說明書結果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BFGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlINS兔子胰島素規格:48T/96TOxLDL兔子氧化低密度脂蛋白規格:48T/96TPF-4/CXCL4兔子血小板因子4規格:48T/96TPDGF兔子血小板衍生生長因子規格:48T/96TPAF兔子血小板活化因子規格:48T/96TFDP兔子血纖蛋白原降解產物規格:48T/96TTM兔子血栓調節蛋白規格:48T/96TPAI-1兔子纖溶酶原激活物YZ因子1規格:48T/96TPAI兔子纖溶酶原激活物YZ因子規格:48T/96TICAM-3/CD50兔子細胞間粘附分子3規格:48T/96TICAM-2/CD102兔子細胞間粘附分子2規格:48T/96TICAM-1/CD54兔子細胞間粘附分子1規格:48T/96TDPD兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉規格:48T/96TDHEA-S兔子脫氫表雄酮硫酸酯規格:48T/96THA兔子透明質酸規格:48T/96TMBP兔子髓磷脂堿性蛋白規格:48T/96TRBP-4兔子視黃醇結合蛋白4規格:48T/96TGHRP兔子生長激素釋放多肽規格:48T/96TADM兔子腎上腺髓質素規格:48T/96-4兔子神經營養因子4規格:48T/96-3兔子神經營養因子3規格:48T/96TNSE兔子神經特異性烯醇化酶規格:48T/96TNGF兔子神經生長因子規格:48T/96TGFAP兔子神經膠質纖維酸性蛋白規格:48T/96TPGE2兔子前列腺素E2規格:48T/96TPGE1兔子前列腺素E1規格:48T/96TGIP兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽規格:48T/96TCORT兔子皮質酮/腎上腺酮規格:48T/96TCortisol兔子皮質醇規格:48T/96TFⅡ兔子凝血因子Ⅱ規格:48T/96TTR兔子凝血酶受體規格:48T/96TBNP兔子腦鈉素/腦鈉尿肽規格:48T/96TES兔子內皮抑素規格:48T/96TeNOS-3兔子內皮型一氧化氮合成酶3規格:48T/96TET-1兔子內皮素1規格:48T/96TET-1兔子內皮素1規格:48T/96TIgM兔子免疫球蛋白M規格:48T/96TIgG兔子免疫球蛋白G規格:48T/96TIgE兔子免疫球蛋白E規格:48T/96TIgA兔子免疫球蛋白A規格:48T/96TSam兔子可溶性粘附分子規格:48T/96TsVCAM-1兔子可溶性血管細胞粘附分子1規格:48T/96TsEPCR兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體規格:48T/96TsICAM-1兔子可溶性細胞間粘附分子1規格:48T/96TsCD40L兔子可溶性白細胞分化抗原40配體規格:48T/96TsP-selectin兔子可溶性P選擇素規格:48T/96TsE-selectin兔子可溶性E選擇素規格:48T/96TANGA兔子抗中性粒細胞顆粒抗體規格:48T/96TMIP-5兔子巨噬細胞炎性蛋白5規格:48T/96TMIP-1α/CCL3兔子巨噬細胞炎性蛋白1α規格:48T/96TCollagenaseII兔子膠原酶II規格:48T/96TCollagenaseI兔子膠原酶I規格:48T/96TbFGF兔子堿性成纖維細胞生長因子規格:48T/96TT4兔子甲狀腺素規格:48T/96TTIMP-1兔子基質金屬蛋白酶YZ因子1規格:48T/96TMMP-9兔子基質金屬蛋白酶9規格:48T/96TMMP-5兔子基質金屬蛋白酶5規格:48T/96TMMP-4兔子基質金屬蛋白酶4規格:48T/96TMMP-3兔子基質金屬蛋白酶3規格:48T/96TCr兔子骨膠原交聯規格:48T/96TT兔子睪酮規格:48T/96THGF兔子肝細胞生長因子規格:48T/96TTE兔子端粒酶規格:48T/96TCETP兔子膽固醇酯轉移蛋白規格:48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF兔子單核細胞趨化蛋白1規格:48T/96TPRL兔子催乳素規格:48T/96TPRL兔子催乳素規格:48T/96TACTH兔子促腎上腺皮質激素規格:48T/96TFSH兔子促卵泡素規格:48T/96TTSH兔子促甲狀腺素規格:48T/96TLH兔子促黃體激素規格:48T/96TLH兔子促黃體激素規格:48T/96TE2兔子雌二醇規格:48T/96TiFABP兔子腸脂肪酸結合蛋白規格:48T/96TC3a兔子補體片斷3a規格:48T/96TC4兔子補體蛋白4規格:48T/96TEGF兔子表皮生長因子規格:48T/96TLIFR兔子白血病YZ因子受體規格:48T/96TLTB4兔子白三烯B4規格:48T/96TIL-4兔子白介素4規格:48T/96TIL-3兔子白介素3規格:48T/96TIL-2兔子白介素2規格:48T/96TIL-1sRⅠ兔子白介素1可溶性受體I規格:48T/96TIL-1β兔子白介素1β規格:48T/96TIL-10兔子白介素10規格:48T/96TIL-1兔子白介素1規格:48T/96TIFN-γ兔子γ干擾素規格:48T/96Tβ-TG兔子β血小板球蛋白/β血栓環蛋白規格:48T/96TIFN-α兔子α干擾素規格:48T/96TS-100兔子S100蛋白規格:48T/96TS-100B兔子S100B蛋白規格:48T/96TE-Selectin/CD62E兔子E選擇素規格:48T/96T

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