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• 葛根素對鼠肝微粒體細胞色素P450的影響

  葛根素對鼠肝微粒體細胞色素P450的影響[詳細]

  2024-09-11 18:02

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  牛乳體細胞數對牛奶品質的影響及牛奶體細胞測定儀，牛奶體細胞檢測儀的重要性[詳細]

  2024-10-06 20:02

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• 小鼠細胞色素P450（Cytochrome P450）ELISA試劑盒說明書

  小鼠細胞色素P450（CytochromeP450）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CytochromeP450單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的CytochromeP450與單抗結合，加入生物素化的抗小鼠CytochromeP450，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，CytochromeP450濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中CytochromeP450濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：10ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。血清測定前用標本稀釋液至少作1：5稀釋（取40ul，加標本稀釋液160ul,稀釋5倍）。2.標準品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應CytochromeP450含量，再乘上稀釋倍數即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CytochromeP450檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的小鼠CytochromeP450。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于8.9％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• FH1266-人胚肝二倍體細胞；CCC-HEL-1

  FH1266-人胚肝二倍體細胞；CCC-HEL-1[詳細]

  2024-05-30 09:33

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• 大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒

  大鼠細胞色素P450(CYP450)ELISA試劑盒[詳細]

  2024-09-14 01:22

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• 細胞色素P450家族成員26A1（CYP26A1）說明書

  細胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒說明書本試劑僅供研究使用標本：體液細胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒試驗原理：BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BFGF和生物素標記的抗體同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA檢測試劑盒洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關系。細胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。5．每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。細胞色素P450家族成員26A1(CYP26A1)ELISA試劑盒結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的BFGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的BFGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlANNA-1/Hu人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體規格：48T/96TNB-Ab人抗神經母細胞瘤抗體規格：48T/96TGM1人抗神經節苷脂抗體規格：48T/96TBPI-Ab人抗殺菌通透性蛋白抗體規格：48T/96Tanti-parotidductAb人抗腮腺管抗體規格：48T/96Tanti-parotidductAb人抗腮腺管抗體規格：48T/96Tanti-cartilage-Ab人抗軟骨抗體規格：48T/96Tanti-cartilage-Ab人抗軟骨抗體規格：48T/96TAhCGAb人抗人絨毛膜促性腺激素抗體規格：48T/96T[詳細]

  2018-10-09 10:00

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• 人細胞色素P450（CYP450）酶聯免疫檢測ELISA

  人試劑盒,人細胞色素P450（CYP450）酶聯免疫檢測ELISA試劑盒使用說明書國內權威的科研試劑供應商，喬羽生物專業經營進口分裝和原裝、國產的Elisa試劑盒，品質保證，技術嚴格，無效果退款退貨。Elisakit規格：48孔配置/96孔配置酶標試劑：3ml×1瓶（48）/6ml×1瓶（96）本試劑僅供研究使用標本：血清或血漿上海喬羽生物專業供應：使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本細胞色素P450（CYP450）含量。試驗原理：CYP450試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知CYP450濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將CYP450和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中CYP450的濃度呈比例關系。[詳細]

  2018-11-09 10:00

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• 手術動員內皮前體細胞的效果及對腫瘤生長的影響

  手術動員內皮前體細胞的效果及對腫瘤生長的影響[詳細]

  2013-07-08 00:00

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• 大鼠肝細胞色素P450酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

  大鼠肝細胞色素P450酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.2ng/L-10ng/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中肝細胞色素P450含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠肝細胞色素P450水平。用純化的大鼠肝細胞色素P450抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肝細胞色素P450，再與HRP標記的肝細胞色素P450抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細胞色素P450呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠肝細胞色素P450濃度。大鼠肝細胞色素P450酶聯免疫分析試劑盒組成標本要求1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。大鼠肝細胞色素P450酶聯免疫分析試劑盒操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。大鼠肝細胞色素P450酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期1．試劑盒保存：2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• 大鼠細胞色素CP450（Cytochrome C P450）ELISA試劑盒說明書

  電話：021-6533363955229872網址：http://www.westang.com大鼠細胞色素CP450（CytochromeCP450）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠CytochromeCP450單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的CytochromeCP450與單抗結合，加入生物素化的抗大鼠CytochromeCP450，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，CytochromeCP450濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中CytochromeCP450濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應CytochromeCP450含量即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CytochromeCP450檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的大鼠CytochromeCP450。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于8.9％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:00

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• 人細胞色素CP450（Cytochrome C P450）ELISA試劑盒說明書

  人細胞色素CP450（CytochromeCP450）ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CytochromeCP450單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的CytochromeCP450與單抗結合，加入生物素化的抗人CytochromeCP450，形成免疫復合物連接在板上，辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合，加入底物工作液顯藍色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，CytochromeCP450濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中CytochromeCP450濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標板（CoatedWells）96孔酶標抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標準品（Standards）：20ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本：血清、血漿（EDTA）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復凍融。2.標準品液配制：使用前加入1ml蒸餾水混勻，配成20ng/ml的溶液。設標準管8管，**管加標本稀釋液900ul，第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標準品或待測樣品100ul，將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次，向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上作圖，畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應CytochromeCP450含量即可。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的CytochromeCP450檢測濃度小于15pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的人CytochromeCP450。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性：板內、板見變異系數均小于8.9％。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔，每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細]

  2018-09-13 10:01

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• 細胞色素P450亞酶1A1酶聯免疫分析使用說明書

  細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.2U/L-16U/L細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）酶聯免疫分析使用目的：本試劑盒用于測定微生物樣本中細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）的活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）水平。用純化的細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1），再與HRP標記的細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）活性濃度。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）酶聯免疫分析操作程序總結：計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。細胞色素P450亞酶1A1（CYP4501A1）酶聯免疫分析保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• 大鼠細胞色素P450 3A2（Cyp3a2）ELISA試劑盒使用說明書

  南京森貝伽現貨供應，質量保證，價格優惠，試劑盒森貝伽。本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中大鼠細胞色素P4503A2(Cyp3a2)的含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠細胞色素P4503A2(Cyp3a2)水平。用純化的大鼠細胞色素P4503A2(Cyp3a2)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細胞色素P4503A2(Cyp3a2)，再與HRP標記的細胞色素P4503A2(Cyp3a2)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞色素P4503A2(Cyp3a2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠細胞色素P4503A2(Cyp3a2)濃度。試劑盒組成：試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品：72pmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶標試劑3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存樣品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。操作步驟：標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為48pmol/L，32pmol/L，16pmol/L，8pmol/L，4pmol/L）。加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。溫育：操作同3。洗滌：操作同5。顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。注意事項：試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物請避光保存。嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。計算：以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。試劑盒性能：1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。2.批內與批見應分別小于9%和11%檢測范圍：1.8pmol/L65pmol/L保存條件及有效期：1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-11-07 14:16

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• 細胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性熒光定量檢測

  主要用途細胞色素P450亞酶CYP2D6（AMMC）活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過AMMC去甲基化酶反應系統中AMMC轉化為AMHC后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品（動物、人體）或純化微粒體樣品細胞色素P450亞酶2D6的活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。技術背景細胞色素P450酶是肝細胞微粒體復合功能單加氧化酶系統的總稱。其分成五十多個亞酶：CYP1至CYP51。作用在于體內外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）。AMMC羥基化酶（AMMC7-hydroxylase）的活性是細胞色素P450亞酶2D6的診斷標記，其基于AMMC羥基化酶選擇性催化細胞色素P450亞酶2D6的活性。人體細胞色素P450亞酶2D6（CYP2D6；EC1.14.14.1），主要表達在肝、腎、胎盤、腦、乳腺、肺、和腸道組織中，是肝組織細胞色素P450酶總量的4%。CYP2D6是多態性酶，在80多個等位基因上，出現變異，具有個體和種族差異，與肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏癥等疾病發生，以及藥物代謝敏感性差異存在相關性。CYP2D6主要代謝三分之一的臨床藥物，尤其含有堿性氮原子（basicnitrogenatom）的藥物，包括異喹胍（debrisoquine）的4-羥基化、鷹爪豆堿（sparteine）的氧化、抗抑郁癥藥物、神經松弛藥（neuroleptic），以及內源性5-羥色胺（hydroxytryptamine）、神經類固醇（neurosteroid）等。同時會產生肝毒性的乙酰苯醌亞胺（N-acetyl-p-benzyquinoneimine）。基于選擇性底物AMMC（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-methoxy-4-methylcoumarin）在CYP2D6的去甲基化（o-demethylation）作用下，轉化為AMHC羥基香豆素（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-hydroxy-4-methylcoumarin）后熒光峰值的變化（激發波長405nm，散發波長460nm），來定量測定細胞色素P450酶2D6的活性。其反應系統為：[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 葛根素的藥物分析

  葛根素的藥物分析[詳細]

  2024-09-17 10:26

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• 細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒說明書

  細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產品說明書主要用途細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應系統中甲氧基異酚唑轉化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品（動物、人體）或純化微粒體樣品細胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。技術背景細胞色素P450亞酶1A2，簡稱為CYP1A2，是肝細胞微粒體復合功能氧化酶系統的成員之一，也是芳香族碳氫化合物加羥基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15％。與CYP1A1高度同源，特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個多態性變體，Z常見的是：1A和1F，與kafeiyin代謝和遲發性皮膚卟啉癥（porphyriacutaneatarda）相關。CYP1A2的作用在于體內外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）,以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳氫化合物誘導CYP1A2的表達。甲氧基異酚唑脫甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是細胞色素P450亞酶1A2的診斷標記，其基于MROD選擇性催化細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下，轉化為羥基異吩唑酮（resorufin）后熒光峰值的變化（激發波長530nm，散發波長590nm），來定量測定細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應系統為：產品內容緩沖液（ReagentA）毫升反應液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升標準液（ReagentD）微升產品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和標準液（ReagentD）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標準樣品操作的容器恒溫水槽：用于孵育反應比色皿或酶標板：用于反應和比色的容器熒光分光光度儀或酶標儀：用于熒光分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進行下列操作。一、測定準備1．準備好待測樣品（例如細胞裂解萃取液或微粒體樣品等），置于冰槽里2．設定好熒光分光光度儀（溫度為37℃）：激發波長530nm，散發波長590nm，并置零3．準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至5號管4．加入xx微升緩沖液（ReagentA）到1號管5．分別加入xx微升緩沖液（ReagentA）到2至5號管6．移取xx微升標準液（ReagentD）到1號管，混勻7．小心移取xx微升1號管稀釋的標準液（ReagentD）到2號管，混勻8．小心移取xx微升2號管稀釋的標準液（ReagentD）到3號管，混勻9．小心移取xx微升3號管稀釋的標準液（ReagentD）到4號管，混勻10．將1至5號管放進冰槽里備用，避免光照；標準管濃度見下表管號緩沖液（ReagentA）標準液（ReagentD）標準羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號管納摩爾/升3微升微升2號管納摩爾/升4微升微升3號管納摩爾/升5微升00二、標準曲線測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的標準液5．上下傾倒數次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進熒光分光光度儀檢測獲得相對熒光讀數8．重復實驗步驟1至7四次9．構建標準曲線：縱座標（Y軸）為相對熒光單位；橫座標（X軸）為標準羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）三、樣品測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）5．上下傾倒數次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進熒光分光光度儀檢測：獲得相關熒光讀數8．（選擇步驟）重復實驗步驟1至7，測讀新的樣品9．根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度四、計算樣品活性[根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數]÷10（分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標板測定1．在96孔酶標板上做好相應標記：標準樣品和待測樣品2．分別移取xx微升緩沖液（ReagentA）到相應孔中3．分別加入xx微升反應液（ReagentB）4．分別加入xx微升底物液（ReagentC）5．分別加入xx微升上述配制的標準液或待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）6．輕輕搖動96孔酶標板7．在37℃溫度下孵育10分鐘8．即刻放進熒光酶標儀檢測：獲得相對熒光讀數9．構建標準曲線：縱座標（Y軸）為相對熒光單位；橫座標（X軸）為標準羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）10．根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度11．活性計算：[根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數]÷xx（反應時間；分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘注意事項1．本產品為25次（比色皿）或85次（酶標板）操作，包括標準液2．操作時，須戴手套3．系統操作過程中，標準液測定只需1次4．樣品須澄清，至關重要（本公司提供細胞可溶性總蛋白質制備試劑盒30002.1）5．孵育反應完成后即刻進行熒光測定6．如果酶活性過低，可以增加反應時間至30分鐘7．熒光測定后，比色皿須清洗徹底8．建議待測樣本為微粒體，其蛋白濃度為20微克/100微升；待測樣本為細胞裂解懸液，其蛋白濃度為100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質濃度定量試劑盒30030.1）9．如果待測樣品濃度過高或過低，可以調整樣品濃度10.通常人體細胞微粒體細胞色素P450亞酶1A2活性濃度為：200－600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11．細胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為：在37℃，pH7.5條件下，每分鐘內能夠轉化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個活性單位12．本公司提供系列毒理學檢測試劑產品質量標準1．本產品經鑒定性能穩定2．本產品經鑒定檢測敏感[詳細]

  2018-11-18 10:00

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• 超高效液相色譜串聯質譜測定鼠血清中葛根素大豆素黃苓

  超GX液相色譜串聯質譜測定鼠血清中葛根素大豆素黃苓[詳細]

  2024-10-01 08:18

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• 細胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產品說明書

  細胞色素P450亞酶1A1活性熒光定量檢測試劑盒產品說明書[詳細]

  2015-05-04 00:00

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• 細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產品說明書

  細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑盒產品說明書主要用途細胞色素P450亞酶1A2活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過甲氧基異酚唑脫甲基酶反應系統中甲氧基異酚唑轉化為羥基異吩唑酮后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶活性的權威而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品（動物、人體）或純化微粒體樣品細胞色素P450亞酶1A2的總活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。技術背景細胞色素P450亞酶1A2，簡稱為CYP1A2，是肝細胞微粒體復合功能氧化酶系統的成員之一，也是芳香族碳氫化合物加羥基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成員之一。在人體肝臟里占P450酶系15％。與CYP1A1高度同源，特別是在外顯子2、4、5和6。CYP1A2由多個多態性變體，Z常見的是：1A和1F，與kafeiyin代謝和遲發性皮膚卟啉癥（porphyriacutaneatarda）相關。CYP1A2的作用在于體內外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）,以及脂類合成包括膽固醇和類固醇。芳香族碳氫化合物誘導CYP1A2的表達。甲氧基異酚唑脫甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是細胞色素P450亞酶1A2的診斷標記，其基于MROD選擇性催化細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基異酚唑脫甲基酶的催化下，轉化為羥基異吩唑酮（resorufin）后熒光峰值的變化（激發波長530nm，散發波長590nm），來定量測定細胞色素P450亞酶1A2的活性。甲氧基異酚唑脫甲基酶反應系統為：產品內容緩沖液（ReagentA）毫升反應液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升標準液（ReagentD）微升產品說明書1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和標準液（ReagentD）避免光照，有效保證6月用戶自備1.5毫升離心管：用于標準樣品操作的容器恒溫水槽：用于孵育反應比色皿或酶標板：用于反應和比色的容器熒光分光光度儀或酶標儀：用于熒光分析實驗步驟實驗開始前，將－20℃冰箱里的試劑置入冰槽里融化。然后進行下列操作。一、測定準備1．準備好待測樣品（例如細胞裂解萃取液或微粒體樣品等），置于冰槽里2．設定好熒光分光光度儀（溫度為37℃）：激發波長530nm，散發波長590nm，并置零3．準備好5個1.5毫升離心管，標記為1至5號管4．加入xx微升緩沖液（ReagentA）到1號管5．分別加入xx微升緩沖液（ReagentA）到2至5號管6．移取xx微升標準液（ReagentD）到1號管，混勻7．小心移取xx微升1號管稀釋的標準液（ReagentD）到2號管，混勻8．小心移取xx微升2號管稀釋的標準液（ReagentD）到3號管，混勻9．小心移取xx微升3號管稀釋的標準液（ReagentD）到4號管，混勻10．將1至5號管放進冰槽里備用，避免光照；標準管濃度見下表管號緩沖液（ReagentA）標準液（ReagentD）標準羥基異吩唑酮濃度1微升微升納摩爾/升2微升微升1號管納摩爾/升3微升微升2號管納摩爾/升4微升微升3號管納摩爾/升5微升00二、標準曲線測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的標準液5．上下傾倒數次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進熒光分光光度儀檢測獲得相對熒光讀數8．重復實驗步驟1至7四次9．構建標準曲線：縱座標（Y軸）為相對熒光單位；橫座標（X軸）為標準羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）三、樣品測定1．移取xx微升緩沖液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反應液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）5．上下傾倒數次，混勻6．在37℃溫度下孵育10分鐘7．即刻放進熒光分光光度儀檢測：獲得相關熒光讀數8．（選擇步驟）重復實驗步驟1至7，測讀新的樣品9．根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度四、計算樣品活性[根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數]÷10（分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘五、酶標板測定1．在96孔酶標板上做好相應標記：標準樣品和待測樣品2．分別移取xx微升緩沖液（ReagentA）到相應孔中3．分別加入xx微升反應液（ReagentB）4．分別加入xx微升底物液（ReagentC）5．分別加入xx微升上述配制的標準液或待測樣品（20微克微粒體蛋白或100微克細胞裂解萃取液蛋白）（注意：樣品須清澈）6．輕輕搖動96孔酶標板7．在37℃溫度下孵育10分鐘8．即刻放進熒光酶標儀檢測：獲得相對熒光讀數9．構建標準曲線：縱座標（Y軸）為相對熒光單位；橫座標（X軸）為標準羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）10．根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度11．活性計算：[根據標準曲線獲得樣品對應羥基異吩唑酮濃度（納摩爾/升）X樣品稀釋倍數]÷xx（反應時間；分鐘）]＝皮摩爾/毫升/分鐘÷（樣品蛋白濃度）毫克/毫升＝皮摩爾/毫克/分鐘注意事項1．本產品為25次（比色皿）或85次（酶標板）操作，包括標準液2．操作時，須戴手套3．系統操作過程中，標準液測定只需1次4．樣品須澄清，至關重要（本公司提供細胞可溶性總蛋白質制備試劑盒30002.1）5．孵育反應完成后即刻進行熒光測定6．如果酶活性過低，可以增加反應時間至30分鐘7．熒光測定后，比色皿須清洗徹底8．建議待測樣本為微粒體，其蛋白濃度為20微克/100微升；待測樣本為細胞裂解懸液，其蛋白濃度為100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白質濃度定量試劑盒30030.1）9．如果待測樣品濃度過高或過低，可以調整樣品濃度通常人體細胞微粒體細胞色素P450亞酶1A2活性濃度為：200－600皮摩爾/分鐘/毫克蛋白11．細胞色素P450亞酶CYP1A2單位活性定義為：在37℃，pH7.5條件下，每分鐘內能夠轉化1納摩爾甲氧基異酚唑至羥基異吩唑酮所需的酶量作為一個活性單位12．本公司提供系列毒理學檢測試劑產品質量標準1．本產品經鑒定性能穩定2．本產品經鑒定檢測敏感[詳細]

  2018-11-18 10:00

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  主要用途細胞色素P450酶系（CYP-ECOD）總活性熒光定量檢測試劑是一種旨在通過乙氧基香豆素脫乙基酶反應系統中乙氧基香豆素轉化為羥基香豆素后熒光峰值的變化，即采用熒光法來測定樣品中酶系活性的權威而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞或組織裂解萃取液樣品（動物、人體）或純化微粒體樣品細胞色素P450酶系的總活性檢測。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定。技術背景細胞色素P450酶是肝細胞微粒體復合功能單加氧化酶系統的總稱。其分成五十多個亞酶：CYP1至CYP51。作用在于體內外源化合物（xenobiotics），包括藥物、致癌劑、化學污染物的氧化代謝，即單加氧化作用（monooxygenation）和羥化作用（hydroxylation）。乙氧基香豆素脫乙基酶（7-ethoxycoumarinO-deethylase；ECOD）的活性是細胞色素P450酶系的診斷標記，其基于ECOD廣泛性催化細胞色素P450亞酶的活性。乙氧基香豆素（7-ethoxycoumarin）在乙氧基香豆素脫乙基酶的催化下，轉化為羥基香豆素（7-hydroxycoumarin）后熒光峰值的變化（激發波長368nm，散發波長456nm），來定量測定細胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脫乙基酶反應系統為：[詳細]

  2018-11-18 10:00

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