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FH-R16-大鼠心臟纖維原細胞說明書
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FH-R16-大鼠心臟纖維原細胞說明書
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小鼠心臟成纖維細胞說明書
- 小鼠心臟成纖維細胞說明書1、組織來源:小鼠乳鼠2、產品規格:25cm2培養瓶3、細胞簡介:小鼠心臟成纖維細胞分離自正常大鼠心臟組織,細胞呈梭型、多邊形等不規則形狀。體外培養的小鼠心臟成纖維細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。本公司生產的小鼠心臟成纖維細胞采用酶解法制備而來,細胞總量約為1×106個/瓶,細胞純度可達85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。二、使用方法客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。1、取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置6-8小時,以穩定細胞狀態;2、待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養;3、細胞傳代(1)吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;(2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,37℃溫浴1-2min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養液終止消化;(3)用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5ml,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;(4)待細胞完全貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。(備注:由于實驗所用試劑與操作環境的不同,以上方法供各實驗室參考。)三、注意事項1、培養基于4℃條件下可保存3-6個月;2、在細胞培養過程中,請注意保持無菌操作;3、傳代培養過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態;4、該細胞只可用于科研。[詳細]
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2024-10-03 20:19
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大鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒使用說明書
- 大鼠降鈣素原(PCT)試劑盒(ELISA)使用說明書l本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠降鈣素原(PCT)的含量。l有效期:6個月l保存條件:2-8℃l本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠降鈣素原(PCT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠降鈣素原(PCT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.組織勻漿:用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。Z后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。4.細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響Z后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。標本處理1.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。2.實驗前應預測標本含量,如果標本濃度過高,應對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。3.若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預實驗驗證其有效性,并注意留存樣本。4.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。5.若樣本為細胞培養上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。6.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。7.建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。需要而未提供的試劑和器材酶標儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱蒸餾水或去離子水試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板8孔×12條8孔×6條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無備注:1.標準品濃度依次為:800、400、200、100、50、0pg/mL2.經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過Zda標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。注意事項嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。在儲存和溫育時避免強光直接照射。平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。不能使用過期產品。如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。試劑準備試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。實驗結果計算以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。試劑盒性能1.檢測范圍:25pg/mL800pg/mL。2.靈敏度:Zdi檢測濃度小于1.0pg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。4.重復性:板內變異系數小于10%,板間變異系數小于15%。說明1.由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行全面的鑒定與分析,本產品可能存在一定的質量技術風險。2.Z終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關,請務必準備充足的標本備份。3.不同批次的同一產品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據試劑盒內說明書進行實驗操作,網站電子版說明書僅作參考。4.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到**的檢測結果。問題解答若實驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留所用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后聯系我公司技術支持為您解決問題。同時您也可以參考以下資料:問題可能原因解決方案標準曲線差吸取及洗滌不充分充分的吸取及洗滌移液不極ng確檢查和校正移液器精密度低洗滌不充分按說明書要求充分洗滌和浸泡混勻不充分和吸取試劑不足充分混勻和吸取試劑重復利用吸頭、容器和覆膜使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜加樣不極ng確檢查和校正移液器O.D值低每孔加的試劑量不極ng確校正移液器,極ng確加入試劑溫育時間不正確保證充足的溫育時間溫育溫度不正確試劑要平衡至室溫并保證準確的溫育溫度酶標記物或底物失效通過混合酶標記物和底物,顏色應迅速顯現來檢查沒有加入終止液按照說明書實驗操作步驟加入終止液超出讀數時間讀數在說明書推薦的讀數時間內讀數樣本值不正確的樣本儲存方式正確儲存樣本,使用新鮮樣本進行實驗不正確的樣本收集和處理方法采取正確的樣本收集和處理方法待測物質在樣本中含量低使用新鮮樣本,重復實驗[詳細]
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2018-11-16 10:01
產品樣冊
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大鼠成纖維生長因子(FGF)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網址:http://www.westang.com大鼠成纖維生長因子(FGF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養上清液和其它生物體液內)原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠FGF-basic單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的FGF-basic與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠FGF-basic,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,FGF-basic濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中FGF-basic濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):40ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成40ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入40ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。結果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據樣品OD值在該曲線圖上查出相應FGF-basic含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的FGF-basic檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠FGF-basic。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內、板見變異系數均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
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大鼠ELISA試劑盒包皮成纖維的說明書
- 大鼠ELISA試劑盒細胞生長特性人包皮成纖維細胞HFF細胞貼壁生長細胞特種特性從新生兒包皮中分離建立,可用作飼養層細胞,用于支持胚胎干細胞的生長或維持胚胎干細胞的未分化狀態。培養基DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)血清10%FBS 細胞傳代方法1:2傳代;3~4天1次細胞傳代情況P18細胞凍存條件基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 支原體檢測陰性A51805CCR6/CD196細胞表面趨化因子受體6抗體0.1mlA51806CXCR6細胞表面趨化因子受體6抗體0.1mlA51807CCR7/CD197人包皮成纖維細胞HFF細胞細胞表面趨化因子受體7抗體0.1mlA51808CXCL10CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體0.1mlA51809CXCR7/RDC1細胞表面趨化因子受體7抗體0.1mlA51810CCR8細胞表面趨化因子受體8抗體0.1mlA51811CCR9細胞表面趨化因子受體9抗體0.1mlA51812CCL28/MEC粘膜相關上皮趨化因子28抗體0.1mlA51813CCR10人包皮成纖維細胞HFF細胞細胞表面趨化因子受體10抗體0.1mlA51814CCRK細胞周期相關激酶抗體0.1mlA51815CD10/CALLA/NeprilysinCD10抗體0.1mlA51816CD105/EndoglinCD105抗體0.1mlA51817cIAP1/RNF48凋亡YZ因子1抗體0.2mlA51818CD105/EndoglinCD105抗體0.1mlA51819API2凋亡YZ因子2抗體0.2mlA51820TRAK1驅動蛋白結合蛋白1抗體0.2ml大鼠ELISA試劑盒A51821CD117/c-kit/SCFR干細胞生長因子受體/細胞表面分化抗原抗體0.1mlA51822phospho-c-kit(Tyr936)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51823Phospho-c-Kit(Tyr703)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51824Phospho-c-Kit(Tyr721)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51825Phospho-c-Kit(Ser741)磷酸化原癌基因c-kit抗體0.1mlA51826CD133antigen造血干細胞抗原CD133抗體0.1ml[詳細]
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2018-09-19 10:00
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FH0101-人原髓細胞白血病細胞;HL-60
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