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  yangle406 2017-06-05 00:00:00

  大概這樣是可以的： 實(shí)驗(yàn)十一 DNA的粗提取與鑒定 實(shí)驗(yàn)原理 1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。 2、用冷酒精提取出含雜質(zhì)較少的DNA。 3、DNA在沸水浴時(shí)被二苯胺染成藍(lán)色。 方法步驟： 1、提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)：順時(shí)針方向攪拌，稍快，稍重。 5 min 2、溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA 3、析出含DNA的黏稠物：蒸餾水300mL，逆時(shí)針方向攪拌，緩慢 4、過濾：取黏稠物 5、再溶解：順時(shí)針方向攪拌，較慢。3 min 6、過濾：取濾液。 7、提取出含雜質(zhì)較少的DNA，逆時(shí)針方向攪拌，稍慢。5 min 8、DNA的鑒定：沸水浴5min（（1）無變化（2）藍(lán)色） 上節(jié)課我們通過幾個驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，證明了DNA是主要的遺傳物質(zhì)。那么DNA是什么樣的物質(zhì)呢？今天我們就通過實(shí)驗(yàn)將它提取出來，進(jìn)行觀察和鑒定。 通過預(yù)習(xí)，我們知道選用雞血細(xì)胞液作為實(shí)驗(yàn)材料。在制備雞血細(xì)胞液時(shí)，所用的檸檬酸鈉有防止血液凝固的作用。　　 制備過程中，一定要用剛宰殺的雞的新鮮血，并且要與抗凝劑充分混合，防止凝血。我們采用靜置一天的方法，獲得雞血細(xì)胞液。 大家在動手做實(shí)驗(yàn)之前先要明確幾個需要注意的問題。 1、要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)的方法步驟去操作。 2、實(shí)驗(yàn)中有多個步驟都要用玻璃棒進(jìn)行攪拌，使用時(shí)玻璃棒不要碰到燒杯底，在不同的步驟中玻璃棒的用法不同，每一步的用法參照黑板上的指導(dǎo)去操作。 3、在DNA的鑒定中，所用的二苯胺是一種有毒性的試劑，大家在使用時(shí)注意不要讓藥液接觸到皮膚或身體的其他部位，也不要近距離觀察。 下面在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過程中，要思考每一操作步驟要達(dá)到什么目的。 在進(jìn)行步驟1時(shí)，利用攪拌的5分鐘，做如下提問： 為什么要加蒸餾水？加入蒸餾水后細(xì)胞將會怎樣？ （讓細(xì)胞內(nèi)溶液的濃度大于周圍溶液的濃度，細(xì)胞會吸水以至脹破） 為什么要用力攪拌？ （可以加速血細(xì)胞和細(xì)胞核的破裂） 所以下一步驟過濾將濾去的是細(xì)胞膜和核膜等物質(zhì)。 在進(jìn)行步驟3時(shí)，要向全班明確：這一步驟是這個實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵，注意加蒸餾水的方法和使用玻璃棒的方法，千萬不能太快太猛，防止打碎DNA。 觀察濾取出來的黏稠物的顏色。 有的同學(xué)提取的黏稠物較少，原因可能是在溶解DNA時(shí)不充分，也可能是析出黏稠物時(shí)攪拌的快了。 將黏稠物再溶解時(shí)一定要充分，多攪拌。以免有DNA損失。 加入冷酒精時(shí)動作要慢。 當(dāng)玻璃棒上出現(xiàn)絲狀物纏繞時(shí)，繼續(xù)慢慢攪拌。至不再增加時(shí)，取出吸干上面的水分。仔細(xì)觀察絲狀物呈什么顏色？（黃色） 這些絲狀物要用二苯胺鑒定。使用二苯胺時(shí)要注意不要接觸到藥液。進(jìn)行沸水浴時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室較為通風(fēng)的地方集體進(jìn)行。 利用沸水浴的5 min。 步驟3中加入蒸餾水的目的？與步驟1有什么區(qū)別？ （步驟3中加蒸餾水是使NaCl溶液的濃度逐漸降至0．14mol／L，使DNA的黏稠物析出。而步驟1加蒸餾水是為了讓細(xì)胞吸水脹破） 步驟7為什么要加50mL的冷酒精？ （因?yàn)镈NA不溶于冷酒精，而其他物質(zhì)可以溶解在酒精中，使含雜質(zhì)較少的DNA絲狀物可以析出。懸浮于溶液中） 現(xiàn)在大家從水浴鍋中拿出試管，比較兩個試管中溶液的顏色有什么不同？ （有絲狀物的試管變成藍(lán)色，另一試管還是原來顏色） 這一鑒定結(jié)果說明什么問題？ （提取出的絲狀物是DNA） 那么你看到的絲狀物的粗細(xì)是不是DNA分子的直徑呢？ （不是。DNA分子直徑只有2nm。絲狀物是多個DNA分子聚在一起形成的） 下面請同學(xué)們將實(shí)驗(yàn)用具，按原樣擺放整齊，實(shí)驗(yàn)桌要保持清潔。 今天我們通過實(shí)驗(yàn)將DNA提取出來進(jìn)行了觀察和鑒定，那么DNA的化學(xué)組成，分子結(jié)構(gòu)和復(fù)制是怎樣的？我們下節(jié)課再繼續(xù)研究。 希望可以幫到你~~

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