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  Ameiy2011 2016-12-15 00:00:00

  分離蛋白質混合物的各種方法主要是根據蛋白質在溶液中的以下性質：1）分子大小；2）溶解度；3）電荷；4）吸附性質；5）對其它分子的生物學親和力等進行分離. 常見的分離提純蛋白質的方法有：1、鹽析與有機溶劑沉淀：在蛋白質溶液中加入大量中性鹽，以破壞蛋白質的膠體性質，使蛋白質從溶液中沉淀析出，稱為鹽析.常用的中性鹽有：硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等.鹽析時，溶液的pH在蛋白質的等電點處效果Z好.凡能與水以任意比例混合的有機溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白質沉淀.2、電泳法：蛋白質分子在高于或低于其pI的溶液中帶凈的負或正電荷，因此在電場中可以移動.電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質分子所帶電荷量以及分子大小.3、透析法：利用透析袋膜的超濾性質，可將大分子物質與小分子物質分離開.4、層析法：利用混合物中各組分理化性質的差異，在相互接觸的兩相（固定相與流動相）之間的分布不同而進行分離.主要有離子交換層析，凝膠層析，吸附層析及親和層析等，其中凝膠層析可用于測定蛋白質的分子量.5、分子篩：又稱凝膠過濾法，蛋白質溶液加于柱之頂部，任其往下滲漏，小分子蛋白質進入孔內，因而在柱中滯留時間較長，大分子蛋白質不能進入孔內而徑直流出，因此不同大小的蛋白質得以分離.6、超速離心：利用物質密度的不同，經超速離心后，分布于不同的液層而分離.超速離心也可用來測定蛋白質的分子量，蛋白質的分子量與其沉降系數S成正比.

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