求解答:用圓二色光譜儀過程中遇到的問題
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我用日本產的Jasco J-810圓二色光譜儀測一個多肽的構象時,溶解多肽的緩沖液為PBS(PB中加了0.55%的NaCl),CD檢測的波長范圍為:190nm-250nm,結果發現在190nm-195nm之間的電壓迅速升高(電壓從195nm-250nm穩定),到190nm時電壓達到900多,同時190nm-195nm這個波長范圍... 我用日本產的Jasco J-810圓二色光譜儀測一個多肽的構象時,溶解多肽的緩沖液為PBS(PB中加了0.55%的NaCl),CD檢測的波長范圍為:190nm-250nm,結果發現在190nm-195nm之間的電壓迅速升高(電壓從195nm-250nm穩定),到190nm時電壓達到900多,同時190nm-195nm這個波長范圍內的譜圖也非常亂,也扣除了緩沖液(空白對照),但就是沒法重復出來.另外,測緩沖液(不加多肽)時,也發現在190nm-195nm之間的電壓迅速升高(電壓從195nm-250nm穩定),也是190nm-195nm這個波長范圍內的譜圖非常亂.我現在就是想知道這段波長內譜圖的走向,請問能有什么辦法解決以上問題呢?謝謝 展開
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- 曇花一笑250 2014-09-04 00:00:00
- 還有命運的交會。 但愿戲劇性的夏天 卻是永遠朝著完全的空無, 我會夢見在月亮占上風之前, 那么他,我所尋覓者,我就是了 既然水為懷云設景,怡情的中意飛揚哈哈
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圓二色光譜儀校準用物質
圓二色光譜儀(CD)作為一種常用的光譜分析工具,廣泛應用于蛋白質、核酸等生物大分子的結構研究、藥物分析、環境監測等領域。為了確保其數據的準確性和可靠性,定期對光譜儀進行校準是必不可少的環節。圓二色光譜儀的校準通常依賴于特定的校準物質,這些物質可以為儀器的性能提供基準,確保實驗結果的高效性和精確性。本文將詳細探討圓二色光譜儀校準用物質的重要性,并介紹幾種常用的校準物質,幫助科研人員和實驗室更好地理解和應用這些工具。
圓二色光譜儀的工作原理基于分子對不同偏振光的吸收能力差異,這一特性對于分子結構的分析至關重要。由于光譜儀的光源、檢測器以及儀器的其他部分可能隨時間變化,校準過程就顯得尤為重要。通過使用特定的校準物質,可以幫助儀器恢復到佳的工作狀態,確保測得的數據符合科學標準。
在圓二色光譜儀的校準過程中,常用的校準物質主要包括具有已知光學活性的分子,特別是能夠提供標準圓二色光譜的化合物。這些物質的選擇不僅要考慮其穩定性和可重復性,還要確保它們在實驗條件下能夠表現出穩定的光學性質。以下是幾種常見的圓二色光譜儀校準用物質:
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D-葡萄糖:D-葡萄糖是常用的校準標準物質,它是一種具有明顯圓二色特性的單糖,能夠為光譜儀提供穩定、可靠的校準數據。D-葡萄糖在紫外區的圓二色光譜線較為清晰,且具有良好的重現性,使其成為理想的校準物質。
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雙酚A(Bisphenol A, BPA):雙酚A作為一種具有較強圓二色信號的化合物,常用于校準光譜儀的紫外-可見區(UV-Vis)響應。雙酚A的光譜特性被廣泛研究,其吸收峰和圓二色特性可作為光譜儀性能驗證的參考。
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蛋白質標準樣品:如牛血清白蛋白(BSA)等蛋白質標準樣品也常用于校準圓二色光譜儀。這些蛋白質分子具有復雜的二級結構,能夠提供不同波長范圍的圓二色光譜信號。通過使用標準蛋白質樣品,可以校準儀器在不同濃度下的測量誤差,特別是在生物大分子的研究中,校準蛋白質樣品對于準確評估蛋白質構象變化具有重要作用。
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L-天冬氨酸:作為氨基酸類化合物,L-天冬氨酸在紫外區的圓二色光譜特性較為突出。由于其在紫外區有清晰的吸收帶,它也常用于圓二色光譜儀的標準化操作中,幫助校準和驗證儀器的波長準確度。
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水溶液的光學活性化合物:例如,水溶液中的某些有機化合物,具有良好的光學活性并能夠在多個波段產生圓二色光譜信號,這類化合物也常用于圓二色光譜儀的校準。
通過使用這些校準物質,圓二色光譜儀能夠在不同條件下保持良好的性能,提供高精度的測量數據。尤其是在進行復雜分子分析時,儀器的準確度直接影響到結果的可靠性和科學意義。因此,選擇合適的校準物質是提高圓二色光譜儀性能的關鍵之一。
圓二色光譜儀的校準工作是保證儀器度和數據可信度的重要步驟。通過選擇具有已知光學活性的校準物質,科研人員可以確保儀器處于佳狀態,為后續的實驗數據分析提供強有力的支持。
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