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- 大大拿0 2017-01-09 00:00:00
- 融膠液,可以使瓊脂糖凝膠完全融化。同時采用了一種新型的離子交換柱,在特定條件下,使DNA能在離心過柱的瞬間,結合到DNA純化柱上,在一定條件下又能將DNA充分洗脫,從而實現DNA的快速純化。 1.低熔點瓊脂糖挖塊法:在瓊脂糖主鏈導入羥乙基修飾后,其凝固點溫度降為30度,熔化溫度為65度,這一溫度低于絕大多數雙鏈DNA的變性溫度,利用這類凝膠純度高熔點低的特點,在水平式瓊脂糖凝膠電泳上,使所需的目的DNA片段轉移到低熔點瓊脂糖凝膠內,經65度水浴5-10分鐘,使之溶化,用飽和酚抽提,就可以分離到所需DNA. 2.玻璃棉離心法:利用玻璃棉為支持介質,通過離心,使含有目的基因DNA片段的溶液從凝膠中析出,經離心管底部的小孔流入套管,再用酚純化、乙醇沉淀,獲得所需的目的基因片段。 3.透析袋電泳法:與常規瓊脂糖電泳原理相同,將含有目的基因片段的凝膠切下來,裝入透析袋中,同時裝入電泳緩沖液,再按常規電泳方法電泳,讓DNA在透析袋內走出凝膠塊,再純化緩沖液中的DNA片段。 4.DEAE纖維素紙片回收法:將這種紙片插入到瓊脂糖凝膠,其位置正好在回收的DNA條帶的前方,使DNA向紙片方向泳動并吸附在紙片上,然后把紙片取出再用洗脫液洗脫吸附的DNA
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