自從2018年HJ1001-2018水質總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定-酶底物法的環保標準發布以來 ，酶底物法封膜機(即“程控定量封口機”)就走進了人們的視野中。作為一種新的儀器設備，許多用戶都不太清楚它是怎么工作的，到底有什么作用，下面優爾普儀器就帶大家來認識一下酶底物法封膜機。

酶底物法封膜機簡介

酶底物法封膜機，又名程控定量封口機，可用來加熱密封51孔或者97孔酶底物法檢測定量盤，是環保新標準HJ1001-2018水質大腸菌群檢測-酶底物法中配套使用的儀器設備。

酶底物法封膜機的作用

要想知道酶底物法封膜機有什么作用，我們可以從酶底物法實驗操作步驟中了解到。

酶底物法檢測水質大腸菌群的原理是MPN法，實驗時，我們將待測水樣和酶底物檢測試劑加入到水樣取樣瓶中，輕輕搖勻至溶解，隨后將取樣瓶中的溶液倒入定量檢測盤中，然后把定量檢測盤放進封膜機，儀器會對定量檢測盤進行樣品隨機分配和加熱封口，至此，封膜機就完成了它的工作。

酶底物法是目前國內乃至國際上都在廣泛使用的大腸菌群檢測方法，檢測準確周期短，而且已經列入國標，可見該方法未來將逐漸取代多管發酵法、濾膜法等傳統方法，而酶底物法封膜機是應用酶底物法檢測水質大腸菌群污染程度的必備儀器，有水質大腸菌群檢測需求的實驗室應早作準備。

96孔板封膜機怎么選購呢，大家跟我來看：

一、96孔板封膜機熱封功能

96孔板熱封膜時通過175℃左右溫度（按客戶要求通常溫度調節80℃-200℃）加熱+壓力黏附于封膜板上，快速升溫加熱，60秒內升至100℃，3秒內熱封膜工作完成，切記加熱封膜的時間過長或過短。加熱封膜等待時間根據不同的鋁膜來設置，通常膜加熱時間只需3秒鐘，加熱封膜過長容易引起鋁膜融合過度變形、粘連，過短容易引起鋁膜未融合，當然通過設置合適的時長這些問題是不存在的。合理設計實時顯示封板溫度。通過熱封膜來防止各種微孔板在檢測過程中液體的揮（蒸）發、泄漏引起樣品損失及空間交叉污染的封膜儀器。密封無污染操作，加熱穩定，封板牢固，效果均勻一致，全程自動化熱封封膜。方便貯存及運輸。適用普通可撕膜、膠封膜、熱封膜、可穿刺熱封膜、光學熱封膜等。

二、96孔板冷封功能

96孔板冷封膜時，關閉加熱溫度，利用冷封壓力來完成96孔板冷封膜工作。從而起來防泄漏，防污染，防揮（蒸）發效果。

三、八連管PCR壓蓋功能

冷封壓蓋功能是專業為八連管PCR設計，通過恒定平穩壓力將PCR蓋平整壓下，解決了人工壓蓋不嚴密，漏液、易揮發 現象造成的交叉污染問題以及效果不均導致的實驗重復性差問題，更解決了壓蓋難壓蓋慢現實問題。與傳統的手工壓蓋相比，自動檢測適配器高度，適配0.1ml、0.2ml八連管PCR可一次性完成12個八聯管PCR壓蓋工作，實時顯示壓蓋時間，均勻的壓力壓蓋牢固，效果均勻一致。PLC程序控制,全彩觸摸屏人機界面控制面板，工作穩定可靠，工作過程實時顯示。

知道怎么選購了嗎？博一生物的半自動封膜儀熱封和冷封壓蓋儀優勢如下：

1、熱封和冷封壓蓋功能兼容，用戶可自由設置選擇使用。

2、外觀靈巧設計美觀大方，體積小功能齊全。

3、軟件設計采用彩屏人機界面易懂易學易操作。可自帶產品參數。

4、快速升溫60秒內由室溫升至100℃。精準控溫且封板溫度可調節。

5、封板根據不同深孔板自動調整壓力，可適配各種類型的微孔板和PCR管。

6、系統自帶計數，封膜數量自動統計，隨時清零功能。

7、獨立加熱開關，可滿足冷封、熱封、PCR壓蓋需求。

8、微處理器控溫，精度準確，熱封板均衡結構確保封膜效果一致性。

9、熱封板溫度、熱封時間精確可調，調節幅度分別為1℃/0.1秒

10、自動待機功能節能、低碳。30分鐘后儀器自動轉換待機模式，儀器溫度自動降低到60℃，60分鐘后儀器自動轉換“深度睡眠"模式，以達到節能環保效果。觸摸屏任意位置，儀器恢復工作狀態；

11、安裝簡便，不需要壓縮空氣。

12、可配備不同類型的適配器，使得適配的耗材更多樣化，儀器的應用更廣泛。

溶解氧膜探針有什么作用呢？

　　水質檢測儀的膜探針可用于測量和研究改變水溶液和空氣中氧分子(O2)濃度(溫度，攪拌，酶促反應，呼吸作用，光合作用等)的因子，而水質檢測儀的這種探針設計一般用于10°C至40°C溫度范圍內的水生環境和空氣中。在此溫度范圍內，傳感器不但要經過校準，還需要提供精確的空氣值。該傳感器具有由鉑陰極和被KCl電解質溶液包圍的銀陽極組成的極譜探針。探頭測量探頭內化學反應產生的電流。這種化學反應涉及O2分子的還原和陽極的銀原子的氧化。0.7伏的電壓穿過電極以促進化學反應。當探針置于水性介質中時，存在于該溶液中的O2分子通過水溶液的薄硅氧烷膜擴散到溶液電解質中。膜是半滲透性的，允許O2分子，但阻止其他分子的通過，這可能干擾所測量的化學反應。化學氧化還原反應釋放電子通過探針的電路產生電流。由于通過膜的擴散速率與樣品溶液中的O2濃度成正比，所以測量的電流將用于確定溶液中的O2濃度。

  96PCR板封膜，一般使用市場通用的透明膜、壓敏膜，需熱封才能達到密封不泄漏無污染效果，溫度設置110-120℃左右效果最為合適，根據膜來靈活設置合適溫度。
誤區1：96PCR板封膜需加熱熱封才能達到效果，而并非是冷封。冷封不嚴實會造成PCR反應液熱蒸發，影響反應溫度的準確控制及反應成份的濃度，同時也成為一個污染源。
   96PCR板封膜是利用儀器的電加熱，使塑料薄膜封口部位受熱變為粘流狀態，并借助一定壓力，使兩層薄膜熔合為一體，冷卻后保持一定強度。影響熱封效果的因素包括熱封時間、熱封壓力和熱封溫度。
熱封溫度：作用是使粘合膜層加熱到一個比較理想的粘流狀態。
熱封壓力：作用是使已處于粘流狀態的薄膜在封口界面間產生有效的高分子鏈段相互滲透、擴散現象，也使高分子間距離接近到可以產生分子間作用力的結果。
熱封時間：指薄膜停留在封板下的時間，熱封時間決定了熱封設備的生產效率。
確定好溫度、壓力和時間的上下限后再到相應熱封設備上調整相關參數。
誤區2：自動識別，壓力時間無可調整空間。 局限性太大，儀器不能完全靈活運用適配市場上不同規格的各種耗材。
疫情形式依然嚴峻，科學應對是關鍵。博一封膜壓蓋一體機，具備熱封、冷封、壓蓋功能兼容，用戶可自由設置選擇使用。靈活運用適配市場上不同規格的各種耗材。用戶購買時須了解。

　　菌落總數(Totalcoliforms)是判定水質被細菌污染程度的重要指標之一，其測定方法也有一定的標準。平皿計數法是早期傳統的水中菌落總數標準檢測方法，其應用研究也比較多，如錢冬梅應用平皿計數法測定了生活飲用水中的菌落總數。這種方法實驗步驟較為繁瑣，對操作人員的專業水平要求比較高，不適用于應急快速檢測，無法對水的衛生狀況做出快速評價。

　　酶底物法是近些年來新興的水中菌落總數檢測方法，操作簡便，結果易判斷，適用于快速檢測。但不少用戶對此種方法存疑，不知道這種方法出來的檢測結果是否科學準確，下面優爾普就以平皿計數法的檢測結果為準，用酶底物法程控定量封口機進行實驗檢測對比。

立科酶底物法程控定量封口機

酶底物法快速檢測水中菌落總數實驗

一、實驗操作部分

1、實驗原理

　　酶底物法使用的復合酶技術培養基包含多種獨特的酶物質，每種酶物質都針對不同的細菌酶設計(包含普遍的水介傳播細菌)，所有的酶底物被分解時均產生相同的信號。在檢測菌落總數時，這個信號顯示為365納米紫外4O城鎮供水NO.22013燈下的熒光。

2、材料與試劑

　　立科定量盤、lmL移液管或移液槍、10mL移液管或移液槍、培養箱(35±1)、6瓦366FIITI紫外燈、紫外燈箱(23cmx30onx17on1)、無菌水。

3、方法步驟

酶底物法檢測方法操作步驟

(1)首先向100mL裝有固體培養基的瓶中加入無菌水至刻度，搖勻，制成液體培養基，然后放置在冰箱中保存，使用有效期為5天。見圖1。

(2)取1mL水樣及9mL液體培養基倒入立科定量盤中。見圖2。

(3)將定量盤蓋好，在水平桌面上旋動將所有水樣分配到定量盤的孔中(孔中的氣泡不會影響結果)。見圖3。

(4)將定量盤豎起呈垂直90度，將多余的水樣由盤內海綿吸收。見圖4。

(5)將定量盤緩慢翻轉過來，于培養箱中(35±0.5)培養48h(若結果為可疑陽性則延長培養時間至72h)。見圖5。

(6)計數：培養完成后將培養盤蓋打開，用紫外燈在定量盤上方13on處照射，數顯熒光的孔數。對照MPN表得出結果。注意：海綿條顯熒光不必記錄在讀數范圍內。由于本方法的Zda檢測上限為738MPN/mL，如需稀釋時，將結果乘以稀釋倍數即為報告讀數(如稀釋l0倍時的操作為：加入0.1mL樣品和9.9mL液體培養基)。

二、結果與分析

1、盲樣比對實驗--T檢驗分析

　　選取三個水質檢測實驗室對比同一盲樣(標準試劑)進行酶底物法和平皿計數法比對試驗，具體試驗結果如圖。

EPA標準盲樣檢測結果

　　對比以上酶底物法和平皿計數法檢出共160個結果進行配對T檢驗，兩種方法的配對T檢驗結果如下表。

配對檢驗結果

　　標配比變量差值的T檢驗結果，Mean均值之間的差值為-1.78750，Std.Deviation差值的標準差16.10385，Std.ErrorMean差值的調準誤為1.80047，95%ConfidenceIntervaloftheDifference置信區間上下限為-5.37124和1.79624，t-valuet值為-0.993，df自由度為79，Sig(2-tailed)雙尾T檢驗的結果，獲得t值的概率P值為0.324，檢驗結果表明酶底物法和平皿計數法檢測結果沒有統計學意義上的差別(P<0.50)。

2、水樣檢測--線性回歸分析

　　采集地表水水樣進行檢測，為保證實驗結果的有效性和方便統計，要求檢測高、低濃度兩個水樣，同時，要求低濃度水樣的MPN值控制在50MPN/ml左右，高濃度水樣的MPN值控制在100MPN/ml左右，分別從國內9個地區采集水樣，試驗結果如圖。

實驗室水樣檢測結果

　　對以上9家實驗室用酶底物法和平皿計數法共1160個檢測結果進行線性回歸統計分析，兩種方法線性回歸分析見下表。

檢測結果線性回歸統計分析

　　從圖表中可知，標準化回歸系數Beta為0.95，表明兩組數據相關性較好，兩種方法的檢測結果具有可比性。檢驗結果P=0.00，均小于0.05，表明兩種方法在檢測菌落總數時沒有顯著差異性，具有等效性。此結果說明酶底物法的測定結果準確、可靠，可以替代平皿技術發作為水中菌落總數的測定方法。

　　從上述實驗可以看出，酶底物法快速檢測水中菌落總數的檢測結果與平皿計數法無統計學意義上的差別，是科學的、有效的、準確的，可以用作評價水質微生物污染的標準依據。酶底物法操作簡單，結果判讀容易、準確，無需稀釋即可檢測738個/1mL水樣，不僅適用于水源水、飲用水的檢測，還適用于應急檢測和污水檢測，易于推廣，可以較好的彌補傳統方法的不足。

PCR超薄透明封膜板本生生物公司供應：熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器，分光光度計。
型號：SR6190
品名：PCR超薄透明封膜板
規格：100張/盒
描述：PCR板封膜超薄透明
PCR超薄透明封膜板
保存條件：
室溫保存。
注意事項：
本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

PCR超薄透明封膜板推薦產品：10~200ul無菌盒裝吸嘴（PC材質）黃色96支/盒, 50盒/箱
10~200ul無菌盒裝吸嘴（PP材質）黃色96支/盒, 50盒/箱
200~1000ul無菌盒裝吸嘴（PC材質）藍色96支/盒, 50盒/箱
200~1000ul無菌盒裝吸嘴（PP材質）藍色96支/盒, 50盒/箱
0.5~10ul袋裝濾芯吸嘴透明1000支/包，10包/箱
10~100ul袋裝濾芯吸嘴黃色1000支/包，10包/箱
10~200ul袋裝濾芯吸嘴黃色1000支/包，10包/箱
200~1000ul袋裝濾芯吸嘴藍色1000支/包，10包/箱
24-125125ml無菌瓶 圓瓶 PET, 超清晰, 滅菌12支/箱
24-500500ml無菌瓶 圓瓶 PET, 超清晰, 滅菌12支/箱
24-10001000ml無菌瓶 圓瓶 PET, 超清晰, 滅菌12支/箱
24-10021000ml無菌瓶 方瓶 PET, 超清晰, 滅菌12支/箱
24-06060ml無菌瓶,方瓶 PP(聚丙烯）,滅菌25支/組,2組/箱
24-126125ml無菌瓶,方瓶 PP(聚丙烯）,滅菌25支/組,2組/箱
24-501500ml無菌瓶,方瓶 PP(聚丙烯）,滅菌25支/組,2組/箱
24-10011000ml無菌瓶,方瓶 PP(聚丙烯）,滅菌25支/組,2組/箱
試管/瓶蓋/工具
CG-SG1275圓底螺紋樣品管12*75mm，100/PK
CG-SG13100圓底螺紋樣品管13*100mm，100/PK
CG-SG16100圓底螺紋樣品管16*100mm，100/PK

產品優勢：本生生物代理實驗室耗材,PCR耗材品種全，可替代儀器原廠耗材，性價比高，質量穩定，對用戶可以節省實驗成本。
適應客戶：醫院檢驗科PCR實驗室，實驗室；第三方檢測機構，科研院所，大專院校，制藥廠，試劑生產廠家，疾控，檢驗檢疫。