正確操作人金黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)ELISA試劑盒

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)ELISA試劑盒以其敏感性高、特異性強、重復性好的優點，在科研中深受廣大，科研工作者的喜愛。

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素試劑盒檢測原理:

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被對稱性黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的對稱性黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)試劑盒呈正相關。用酶標儀在450nm  波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素試劑盒樣品收集、處理及保存方法:

　　1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　3、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘。

　　4、取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。

　　注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素試劑盒操作

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素試劑盒使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。

　　標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

　　人金黃色葡萄球菌腸毒素試劑盒：

　　1、靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為1.0 nmol/L。

　　2、特異性：不與其它細胞因子反應。

　　3、重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

　　正確操作人金黃色葡萄球菌腸毒素A(SEA)ELISA試劑盒,本生(天津)健康科技有限公司由具有行業背景和豐富市場經驗的業人士組成，于為生命科學研究域提供產品，為廣大科研工作者提供服務。   既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產型企業從小試、中試到規?；a各個階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。

食源性致病菌污染是乳制品安全問題的重要隱患之一。乳品中常見的食源性致病菌有金黃色葡萄球菌、沙門氏菌、阪崎腸桿菌等。目前乳品致病菌檢測以培養法為主，但此類方法操作較為繁瑣并耗時長，不能滿足檢測時效的需求。

在本期的推送中，探索了熒光定量PCR技術在乳品中金黃色葡萄球菌和沙門氏菌快速檢測方面的應用，并進行了大量驗證試驗、實際檢測，形成乳品中致病菌快速檢測創新體系，該創新體系可以實現金黃色葡萄菌和沙門氏菌24h內完成增菌和檢測?？s短了整體檢測時間，并降低了檢測成本，為進一步改良乳品中致病菌快速檢測提供了可參考的數據。

珀金埃爾默旗下的良潤生物研發出創新檢測體系，優化了樣品前處理過程，并引入了熒光定量PCR分子檢測技術，可以實現金黃色葡萄菌和沙門氏菌在24h內完成增菌和檢測。

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　　1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

　　2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

　　3、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘。

　　4、取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復冷凍。

　　注：標本溶血會影響測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

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　　標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到的結果。

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　　1、靈敏度：最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為1.0 nmol/L。

　　2、特異性：不與其它細胞因子反應。

　　3、重復性：板內、板間變異系數均小于10%。

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