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- 37292519700317 2017-02-02 00:00:00
- 用已知濃度的DNA樣本(通常是質粒)梯度稀釋成一系列的樣本。做實驗的時候,這些標準品和待測樣本加在同樣一塊96孔盤的不同孔內。一起做PCR。 標準品的熒光強度和已知的濃度作圖,可以得到一條標準曲線。而待測樣本的熒光強度測出以后,就可以在標準曲線上算出樣本濃度了。28S和18S核糖體RNA的帶非常亮而濃(其大小決定于用于抽提RNA的物種類型),上面一條帶的密度大約是下面一條帶的2倍。還有可能觀察到一個更小稍微擴散的帶,它由低分子量的RNA(tRNA和5S核糖體RNA)組成。在18S和28S核糖體帶之間可以看到一片彌散的EB染色物質,可能是由mRNA和其它異型RNA組成。RNA制備過程中如果出現DNA污染,將會在28S核糖體RNA帶的上面出現,即更高分子量的彌散遷移物質或者帶,RNA的降解表現為核糖體RNA帶的彌散。用數碼照相機拍下電泳結果。 ①反應體系 序號 反應物 劑量 1 逆轉錄buffer 2μl 2 上游引物 0.2μl 3 下游引物 0.2μl 4 dNTP 0.1μl 5 逆轉錄酶MMLV 0.5μl 6 DEPC水 5μl 7 RNA模版 2μl 8 總體積 10μl 輕彈管底將溶液混合,6000rpm短暫離心。
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