本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷。

牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒使用說明書

【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 試劑盒名稱】
牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒
【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 試劑盒用途】
定量牛血清、血漿及相關液體樣本中血管緊張素II(AngII)的含量
【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預先包被血管緊張素II(AngII)透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉化為藍色產物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中血管緊張素II(AngII)濃度呈正相關，450nm波長下測定OD值，根據標準品和樣品的OD值，計算樣本中血管緊張素II(AngII)含量。
【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 試劑盒組成】

備注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1、37℃恒溫箱

2. 標準規格酶標儀

3. 精密移液器及一次性吸頭

4. 蒸餾水

5. 一次性試管

6. 吸水紙

【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒操作步驟】
1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。
4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。
6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。
7、溫育：重復4的操作。
8、洗板：重復5的操作。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。
10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。
11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。
12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。最終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
3、樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。
【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
2、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
4、牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。
5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（0.1-200ng/ml范圍內），乘以總稀釋倍數即為樣本最終濃度。
6、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。
7、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。
8、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。
9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒操作程序總結】

　　小鼠內脂素/內臟脂肪素ELISA試劑盒說明書

　　【產品名稱】：小鼠內脂素/內臟脂肪素ELISA試劑盒

　　【實驗方法】：酶免法(ELISA)凡購買目錄本公司ELISA檢測試劑盒可提供免費代測服務。

　　【樣品類型】：標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。樣品采集：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存2個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

　　小鼠內脂素/內臟脂肪素ELISA試劑盒?標本收集注意事項：

　　1)在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。

　　2)我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后及時進行檢測。標本類型：標本必須為液體，不含沉淀，包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本，請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存，避免反復凍融。

　　小鼠內脂素/內臟脂肪素ELISA試劑盒?液體類標本：

　　包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

　　1)血清：

　　室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　2)血漿：

　　應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　3)尿液：

　　用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

　　4)細胞培養上清：

　　A、檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。

　　B、檢測細胞內的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　5)組織標本：

　　切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

　　操作步驟：參照說明書

　　靈敏度：具體請查看說明書

　　小鼠內脂素/內臟脂肪素ELISA試劑盒說明書我司由具有行業背景和豐富市場經驗的業人士組成，于為生命科學研究域提供產品，為廣大科研工作者提供服務。 既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝的特殊要求，也能滿足生產型企業從小試、中試到規模化生產各個階段的綜合需求。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。

牛大腸桿菌試劑盒(EC)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應：ELISA試劑盒,血清，熒光定量PCR耗材，移液器吸嘴，微量離心管，進口凍存管，細胞培養皿，培養板，培養瓶，吸頭，儀器及手套，色譜耗材，針頭過濾器。
貨號：BS-6684
中文名稱：牛大腸桿菌(EC)ELISA試劑盒
規格：96T/48T
保存條件及有效期：
1、試劑盒保存：2-8℃。
2、有效期：6個月.
檢測種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨、猴ELISA試劑盒等種屬。

牛大腸桿菌試劑盒(EC)ELISA檢測試劑盒ELISA試劑盒組成：
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個1 個
酶標包被板1×481×962-8℃保存
標準品：540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標準品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
牛大腸桿菌試劑盒(EC)ELISA檢測試劑盒

注：科研實驗專用。

小鼠肌脂蛋白（SLN）ELISA試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
4.5ng/L -180 ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中肌脂蛋白(SLN)含量。

實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠肌脂蛋白(SLN)水平。用純化的小鼠肌脂蛋白(SLN)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肌脂蛋白(SLN)，再與HRP標記的肌脂蛋白(SLN)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肌脂蛋白(SLN)呈正相。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠肌脂蛋白(SLN)濃度。 

小鼠肌脂蛋白(SLN)ELISA試劑盒組成 

標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
小鼠肌脂蛋白(SLN)ELISA試劑盒操作程序總結：

計算

    以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 

注意事項
1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．小鼠肌脂蛋白(SLN)ELISA試劑盒請每次測定的同時做標準曲線，zui好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。

小鼠肌脂蛋白（SLN）ELISA試劑盒使用說明書

保存條件及有效期
1．試劑盒保存：2-8℃。
2．有效期：6個月

　　人白介素23受體(IL-23R)ELISA試劑盒使用說明書

　　本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人白介素23受體(IL-23R)的含量。

　　有效期：6個月

　　保存條件：2-8℃

　　本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷

　　實驗原理:

　　試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人白介素23受體(IL-23R)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人白介素23受體(IL-23R)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，計算樣品濃度。

　　樣本處理及要求:

　　1. 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果)，稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶YZ劑)加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

　　4. 細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　注：標本溶血會影響檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

　　標本處理:

　　1. 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。

　　2. 實驗前應預測標本含量，如果標本濃度過高，應對標本進行稀釋，使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。標本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。

　　3. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進行預實驗驗證其有效性，并注意留存樣本。

　　4. 使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。

　　5. 若樣本為細胞培養上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細胞狀態、細胞數量、采樣時間等，所以可能存在檢測不出的情況。

　　6. 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。

　　7. 建議使用新鮮樣本，保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導致實驗結果偏差。

　　人白介素23受體(IL-23R)ELISA試劑盒注意事項:

　　1.嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

　　2.洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

　　3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

　　4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。

　　5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

　　6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。

　　7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

　　8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

　　9.不能使用過期產品。

　　10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

　　操作步驟:

　　1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

　　2. 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

　　3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

　　4. 除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

　　5. 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

　　6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

　　實驗結果計算

　　以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

　　試劑盒性能:

　　1. 檢測范圍：25 pg/mL – 800 pg/mL。

　　2. 靈敏度: 檢測濃度小于1.0 pg/mL。

　　3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

　　4. 重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。

　　人白介素23受體(IL-23R)ELISA試劑盒說明:

　　1. 由于現有條件及科學技術水平尚不能對所有供貨商提供的所有原料進行的鑒定與分析，本產品可能存在一定的質量技術風險。

　　2. ZZ的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關，請務必準備充足的標本備份。

　　3. 不同批次的同一產品可能會有少許差別，如：檢測限、靈敏度以及顯色時間等，請依據試劑盒內說明書進行實驗操作，網站電子版說明書僅作參考。

　　4. 只有全部使用本試劑盒配套試劑才能檢測效果，不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到的檢測結果。

　　本生生物公司供應：ELISA試劑盒,動物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養皿,培養板,培養瓶,進口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器等，詳詢18502669006。

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷。

雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒使用說明書

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 試劑盒名稱】

雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 試劑盒用途】

定量雞血清、血漿及相關液體樣本中凝血因子V(F5)的含量

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒檢測原理】

本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預先包被凝血因子V(F5)透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉化為藍色產物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中凝血因子V(F5)濃度呈正相關，450nm波長下測定OD值，根據標準品和樣品的OD值，計算樣本中凝血因子V(F5)含量。

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 試劑盒組成】

備注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒需要而未提供的試劑和器材】

1、37℃恒溫箱

2、 標準規格酶標儀

3、 精密移液器及一次性吸頭

4、 蒸餾水

5、 一次性試管

6、 吸水紙

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒操作步驟】

1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

7、溫育：重復4的操作。

8、洗板：重復5的操作。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。

11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。

12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。最終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 樣本要求】

1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

3、樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒注意事項】

1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

2、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。

4、牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。

5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（0.1-200ng/ml范圍內），乘以總稀釋倍數即為樣本最終濃度。

6、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。

7、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。

8、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。

9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒操作程序總結】

計算

本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷。

雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒使用說明書

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 試劑盒名稱】
雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒
【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 試劑盒用途】
定量雞血清、血漿及相關液體樣本中凝血因子V(F5)的含量
【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）。將標準品、待測樣本加入到預先包被凝血因子V(F5)透明酶標包被板中，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分，再加入酶標工作液，溫育足夠時間后，洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根過氧化物酶（HRP）催化下轉化為藍色產物，在酸的作用下變成黃色，顏色的深淺與樣品中凝血因子V(F5)濃度呈正相關，450nm波長下測定OD值，根據標準品和樣品的OD值，計算樣本中凝血因子V(F5)含量。
【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 試劑盒組成】

備注：標準品用標準品稀釋液依次稀釋為：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒需要而未提供的試劑和器材】
1、37℃恒溫箱

2. 標準規格酶標儀

3. 精密移液器及一次性吸頭

4. 蒸餾水

5. 一次性試管

6. 吸水紙

【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒操作步驟】
1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。
2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。
4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。
6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。
7、溫育：重復4的操作。
8、洗板：重復5的操作。
9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。
10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。
11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。
12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。
【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒 樣本要求】
1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因為疊氮鈉（NaN3）是辣根過氧化物酶（HRP）的抑制劑。
2、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。
3、樣本應充分離心，不得有溶血及顆粒。
【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒注意事項】
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
2、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。
4、牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。
5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（0.1-200ng/ml范圍內），乘以總稀釋倍數即為樣本終濃度。
6、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。
7、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。
8、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。
9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。
【雞凝血因子V(F5)ELISA檢測試劑盒操作程序總結】