求昆蟲(chóng)干樣品DNA提取方法
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由于樣品擱置時(shí)間較長(zhǎng),降解得很?chē)?yán)重,有沒(méi)有什么方法可以減輕降解? 就是在一般的實(shí)驗(yàn)室里,沒(méi)有試劑盒什么的。
全部評(píng)論(1條)
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- 一只小鳥(niǎo)5711 2011-03-09 00:00:00
- DNA樣本如存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng),都會(huì)有不同程度的降解,這個(gè)比較正常。如果降解比較厲害,則說(shuō)明樣本里含有DNA酶活性。對(duì)于已降解樣品,沒(méi)有什么太好的辦法,我能說(shuō)的就是把它們?nèi)拥舨灰昧耍⒄`時(shí)間。 對(duì)于即將提取的樣本,有如下幾點(diǎn)建議。1. 提取DNA時(shí)一定要加蛋白酶protease以及硫氰酸胍Guanidinium thiocyanate 使樣本中的蛋白質(zhì)失活。2. 萃取DNA時(shí)一定要將蛋白質(zhì)全部分離。3. 樣本置于-20°存放。4. 切記任何試劑盒提取的DNA都沒(méi)有傳統(tǒng)芬-氯仿法所提取的DNA純度高,所以若想收獲高質(zhì)量DNA樣本,請(qǐng)不要使用任何試劑盒,而用傳統(tǒng)方法提取。
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干樣品應(yīng)注意的問(wèn)題
首次測(cè)量樣品的*步就是決定在濕狀態(tài)下還是在干狀態(tài)下分析樣品。這是由*終使用什么樣品來(lái)決定的。如果以干燥形勢(shì)來(lái)使用或儲(chǔ)存樣品,用干燥分析方法較好。
一些樣品易和濕分散劑起反應(yīng),比如可能溶解或和液體接觸時(shí)膨脹,所以只能在干燥狀態(tài)下測(cè)量。
另一考慮問(wèn)題就是物質(zhì)在干燥狀態(tài)能否自由流動(dòng),良好的表現(xiàn)為不粘連干燥粉狀樣品,可以在進(jìn)料器中充分分解,而高粘性物質(zhì)卻易粘結(jié),使測(cè)量出現(xiàn)偏差。
樣品結(jié)塊只需要在烘箱中干燥一下即可。但精細(xì)的物質(zhì)在烘箱中干燥時(shí),樣品會(huì)受到破壞,為了去潮,應(yīng)將烘箱調(diào)到*溫度,但不要高于樣品熔點(diǎn)。
如果烘箱對(duì)樣品有明顯影響,可用干燥器。沒(méi)有在空氣中受潮的新樣品是很好用的,常有很好的效果。吸潮樣品應(yīng)將樣品盡快封裝入袋,以免吸潮。
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首次測(cè)量樣品的*步就是決定在濕狀態(tài)下還是在干狀態(tài)下分析樣品。這是由*終使用什么樣品來(lái)決定的。如果以干燥形勢(shì)來(lái)使用或儲(chǔ)存樣品,用干燥分析方法較好。
一些樣品易和濕分散劑起反應(yīng),比如可能溶解或和液體接觸時(shí)膨脹,所以只能在干燥狀態(tài)下測(cè)量。
另一考慮問(wèn)題就是物質(zhì)在干燥狀態(tài)能否自由流動(dòng),良好的表現(xiàn)為不粘連干燥粉狀樣品,可以在進(jìn)料器中充分分解,而高粘性物質(zhì)卻易粘結(jié),使測(cè)量出現(xiàn)偏差。
樣品結(jié)塊只需要在烘箱中干燥一下即可。但精細(xì)的物質(zhì)在烘箱中干燥時(shí),樣品會(huì)受到破壞,為了去潮,應(yīng)將烘箱調(diào)到*溫度,但不要高于樣品熔點(diǎn)。
如果烘箱對(duì)樣品有明顯影響,可用干燥器。沒(méi)有在空氣中受潮的新樣品是很好用的,常有很好的效果。吸潮樣品應(yīng)將樣品盡快封裝入袋,以免吸潮。
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