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送福利了 | 凝膠滲透色譜分析方法開發tips

賽默飛色譜與質譜中國 2022-11-25 14:08:19 244  瀏覽
  • 凝膠滲透色譜法是體積排阻色譜法的一種,以水或者緩沖液為流動相;以有機溶劑為流動相的一般叫凝膠過濾色譜法。


    兩者都屬于體積排阻色譜法(Size exclusion chromatography,SEC)。SEC是20世紀60年代發展的一種分離模式。它是根據空間結構不同的分子在多孔顆粒中的路徑不同而進行分離。原理如下


    原理

    看完原理給我們就有了一個小的tips啦:

    tips 1

    分子直徑比最 大孔隙直徑大的分子全部被排阻在凝膠顆粒以外,兩種或兩種以上的這樣的分子不能達到分離效果。

    tips 2

    分子直徑比最小孔隙直徑小的分子能全部進入凝膠顆粒內部,這樣的兩種或兩種以上的分子也不能達到分離效果。


    應用領域

    生物藥質控

    ?單抗
    ?雙抗
    ?ADC
    ?融合蛋白
    ?血液制品
    ?重組白蛋白
    ?糖蛋白
    ?PEG蛋白
    ?多肽
    ?多糖
    ?纖維素


    生物藥工藝監控

    ?單抗
    ?雙抗
    ?ADC
    ?融合蛋白
    ?血液制品
    ?重組白蛋白
    ?PEG蛋白
    ?多肽


    輔料和殘留分析

    ?吐溫80/20
    ?聚乙二醇
    ?泊洛沙姆
    ?聚乙烯吡咯烷酮


    食品化藥領域

    ?水溶性抗生素聚體分析
    ?乳品中乳白蛋白和乳球蛋白分離
    ?中藥中吐溫20/80


    不同的樣品由于空間結構不同,在同一根柱子上的排阻范圍不同。參考選用跟標準品結構最相近的排阻范圍內的柱子。如下BIOBASIC系列SEC色譜柱的不同標準品的校準曲線如下:



    方法開發考慮因素

    1、孔徑分布


    相近孔徑分布的柱子,在檢測同一個樣品時,聚體與主峰或者主峰與片段的分離可能會存在比較大的差異。


    2、粒徑

    不同的粒徑的相近孔徑分布的柱子,分析需要的柱長和分析時間會有差異。


    3、緩沖體系

    緩沖體系中流動相的組成,pH值可能會改變蛋白的三維結構和折疊狀態,進而影響單體,片段與聚體的分離。


    4、鹽濃度

    由于包裹技術的差異,樣品可能會跟色譜柱之間存在一些離子性吸附,這個時候,需要提高流動相中鹽的濃度來屏蔽這種作用。Mabpac SEC 系列優異的包裹技術,可以在比較低的鹽濃度下分析蛋白樣品,進而用于Native 質譜方法開發。



    僅僅給出方法開發tips怎么能表達我們的誠意呢,我們更推出了免費SEC做樣的服務,快快掃描以下二維碼報名參加吧:






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熱門問答

送福利了 | 凝膠滲透色譜分析方法開發tips

凝膠滲透色譜法是體積排阻色譜法的一種,以水或者緩沖液為流動相;以有機溶劑為流動相的一般叫凝膠過濾色譜法。


兩者都屬于體積排阻色譜法(Size exclusion chromatography,SEC)。SEC是20世紀60年代發展的一種分離模式。它是根據空間結構不同的分子在多孔顆粒中的路徑不同而進行分離。原理如下


原理

看完原理給我們就有了一個小的tips啦:

tips 1

分子直徑比最 大孔隙直徑大的分子全部被排阻在凝膠顆粒以外,兩種或兩種以上的這樣的分子不能達到分離效果。

tips 2

分子直徑比最小孔隙直徑小的分子能全部進入凝膠顆粒內部,這樣的兩種或兩種以上的分子也不能達到分離效果。


應用領域

生物藥質控

?單抗
?雙抗
?ADC
?融合蛋白
?血液制品
?重組白蛋白
?糖蛋白
?PEG蛋白
?多肽
?多糖
?纖維素


生物藥工藝監控

?單抗
?雙抗
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?融合蛋白
?血液制品
?重組白蛋白
?PEG蛋白
?多肽


輔料和殘留分析

?吐溫80/20
?聚乙二醇
?泊洛沙姆
?聚乙烯吡咯烷酮


食品化藥領域

?水溶性抗生素聚體分析
?乳品中乳白蛋白和乳球蛋白分離
?中藥中吐溫20/80


不同的樣品由于空間結構不同,在同一根柱子上的排阻范圍不同。參考選用跟標準品結構最相近的排阻范圍內的柱子。如下BIOBASIC系列SEC色譜柱的不同標準品的校準曲線如下:



方法開發考慮因素

1、孔徑分布


相近孔徑分布的柱子,在檢測同一個樣品時,聚體與主峰或者主峰與片段的分離可能會存在比較大的差異。


2、粒徑

不同的粒徑的相近孔徑分布的柱子,分析需要的柱長和分析時間會有差異。


3、緩沖體系

緩沖體系中流動相的組成,pH值可能會改變蛋白的三維結構和折疊狀態,進而影響單體,片段與聚體的分離。


4、鹽濃度

由于包裹技術的差異,樣品可能會跟色譜柱之間存在一些離子性吸附,這個時候,需要提高流動相中鹽的濃度來屏蔽這種作用。Mabpac SEC 系列優異的包裹技術,可以在比較低的鹽濃度下分析蛋白樣品,進而用于Native 質譜方法開發。



僅僅給出方法開發tips怎么能表達我們的誠意呢,我們更推出了免費SEC做樣的服務,快快掃描以下二維碼報名參加吧:






2022-11-25 14:08:19 244 0
加速色譜分析方法開發與驗證

近年來USP和ICH都針對分析方法開發與驗證進行了修訂。USP新收錄通則<1220>分析方法生命周期已于2022年5月1日生效,分別從分析方法開發、分析方法性能確認及分析方法使用三個階段分別闡述如何在分析方法整個生命周期內對方法進行管理。而ICH Q14分析方法開發和Q2(R2) 分析方法驗證的修訂也進入到了第三階段,按照計劃其將在2023年5月前完成階段的定稿。這些信息都表明了分析方法開發和驗證的管理將會變得更嚴謹、更科學。


因為色譜儀器包括色譜-質譜聯用技術在藥物開發過程中的廣泛使用,色譜分析方法的開發與驗證也成為了方法開發與驗證,乃至分析方法生命周期管理中的重要內容。針對色譜方法開發與驗證的整體流程,可以將其大致分為:方法篩選、方法優化、耐用性測試和完整的方法驗證這四個階段。



而這四個階段都離不開儀器準備、隊列運行、數據查看與處理以及報告這幾個環節。賽默飛的旗艦版色譜數據系統Chromeleon 軟件功能豐富而注重實踐,能夠幫助實驗室的色譜分析實現精簡、高效的工作流,以實現更快的樣品到結果的轉換。



自定義變量的靈活應用

在Chromeleon CDS 中創建隊列時可以通過手工填寫的傳統方式,也可基于事先建好的隊列模板。值得一提的是Chromeleon 強大的樣品列表功能。除了運行樣品的基本信息(樣品名稱、儀器方法、運行的其他必須參數)之外,還可以通過自定義變量的形式,添加額外的注釋信息,例如色譜柱類型、緩沖液名稱等用于清晰識別每一針進樣的信息。


使用者還可以進一步創建一些自定義變量并將其與儀器方法中的參數進行鏈接,更加簡單地實現實驗設計(DoE)的環節。一旦基本方法固定,便可通過改變色譜柱選擇閥或溶劑選擇閥等參數實現不同要素的組合以尋找具備可行性的色譜條件,也體現了ICH和USP所倡導的“多變量分析方法開發”這一方針。相比傳統的樣品隊列創建方式,減少了所需創建的儀器方法的數量,并以清晰直觀的模式展示了所使用的變量以及變量值,結合縮略圖功能提供了更直觀的信息。



在數據處理階段,可以再次利用Chromeleon 樣品列表中的自定義結果變量功能,可以方便地實現運行樣品的同時進行結果計算,例如系統適用性參數的計算,峰面積、含量以及測試是否通過等信息的顯示,幫助使用者快速查看所需信息以便靈活調整實驗的方向。



完全可定制的

Chromeleon

報告模板也支持自定義變量、公式和計算,使用者可以使用內置的模板,也可以根據需要進行調整,得到包括多個工作表、結果表和圖形的報告,無需導出到其他軟件,也無需手動計算,從而消除轉錄錯誤。所有報告和計算都可以在合規的環境中完成,并在源數據發生變化時自動更新。可以選擇在運行結束時自動打印、導出也可以發送電子郵件通知給相關人員。





更便捷的eWorkflow

Chromeleon 也提供一個創建序列、運行并得到結果的簡單而直接的方法,這就是eWorkflow。它最 大限度地減少了操作步驟并涵蓋了色譜或 MS 工作流程的所有方面,定義了可以在哪些儀器上運行分析以及應該使用哪些方法和文件,包括儀器方法、處理方法、報告和外部文件,例如 SOP。 


與前面提到的自定義變量等有效結合,只需單擊幾下即可創建復雜的序列并立即運行,并在運行后得到所需的報告。這些都可以減少錯誤、更快地產生可靠的結果,并且顯著減少了培訓的需求,有效加速了方法開發的流程。




分析方法驗證工具包

ICH指南定義了方法驗證應該執行包括專屬性、準確度、精密度、檢測和定量限度、線性、范圍和耐用性的測試。除了樣品運行的環節之外,計算、整理和報告驗證結果也可能需要很長的時間,而且大多數測試都涉及將結果與指標進行比較,相對比較繁瑣。 


在eWorkflow的基礎上,Chromeleon 又提供了一個方法驗證的高效工具,ICH方法驗證擴展包。擴展包內有一系列的模板,每個模板都包含處理方法、報告模板和自定義變量以覆蓋所需的變量和參數。所有這些都在 eWorkflow 程序中捆綁在一起,以確保正確執行ICH所要求的相關測試,減少人為錯誤并加速流程:eWorkflow 可以引導創建隊列,自動執行所有計算,并通過報告直接顯示通過或失敗的結論。



以上介紹的幾個工具僅為Chromeleon 強大功能的冰山一角。結合Chromeleon 實用的多廠商儀器控制能力出色的系統適用性智能運行控制功能,便捷的數據積分、處理功能,直觀的圖形化顯示,全面的合規能力,Chromeleon不但可以提升方法開發、驗證的效率,也一定能夠幫助色譜工作者執行分析方法生命周期的管理。





2022-12-07 12:03:22 269 0
和泰小年送福利,答題贏紅包!

你是否還在各大答題APP中穿梭趕場

是否用勁渾身解數

還是涼涼到半路

“一題”

終究不過海市蜃樓,夢幻一場

心痛到無法呼吸

我撒包,你撿幣,答題繼續..


如果您熱度不退,激情不減

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就來和泰試試不一樣的答題口味

只需答對5道題

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我們將從通關選手中

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1元....100元現金不等

祝您好運哦


答題開始


diyi題

1、和泰儀器除自有品牌和泰外,還du家代理了美國Thelab高端實驗室純水產品,請在下方選出正確的品牌標識:

A.Hitachi和泰;澤拉布Thelab

B.HHitech和泰;澤拉布Thelab

C.HHitech和泰;澤布拉Thelab

第二題


2、和泰專注于哪個領域的產品?

A.實驗室、YL、工業的純水/超純水產品

B.家用凈水器/凈水機

C.實驗室蒸餾水機/蒸餾水器

第三題

3、和泰及美國Thelab兩個品牌,共有哪幾大系列產品?

A.和泰品牌:Master系列、ECO系列、Medium系列、Central

美國Thelab品牌:Center系列、Super系列

B.和泰品牌:EDI系列、ECO系列、Master系列、Smart系列、Medium系列、Basic系列PWS、Extention parts、Central

美國Thelab品牌:Dura系列、Center系列、Super系列

C.和泰品牌:EDI系列、Smart系列、Basic系列PWS、Extention parts

美國Thelab品牌:Dura系列、Center系列、Super系列

第四題

4、由儀 器 信 息 網 主辦的“國產儀器騰飛行動”,以“用戶說好才是真的好”為宗旨,經過測評篩選,和泰成為實驗室純水領域唯yi蟬聯“國產好儀器”稱號的純水品牌,請問蟬聯“國產好儀器”的是以下哪兩款產品?

A.Smart-S;Smart-Q

B.ECO-S;ECO-Q

C.Master-S;Master-Q

第五題

5、和泰成立于2003年,2018新春佳節,即將迎來和泰的15周歲,在古代15歲又被稱為什么?

A.舞勺之年

B.舞象之年

C.志學之年


答題結束



測試和泰真愛粉的時間到了

點擊下方網站
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將于2月12日公布

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2月12日

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2019-06-13 09:45:33 336 0
【SY有禮】功率放大器免費SY,你體驗Agitek送福利

安泰一直專注研發功率放大器 ,助力國產化品牌替代,安泰的功率放大器廣泛應用于MEMS測試、超聲波測試、聲吶系統測試和壓電陶瓷驅動等等,受到高校、研發企業和研究所的青睞,安泰測試為了讓客戶更好的體驗產品,特推出功率放大器免費SY活動,你負責體驗儀器提交SY報告,我們為您提供免費樣機使用還有100-500元京東e卡免費送!

一、活動時間:4月30日—7月30日

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三、活動規則:

確定好產品點擊“我要SY”,并填寫相關信息即可,申請后會進行審核,審核通過后聯系發放產品!

四、活動禮品:

申請免費SY即可獲得禮品一份

五、SY報告:

所有樣機SY用戶,可以在收到產品SY后30日內提交SY報告。(注:選擇性參與,不強求,參與有獎!)

SY報告內容:圖文形式(如場景圖、產品細節圖等均可)至少三張,文字(300字以上即可)。

報告發布方式:發送至郵箱sales@agitek.com.cn,郵件主題為“SY報告+領獎人姓名”(格式請參照下方模板)

審核形式:根據收到的SY報告進行篩選,根據報告內容評選出不同等級獎項進行發放禮品。(如未按照此格式發布的,視為無效)

獎品:一等獎500元京東e卡二等獎200元京東e卡三等獎100元京東e卡

如需申請功率放大器樣機SY歡迎訪問安泰測試網。

2021-06-09 15:40:13 342 0
氣相色譜分析方法問題求助
 
2018-12-05 16:51:49 364 0
凝膠滲透柱層析
“凝膠滲透柱層析”是什么?它和一般的的“凝膠層析”有什么不同?還有適用范圍,操作步驟等等。在下是外行,越詳細越好! 謝謝了!
2011-01-08 03:11:45 629 1
凝膠滲透色譜儀適用于,凝膠滲透色譜儀適用于什么

凝膠滲透色譜儀(GPC)是一種重要的分析工具,廣泛應用于高分子化合物的分離與分析。本文將深入探討凝膠滲透色譜儀的應用領域,包括聚合物分析、生物大分子研究、藥物開發以及環境監測等,旨在展示其在現代科學研究和工業應用中的重要性。



在聚合物分析方面,凝膠滲透色譜儀被廣泛用于確定聚合物的分子量分布和結構特征。通過將樣品溶解并經過分離柱,研究人員能夠有效地分析聚合物的分子量和聚合物鏈的長度分布。這對于評估聚合物的性能、優化生產工藝以及控制產品質量至關重要。


在生物大分子研究中,GPC是分析蛋白質、核酸等生物分子的理想工具。通過與其他技術結合,凝膠滲透色譜能夠提供蛋白質的分子量和聚集狀態的信息,從而為生物學研究提供重要數據。這對于藥物靶點的確定、蛋白質工程及疫苗開發等領域均具有重要意義。



藥物開發是凝膠滲透色譜儀的另一個關鍵應用領域。在制藥行業中,藥物分子的大小和結構對其生物活性及體內代謝有直接影響。通過使用GPC,藥物化學家可以優化藥物分子的分子量及其藥物釋放特性,進而提高藥物的有效性和安全性。這一過程不僅提高了藥物開發的效率,也減少了不必要的臨床試驗成本。


凝膠滲透色譜儀在環境監測中同樣發揮著重要作用。隨著環境污染問題的日益嚴重,檢測和分析環境樣品中的有機污染物變得尤為重要。GPC能夠有效分離和分析水樣、土壤樣品中存在的多種有機污染物,幫助研究人員評估污染程度并制定相應的治理措施。這對于保護生態環境和公共健康具有重要意義。


凝膠滲透色譜儀在多個領域展現了其廣泛的適用性與重要性。從聚合物分析到生物大分子研究,再到藥物開發和環境監測,GPC不僅推動了科學研究的進步,也為工業應用提供了可靠的技術支持。未來,隨著技術的不斷發展與創新,凝膠滲透色譜儀將在更多領域中發揮更大的作用,成為科研與工業不可或缺的工具。

2024-11-01 11:20:54 54 0
氣相色譜分析方法有哪些定量方法
 
2010-04-13 20:02:02 580 2
送福利啦!!!安譜實驗室小型儀器服務月活動再度啟動

      2017年,我們為100位客戶500余臺儀器提供了保養服務。

      2018年我們再度啟動,繼續給大家送福利啦,上海地區的客戶,行動起來吧!

      根據我們的經驗,80%的實驗室小型儀器故障是由于平時疏于維護而引起的“慢性疾病”,日積月累爆發了導致的。因此我們建議定期維護保養您的實驗室小型儀器,避免儀器的突然無法正常工作對實驗的影響。

      安譜實驗推出本地維護保養服務活動,根據您所購買的安譜實驗室小型儀器,由安譜專業售后工程師提供免費上門預防性維護保養服務。

      服務對象:2017年購買安譜儀器、organomation、talboys儀器的上海客戶
      服務時間:2018年5-6月


      針對以下實驗室小型儀器進行免費上門維護保養服務,并現場提供專業的使用注意事項:


安譜氫氣發生器

維護保養服務內容:
·檢查氫氣輸出壓力及流量顯示
·檢查輸出接頭及氣路管
·檢查凈化管,更換凈化管填料及密封圈
·檢查空置凈化管,是否有返堿情況
·使用期一年以上,清洗電解池筒,重新配置及更換電解液
·檢查儀器運轉中是否有異常響聲
·檢查接地電阻

-----------------------------------------------

安譜空氣發生器

維護保養服務內容:
·檢查空氣輸出壓力及起跳間隔時間
·查看凈化管,更換凈化管填料及密封圈
·輸出接頭及氣路管檢查
·排氣管檢查是否漏氣,能否正常排氣
·清潔空氣過濾器
·檢查腳輪及風扇
·檢查儀器運轉中是否有異常響聲
·檢查接地電阻

-----------------------------------------------


安譜氮吹儀及水浴鍋

Organomation 氮吹儀及水浴鍋


維護保養服務內容:
·檢漏,各連接件之間是否漏氣
·檢查配件(更換舊F4盤,舊硅膠管,舊密封圈等)
·更換水浴鍋存水,清洗內膽
·檢查水浴鍋水溫是否符合實際溫度
·檢查儀器外觀
·檢查接地電阻

-----------------------------------------------

 

安譜分液漏斗振蕩器


talboys搖床

維護保養服務內容:
·檢查轉速
·檢查是否有異響聲
·導軌及軸承處加潤滑油
·檢查夾具橡皮套
·外觀清潔
·檢查接地電阻

-----------------------------------------------

 

talboys 漩渦混合器

磁力加熱攪拌器

維護保養服務內容:
·檢查轉速及加熱情況
·檢查是否有異響聲
·檢查接地電阻

 

*本活動Z終解釋權歸上海安譜實驗科技股份有限公司所有


2019-06-19 10:09:45 370 0
新年送福利 | 瑞沃德細胞分子全線產品免費延保

2022-01-04 11:48:31 151 0
AmpliPur Expert Tips正式上市








2021-06-09 13:42:50 165 0
AmpliPur Expert Tips正式上市

2021-06-10 17:02:47 262 0
求均四甲苯氣相色譜分析方法
求均四甲苯氣相色譜分析方法
2013-11-10 07:28:18 658 2
凝膠滲透色譜儀樣品標準,凝膠滲透色譜儀樣品標準是多少

?凝膠滲透色譜儀(GPC)的樣品標準主要包括以下幾個方面?:


?樣品量?:粉末樣品不得少于10mg,液體樣品量為5-10ml?1。

?溶解性?:送樣前需要確認樣品在指定流動相中的溶解性。難溶樣品需要自行溶解并確保溶液透明均一,過濾頭不堵?1。

?過濾?:有機相樣品需要過0.45μm濾膜,水相樣品需要過0.22μm濾膜?1。

?流動相選擇?:不同流動相對分子量范圍有不同的要求,例如DMF適用于3000-100萬分子量范圍,THF適用于500-200萬分子量范圍?1。

?凝膠滲透色譜儀(GPC)的基本原理和適用范圍?:


GPC是一種基于分子尺寸分離高分子物質的有效方法。其核心原理是利用具有化學惰性的凝膠填料,通過不同分子量的高分子在多孔填料中的滲透速率差異來實現分離。大分子被排除在顆粒小孔外,流動速率快,小分子可進入顆粒孔隙,滯留時間長。GPC不僅能用于分離和測定高分子化合物的相對分子質量分布,還能分析小分子物質,適用于各種流動相和溫度條件?2。


?凝膠滲透色譜儀的主要部件和技術指標?:


GPC的主要部件包括泵系統、自動進樣系統、凝膠色譜柱、檢測系統和數據采集與處理系統。技術指標如流速范圍、壓力范圍、檢測器波長范圍等都有詳細規定。例如,流速范圍為0.01-9.99ml/min,壓力范圍為0-4Mpa,檢測器波長范圍為190-600nm?3。


通過以上標準和技術指標,可以確保GPC在樣品分析和分離過程中的準確性和可靠性。

2024-11-01 11:36:25 86 0
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* 此次活動最終解釋權歸瑞沃德所有


2021-10-11 10:20:23 169 0
用c#開發的了機器視覺嗎
 
2018-11-17 12:18:55 356 0
凝膠滲透色譜儀結構簡圖,凝膠滲透色譜中的凝膠指的是

凝膠滲透色譜儀(GPC)是一種用于分離和分析聚合物和生物大分子的重要儀器。本文將探討凝膠滲透色譜儀的基本結構和功能,旨在幫助讀者更好地理解其在材料科學和化學分析中的應用。

凝膠滲透色譜儀的基本結構由幾個關鍵部分組成,包括進樣系統、色譜柱、流動相系統、檢測器和數據處理系統。每個部分都有其特定的功能,共同作用以實現有效的分離和定量分析。

進樣系統是樣品處理的起始點,負責將待分析的樣品引入色譜柱。通常,樣品需要經過過濾,以去除可能影響分析結果的顆粒物質。進樣系統的設計必須確保樣品的準確性和重現性。


接下來是色譜柱,它是凝膠滲透色譜儀的核心組件。色譜柱內填充有特定的凝膠材料,常用的有聚合物基質或硅膠。凝膠的孔徑大小決定了分離的靈敏度和選擇性。當樣品通過色譜柱時,不同分子會根據其大小和形狀進行分離。大分子由于無法進入凝膠的孔隙,通常會較快流出,而小分子則能夠進入孔隙,導致其流出時間延遲。

流動相系統負責將樣品溶液以一定的流速輸送至色譜柱。流動相的選擇對于分析結果的準確性至關重要。常見的流動相包括水、鹽溶液和有機溶劑,選擇合適的流動相可以有效提高分離效果。

檢測器是凝膠滲透色譜儀的后一個重要部分,常用的有折光率檢測器(RID)、紫外-可見光檢測器(UV-Vis)等。檢測器的功能是實時監測流出樣品的濃度變化,從而得到相應的色譜圖。通過對色譜圖的分析,研究人員可以獲得樣品的分子量分布、聚合度及其他重要參數。

數據處理系統將檢測器獲取的信號轉化為可視化的數據,并進行進一步的分析。現代的凝膠滲透色譜儀通常配備先進的軟件,能夠自動處理和分析數據,為研究人員提供準確的結果。

凝膠滲透色譜儀通過其精密的結構和各個組件的協作,能夠高效、準確地分析聚合物和生物大分子的特性。隨著科學技術的不斷進步,凝膠滲透色譜儀在各個領域的應用將愈加廣泛,成為科研和工業生產中不可或缺的工具。理解其結構和工作原理,將為研究者在實際應用中提供更為堅實的基礎。

2024-11-01 11:32:44 68 0

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