紅外光譜單一組分樣品的定量分析方法
紅外光譜單一組分樣品的定量分析方法主要基于朗伯-比爾定律(Lambert-BeerLaw),通過吸光度與濃度的線性關系實現(xiàn)定量。以下是三種常用方法及其**要點:
朗伯-比爾定律(Lambert-Beerlaw),其公式如下:
A=kLc=-lg(T)=-lg(I/I0)
一、直接計算法
適用條件:
樣品特征吸收峰孤立(無溶劑或雜質(zhì)干擾)
濃度與吸光度呈嚴格線性關系
步驟:
測定摩爾吸光系數(shù)(k):通過標準樣品確定特定波長下的k值。
計算濃度:利用公式c=A/K*L,其中A為吸光度,L為光程(吸收池厚度)。特點:簡單快速,但需已知k值且對實驗條件敏感(如光程誤差影響大)
二、工作曲線法(標準曲線法)
適用條件:
特征峰存在基線干擾或輕微重疊
濃度與吸光度非嚴格線性
步驟:
制備標準樣品:配制一系列已知濃度的標準溶液。
基線校正:采用峰面積積分或切線法消除基線影響。
繪制曲線:以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標建立線性回歸方程。
樣品測:將未知樣品的吸光度代入曲線計算濃度。
特點:
靈活性強,適用于復雜基線或非理想線性關系,需同一吸收池保證光程一致。
三、內(nèi)標法
適用條件:
光程難以精確控制(如壓片法、液膜法)
需消除樣品制備誤差
步驟:
選擇內(nèi)標物:與樣品分析峰無重疊的穩(wěn)定化合物(如K?[Fe(CN)?])。
標定比例常數(shù)(K):混合已知量的樣品與內(nèi)標物,通過公式k=kb/kx=(Ab/Ax)?(cx/cb)計算。
測定未知樣品:混合樣品與內(nèi)標物,利用k=kb/kx=(Ab/Ax)?(cx/cb)計算濃度。
特點:
抵消光程波動誤差,提高準確性,但需優(yōu)化內(nèi)標物選擇。
四、方法選擇與注意事項
1.方法對比:
直接法:快速但要求嚴格線性;
工作曲線法:通用性強,適合復雜樣品;
內(nèi)標法:解決光程不確定性問題。
2.關鍵參數(shù):
吸光度測量需避開溶劑吸收區(qū)(如選擇特征峰肩部)。
固體樣品需控制壓片壓力和KBr純度,液體樣品避免水分干擾。
3.應用實例:
食品中反式脂肪酸、生物柴油含量測定等均采用上述方法。
通過合理選擇方法并控制實驗條件,紅外光譜可實現(xiàn)單一組分的高效定量分析。
標簽:紅外光譜
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