9热视频_一区免费在线_亚洲国产AV无码专区亚洲AV_免费日本中文字幕_99人人澡_国产精品九色

儀器網(yiqi.com)歡迎您!

| 注冊 登錄
網站首頁-資訊-專題- 微頭條-話題-產品- 品牌庫-搜索-供應商- 展會-招標-采購- 社區-知識-技術-資料庫-方案-產品庫- 視頻

問答社區

基因芯片和熒光定量pcr的異同

巷子口beut 2017-06-09 21:59:33 1247  瀏覽
  •  

參與評論

全部評論(1條)

  • wo叫大姐姐i 2017-06-10 00:00:00
    基因芯片(genechip)(又稱DNA芯片、生物芯片)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對應位置的核酸探針產生互補匹配時,通過確定熒光強度Z強的探針位置,獲得一組序列完全互補的探針序列。據此可重組出靶核酸的序列。 基因芯片技術由于同時將大量探針固定于支持物上,所以可以一次性對樣品大量序列進行檢測和分析,從而解決了傳統核酸印跡雜交(Southern Blotting 和 Northern Blotting 等)技術操作繁雜、自動化程度低、操作序列數量少、檢測效率低等不足。而且,通過設計不同的探針陣列、使用特定的分析方法可使該技術具有多種不同的應用價值,如基因表達譜測定、突變檢測、多態性分析、基因組文庫作圖及雜交測序等。 熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術,它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結合相應的軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。 PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。或者使用熒光染料SYBR。SYBR可以結合到雙鏈DNA上面,當體系中的模板被擴增時,SYBR可以有效結合到新合成的雙鏈上面,隨著PCR的進行,結合的SYBR染料越來越多,被儀器檢測到的熒光信號越來越強,從而達到定量的目的。

    贊(14)

    回復(0)

    評論

獲取驗證碼
我已經閱讀并接受《儀器網服務協議》

熱門問答

基因芯片和熒光定量pcr的異同
 
2017-06-09 21:59:33 1247 1
熒光定量和基因芯片分別是檢測什么
 
2017-05-26 14:15:10 369 1
熒光定量PCR試劑

熒光定量PCR試劑本生(天津)健康科技有限公司供應:移液器吸嘴,離心管,凍存管,培養皿全系熒光定量PCR耗材,產品包括:PCR單管、PCR八聯管、96孔板、384孔板。

CG編號    產品描述    包裝規格

DBI-2073    Bestar? SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2043    Bestar? SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2044    Bestar? SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2074    Bestar? qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2041    Bestar? qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2042    Bestar? qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2141    Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2142    Stormstar qPCR Master Mix (Taqman Probe)    
DBI-2143    Storm star SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2144    Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix    
DBI-2241    Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)(UNG)    
DBI-2242    Storm star qPCR Master Mix (Taqman Probe)(UNG)    
DBI-2243    Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix (UNG)    
DBI-2244    Stormstar SybrGreen qPCR Master Mix (UNG)    
DBI-2220    Bestar? qPCR RT Kit ( gDNA Remover )    
DBI-2222    Bestar? qPCR RT Mix ( gDNA Remover)    
DBI-2223    Bestar? one step RT qPCR kit ( SybrGreen )    
DBI-2224    Bestar? one step RT qPCR kit ( SybrGreen )    
DBI-2225    Bestar? one step RT qPCR kit ( SybrGreen )    
DBI-2226    Bestar? one step RT qPCR kit ( Taqman Probe )    
DBI-2227    Bestar? one step RT qPCR kit ( Taqman Probe )    
DBI-2228    Bestar? one step RT qPCR kit ( Taqman Probe )    
DBI-2231    Bestar? HRM Master Mix    
DBI-2232    Bestar? HRM Master Mix    
DBI-2233    Universal qPCR Mix (Taqman probe)    
DBI-2234    Universal qPCR Mix (Taqman probe)    
DBI-2235    High-throughput qPCR Mix (Taqman probe)    
DBI-2236    High-throughput qPCR Mix (Taqman probe)

包裝規格:

25 ml    
5 ml    
1 ml    
5 ml    
200 Reaction    
100 Reaction (50uL)

熒光定量PCR試劑

產品優勢:本生生物代理實驗室R耗材品種全,可替代儀器原廠耗材,性價比高,質量穩定,對用戶可以節省實驗成本。

適應客戶:醫院檢驗科PCR實驗室,驗室;第三方檢測機構,科研院所,大專院校,制藥廠,試劑生產廠家,疾控,檢驗檢疫。

2021-10-13 15:23:06 306 0
熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項!

  高通量的96孔PCR板和8聯管是在聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中,主要作為參與擴增反應的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、緩沖液等的承載物。醫療級聚丙烯(PP)材質因其極高的純凈度和穩定性,能更好適應PCR反應過程中反復高低溫設定,并且能夠實現高溫高壓滅菌操作,常常被用于PCR耗材的生隨著熒光定量PCR技術的普及,該技術被廣泛用于遺傳、生化、免疫、醫藥等領域,不僅應用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的研究領域。

  如何正確使用96孔PCR孔板

  PCR板有透明和乳白色可選,其中乳白色更適合用于頂部采集熒光信號的新型熒光定量PCR儀(如伯樂CFX系列,ABI 7500fast 以上型號, Roche 480系列),但如果熒光定量PCR儀是底部光源的,則應選擇透明的。

  PCR板根據裙邊設計又可分為無裙邊、半裙邊和全裙邊三種設計模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會設計不同的切角或邊緣凸起,請選擇適合該PCR儀的板子。

  PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板),根據機型的不同選擇,選擇不同高度孔板,避免高度錯誤對機器造成破壞和加熱不均導致數據失真。

  當使用96孔板做熒光定量PCR實驗的時候,推薦使用光學膜代來密封反應孔。

  加樣后會在管壁上飛濺一些小液滴,另外反應體系內也會有一些氣泡,需要離心去掉掛壁液滴和氣泡。請使用專用的微孔板離心機解決上述問題。

  PCR板屬于一次性消耗品,生產一次成型,不建議剪開使用容易造成實驗誤差增加,不能清洗或部分重復利用。不要為了節省一點小錢,而給實驗帶來后續分析上的困擾。

  樣本量少,用8聯管做實驗又該注意哪些呢?

  8聯管也分乳白和透明兩種,選擇方式和孔板一樣,根據PCR儀的熒光信號采集方式決定。

  8聯管同樣也有0.1ml(矮管)和0.2ml(高管),根據PCR儀的加熱模塊體積確定。

  8聯管的蓋子一般有光學平蓋和凸型圓蓋之分,光學平蓋適用于熒光定量PCR,圓蓋適用于普通PCR。

  使用單管或8聯管做實驗,并且樣本數量不多的時候,建議在樣品加熱塊(TRAY)上對稱地安放樣品,是縱向放置,并且優先放在第6列或第7列,然后逐漸向兩邊放置。這樣做的好處是熱蓋壓下來的時候不至于發生傾斜,各個反應管的受力和受熱都比較均勻,提高孔與孔之間的數據精密性。也可以在加熱模塊四角的位置,放置4個單管平衡熱蓋壓力,避免擴增少量樣本時出現管子變形的情況。

  管蓋沒有蓋好造成PCR反應液熱蒸發,影響反應溫度的準確控制及反應也各成份的濃度,同時也成為一個污染源。不但會因壓蓋時由于粗心或者用力不均致使部分蓋子變形,而且還會造成樣品的交叉污染,所以我們推薦用獨立管蓋的8聯管,每管蓋一體,確保樣本獨立反應,避免交叉污染。


  注:以上資料僅供參考!


2022-01-20 10:25:48 825 0
探針法熒光定量PCR
 
2017-01-20 13:39:41 389 2
熒光定量PCR檢測報告單
患者信息:男29歲江西南昌病情描述(發病時間、主要癥狀等):我前一個星期檢測患有前列腺炎,它有張單子是熒光定量PCR檢測報告單,顯示:CT結果《220檢測下限220單位copies/mlUU結果《... 患者信息:男 29歲 江西 南昌 病情描述(發病時間、主要癥狀等): 我前一個星期檢測患有前列腺炎,它有張單子是熒光定量PCR檢測報告單,顯示: CT 結果《220 檢測下限 220 單位 copies/ml UU 結果 《300 檢測下限 300 單位 copies/ml 這樣的結果正常嗎? 展開
2011-08-24 02:09:02 695 1
熒光定量PCR中的IPC和IAC的區別
 
2018-12-05 09:57:15 388 0
多通道熒光定量pcr和單通道有什么區別
 
2018-03-31 05:20:25 528 1
我需要做熒光定量PCR
設計引物后發現有多種純化方式可以選擇,比如DSL、PAGE、HPLC等等,效果上有什么區別嗎?我應該怎么選擇?
2017-08-08 14:02:27 481 1
求解熒光定量PCR檢測報告單
檢測項目樣品濃度單位CT值參考范圍UU-DNA<1000IU/ML>40<1.00E+3CT-DNA<1000IU/ML32.56男.30歲外陰有扯痛感精子帶血絲陰囊有墜漲請教這是什么問題.是不是得了性病或艾滋病.... 檢測項目 樣品濃度 單位 CT值 參考范圍 UU-DNA <1000 IU/ML >40 <1.00E+3 CT-DNA <1000 IU/ML 32.56 男.30歲 外陰有扯痛感 精子帶血絲 陰囊有墜漲 請教這是什么問題.是不是得了性病或艾滋病. 展開
2010-02-28 16:54:41 544 1
熒光定量PCR檢測報告單 怎么看
項目HBV結果6.681*10的7次方檢測下線500單位copies/ml... 項目 HBV 結果 6.681*10的7次方 檢測下線 500 單位copies/ml 展開
2009-03-24 04:40:21 903 4
熒光定量pcr特點有哪些?

熒光定量PCR特點:現代分子生物學研究中的重要工具

熒光定量PCR(qPCR,Quantitative Polymerase Chain Reaction)技術是一種用于定量分析特定DNA或RNA序列的實驗技術。近年來,隨著生物醫學研究的迅猛發展,熒光定量PCR已成為分子生物學中不可或缺的工具。其獨特的優勢,如高靈敏度、精確度和實時監控等,使其廣泛應用于基因表達分析、疾病診斷、基因拷貝數檢測以及病原微生物檢測等多個領域。本文將深入探討熒光定量PCR的主要特點,并分析其在現代分子生物學研究中的重要性和應用前景。

一、實時監控與高靈敏度

熒光定量PCR的大特點之一是能夠實時監控PCR反應過程中的DNA擴增情況。在傳統PCR中,擴增結果通常通過凝膠電泳檢測,而熒光定量PCR則通過熒光染料或熒光探針實時檢測PCR產物的增加量,從而可以在擴增的每一個循環中獲取數據。這一過程不僅能提供定量數據,還能精確地反映每個樣本中目標基因的初始濃度。

熒光定量PCR具有極高的靈敏度,能夠檢測到極低濃度的DNA或RNA樣本。即使是微量的基因或病原微生物,也可以通過這種方法實現準確的定量分析,這對于早期診斷和低拷貝數基因檢測至關重要。

二、廣泛的應用領域

熒光定量PCR的應用范圍極為廣泛,涵蓋了從基礎研究到臨床應用的多個領域。在基因表達研究中,qPCR被廣泛用于分析特定基因在不同條件下的表達水平變化。通過比較不同樣本中目標基因的表達量,研究人員可以揭示基因調控的機制和與疾病發生的關系。

在臨床診斷中,熒光定量PCR也發揮了重要作用。例如,病毒載量的檢測、癌癥相關基因突變的檢測等,均可通過qPCR進行定量分析。熒光定量PCR還可用于檢測病原體,如細菌、病毒等微生物的感染水平,從而為疾病的早期診斷和提供可靠的依據。

三、快速高效且具有高精確性

熒光定量PCR的另一個顯著特點是其高效性。與傳統的PCR方法相比,qPCR不僅能夠在較短時間內完成實驗,還能通過使用專門的熒光探針或染料,提高對特定DNA或RNA序列的檢測精度。不同于傳統PCR僅能提供陽性或陰性的結果,熒光定量PCR能量化每個樣本的擴增過程,提供更加詳細的數據,確保實驗結果具有更高的可靠性。

這種高效性和精確性使得熒光定量PCR成為了臨床實驗室、研究機構以及生物技術公司日常工作中的工具。通過精確控制每一個PCR周期,熒光定量PCR能夠有效減少實驗中的誤差,提高實驗結果的可重復性。

四、定量化與高通量檢測

隨著大規模篩選和高通量數據分析的需求不斷增加,熒光定量PCR技術也在高通量檢測中發揮著越來越重要的作用。通過多重PCR反應,研究人員可以同時檢測多個目標基因,這大大提高了實驗的通量和效率。熒光定量PCR的定量化能力使其在基因組學、轉錄組學等高通量分析中,成為了數據采集的核心技術。

五、結論

熒光定量PCR憑借其高靈敏度、實時監控、高精度及廣泛的應用領域,已成為分子生物學研究和臨床診斷中的重要工具。其在基因表達分析、病原檢測、基因突變篩查等方面的優勢,使其在科研和臨床工作中扮演著至關重要的角色。隨著技術的不斷發展,熒光定量PCR的應用前景將更加廣闊,為生命科學領域帶來更為深遠的影響。

2025-01-15 12:15:13 22 0

6月突出貢獻榜

推薦主頁

最新話題

主站蜘蛛池模板: 宅男伊人_四虎2023_一级日韩一级欧美_人人做人人爽人人添_一本大道无码人妻精品专区_人妻少妇波多野结衣_偷偷做久久久久网站_丰满少妇2中文在线观看 | 国产麻豆一区二区三区在线观看_久久精品国产首页027007_亚洲国产精品自产在线播放_免费精品国偷自产在线青年_日韩无马砖区芒果_美女全黄视频_国产精品自在线_蜜臀久久99精品久久久久久 | 九色在线网站_日韩一级黄_老人把我添到了高潮A片_免费看片的视频69xxx_欧美在线欧美在线_精品久久久国产_精品日韩av_精品无人区无码乱码大片国产 | 在线综合色_不付费看污软件片_日韩国产成人无码AV毛片_国产xxxxx视频_国产无吗一区二区三区在线欢_亚洲国产欧美中文手机在线_日本乳首の奶水在线观看视频_最近中文字幕mv免费视频 | 91久久久久久久久久久久久久_老熟女毛茸茸_国产精品人人妻人人爽人人牛_日本乱人伦AⅤ精品_免费日韩网站_国产无遮挡又黄又大又爽_人妻少妇中文字幕久久_国精产品一码一码三MBA | 好男人资源在线观看好_一本一本久久a久久精品综合_久草在线视频新_欧美亚洲日韩不卡在线在线观看_一区二区三区免费观看_成在线人免费视频_久久免费视频2_国产高清黄色片 | 男女性潮高清免费网站_www.亚洲区_插插无码视频大全不卡网站_国产福利99_乱人伦中文无码视频在线观看_国精无码欧精品亚洲一区_柠檬av导航_精品少妇XXXX | 中国黄色a级_午夜剧场韩_国产av刺激无码_视频二区不卡_美女裸体爆乳免费网站_亚洲国产精品女人久久久_亚洲五月丁香综合视频_小泽玛利亚一区二区在线观看 | 欧美日韩高清一区二区_www.se天堂_99国产精成人午夜视频一区二区_亚洲国产高清在线一区二区三区_久久婷婷五月综合色99啪_国产婷婷色一区二区三区在线_小尤奈无码视频_a4yy欧美一区二区三区 | 成人性生活免费看_最新综合精品亚洲网址_精品国产福利在线观看_天干天干夜啦天干天干国产_亚洲欧美日韩国产综合在线_久久久久国产一区二区_在线网站_三级免费黄 | 97超碰人人爽_91男生福利_丰满人妻一区二区三区av猛交_人妻天天爽夜夜爽一区二区_少妇人妻偷人精品一区二区_麻豆短视频免费_国产伦精品免费视频_夜夜欢天天干 | 亚洲一区二区三区写真_免费黄色一区二区_97欧美精品系列一区二区_在线综合亚洲_中文字幕亚洲综合_性做久久久久_亚洲小视频在线观看com_免费污站18禁的刺激 | 国产成人在线播放免费视频_99免费在线观看视频_国产精品白浆在线观看无码专区_曰本不卡视频_国产91网站在线观看_精品国产黄_久久一二三四_japanese乱子xxxx | 精品欧美性_亚洲大乳av成人天堂精品_色眯眯av_日本最黄一级片免费在线_天堂а在线中文在线新版_绿巨人在线观看免费观看在线nba动漫_亚洲一一在线_亚洲美女在线播放 | 一区二区三区日本久久久_日本老妇xxxx_国产成人动漫_天天干天天操天天做_国产99午夜精品一区二区三区_中文字幕人妻丝袜成熟乱_亚洲中文字幕一区二区精品_国产高清在线精品二区 | 99精品久久毛片a片_日本边添边摸边做边爱的网站_国产免费97_精品久久久一二三区_99久RE热视频这里只有精品6_亚洲一级大黄大色毛片_久久国产精品麻豆_av毛片在线观看地址 | 水中色av综合_久久婷婷五月综合尤物色国产_做暖暖小视频免费xo_久久久久精品无码专区_四虎国产成人_九九热在线视频免费观看_手机成人在线观看_999久久久精品一区二区 | 奇米狠狠干_哈哈哈哈哈第4季免费视频高清_日本网站在线观看一区二区三区_久久久少妇高潮久久久久_四色导航_欧美精品久久久久久久久老牛影院_亚洲狠狠婷婷综合久久久久图片_欧美疯狂xxxxbbbb牲交 | 精品国产亚洲一区二区三区_给我看免费播放片的视频_国产成人久久AV一区二区_av在线free_国产尤物在线视频_国产精品麻豆传媒_性夜影院爽黄E爽_99久久免费国产精精品 | 日日色av_欧美成年_voyeur精品偷窥_丝袜美腿一区二区三区_兔子先生高清在线观看_精品国产伦一区二区三区_无码精品AV久久久免费_精品久久人妻AV中文字幕 | 国产精品久久久久久99999_在线看片免费人成视频影院看_亚洲成人av片_久久久老熟女一区二区三区_AV激情亚洲男人的天堂_午夜小视频网站_免费av看_久久69精品久久久久久国产越南 | 日本熟妇无码色视频在线观看_国产八十老太另类_国产一级黄色小视频_亚洲一二三四在线_久久99精品视频一区97_又粗又大又黄又爽的免费视频_国产欧美在线看_精品久久久99 | 亚洲乱亚洲乱妇无码_午夜dj高清www免费视频_久久久久国产A免费观看RELA_国产在线一二区_特黄免费av_AV不卡在线永久免费观看_日本熟妇洗澡videos_与子乱对白在线播放单亲国产 | 136fldh导航福利微拍_不卡一区二区在线_一本色道综合久久亚洲精品_一区二区三区高清在线视频_我色综合_在线观看人成_国产精品国产三级国产普通话_青草久久久久 | 日本成人小视频_giga特摄剧在线官网_亚洲产国偷V产偷V自拍色戒_久久久一区二区精品_97久久亚洲_黄色高清免费_999久久a精品合区久久久_国产AV无码专区亚洲AV桃花庵 | 久久AV老司机精品网站导航_国产六月婷婷爱在线观看_黄色a级片在线观看_亚洲精品无码久久久久去Q_在线观看最新中文字幕AV_九九热精品视频在线免费观看_3456成人看片_久久黄色视 | 无码专区永久免费AV网站_日本少妇被黑人xxxxx软件_狂野欧美激情性XXXX按摩_av喷水高潮喷水在线观看com_豆奶导航_中国av一级片_欧美一区二区三区国产精品_国产精品丝袜肉丝出水 | 国产拍精品一二三_日韩久久久久久久久久久久_无码人妻一区二区三区A片_免费九一_在线欧美鲁香蕉94色_精品久久久久久久久亚洲_久久字幕精品一区_男生夜间福利免费网站 | 亚洲精品无码人妻无码_亚洲高清不卡视频_国产性夜夜春夜夜爽1A片_久久17_在线看片无码永久免费aⅴ_亚洲精品有限公司_久久久成人影院_亚洲精品乱码久久久久久不卡 | 小黄文纯肉污到你湿_狠狠色伊人亚洲综合成人_一区二区高清_久久综合久久受_XXXX乌克兰高潮喷水_chinese少妇国语对白_草青青视频_久草tv | 人人妻人人妻人人片av_精品深夜福利视频_日韩一区二区在线观看_少妇高潮av久久久久久_一区二区的视频_换着玩人妻中文字幕_日本激情视频在线播放_www.99视频 | 一级黄色录像影片夫妻性生活影片_日本道色综合久久影院_国产精品xxx在线观看_激情婷婷_亚洲精品免费在线观看视频_亚洲三级性片_国产97视频人人做人人爱_懂色av色香蕉一区二区蜜桃 | 久久久婷婷国产精品_九九欧美视频_欧美成人久久久_玖玖爱国产精品_www.77伦理bt.com_国产精品对白一区二区三区_亚洲精品一区二区三区四区_精品国产综合乱码久久久久久 | 欧美日韩欧美日韩在线观看视频_性吧有你.com_97在线中文字幕观看视频_澳门黄色网_精品a在线_久久久高清免费视频_乱子伦精品免费久久99_国模精品一区二区三区色天香 | 老熟妇乱子交视频一区_影视免费观看_国产精品538一区二区在线_久久久噜噜噜久久熟女AA片_91热视频在线观看_国产一级二级视频_久草在线免费福利资源站_av色久 | a级片观看_91丨porny丨最新_亚洲国产日韩a综合在线_女人黄色毛片_久久久国产日韩_深夜免费看_国产wwwxx_亚洲中文字幕日韩无码 | avav国产_高清dvd碟片生活片_日韩性公交车上xxhd_青天衙门高清第一部免费观看_人妻引诱中文字幕_国产91av视频在线_在线免费黄色片_jizz欧美性3 | 国产一区二区三区中文字幕_av免费在线播放网址_国产精品视频免费一区二区_91九色porny在线_又粗又硬成人免费大片_亚洲综合色噜噜狠狠网站超清_日本免费二区三区_无码丰满熟妇一区二区 | 日本三级动作片_色哟哟网页_少妇撒尿一区二区在线视频_图片区小说区另类春色_女人19毛片一级毛片_久久香蕉网站_国产精品网站在线观看_免费黄色大片 | 天天av天天爽_久久只有精品_ririai886国产在线观看_亚洲日韩蜜桃av在线观看_亚洲视频免费看_免费a网站_大地免费资源观看_色婷婷婷亚洲综合丁香五月 | 精品美女久久久久_高清视频一区二区_亚洲s色大片在线观看_欧美成年人在线观看_亚洲精品福利视频_性猛交xxxxx按摩欧美_这里只有精品免费_国产黄频免费高清视频 |